微生物实验室建设讲稿.ppt
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1、关于微生物实验室建设第一页,讲稿共五十八页哦实验室的分类1.净化(洁净)实验室:w经过合理布局,采用专门围护结构和无缝地面,划分不同区域(一更、二更、缓冲、净化区),通过机械系统,将经初、中、高三效过滤后的洁净风流送至室内,并在不同区域形成正压,不同区域形成一定的压差。第二页,讲稿共五十八页哦净化室的等级 等 级 空气中0.5um尘粒数/m3 5um尘粒数/m3100级35100(3.5)1000级351000(35)250(0.25)10000级3510000(350)2500(2.5)100000级35100000(3500)250(25)第三页,讲稿共五十八页哦净化室的用途w净化实验室在
2、电子工业、仪表和电脑软件、制药、食品生产中被广泛使用。在医疗和疾控部门则主要用于手术室、透析室以及产品的微生物指标检测。第四页,讲稿共五十八页哦2.生物安全防护实验室w在以微生物为实验(检测)对象的实验工作中,针对微生物危害程度建设的可以预防生物危害,保障工作人员自身和临近安全的实验室称为生物安全防护实验室。第五页,讲稿共五十八页哦生物安全防护三原则w实验室生物安全防护的内容包括:w安全设备、个体防护装置和措施(一级防护)w实验室的特殊设计和建设要求(二级防护)w严格的管理制度和标准化的操作程序和规程第六页,讲稿共五十八页哦术语和定义术语和定义2.1 生物因子生物因子biological ag
3、ents 一切微生物和生物活性物质一切微生物和生物活性物质2.2 病原体病原体pathogens 可使人、动物或植物致病的生物因子。可使人、动物或植物致病的生物因子。2.3 危险废弃物危险废弃物hazardous waste 有有潜潜在在生生物物危危险险、可可燃燃、易易燃燃、腐腐蚀蚀、有有毒毒、放放射射和起破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物。和起破坏作用的对人、环境有害的一切废弃物。2.4 危害危害risk 伤害发生的概率及其严重性的综合。伤害发生的概率及其严重性的综合。2.5 气溶胶气溶胶aerosols 悬悬浮浮于于气气体体介介质质中中的的粒粒径径一一般般为为0.001100的的固固态或
4、液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。第七页,讲稿共五十八页哦2.6 生物安全生物安全biosafety避避免免危危险险生生物物因因子子造造成成实实验验室室人人员员暴暴露露、向向实实验验室室外外扩扩散散并并导致危害的综合措施。导致危害的综合措施。2.7 高效空气过滤器高效空气过滤器high efficiency particulate air filter(HEPA)通通常常以以滤滤除除大大于于等等于于0.3微微粒粒为为目目的的,滤滤除除效效率率符符合合相相关要求的过滤器。关要求的过滤器。2.8安全罩安全罩 safety hood置置于于实实验验室室工
5、工作作台台或或仪仪器器设设备备上上的的负负压压排排风风罩罩,以以减减少少实实验室工作者的暴露危险。验室工作者的暴露危险。2.9生物安全柜生物安全柜 biological safety cabinet(BSC)负负压压过过滤滤排排风风柜柜。防防止止操操作作者者和和环环境境暴暴露露于于实实验验过过程程中中产生的生物气溶胶。产生的生物气溶胶。2.10个人防护装备个人防护装备personal protective equipment(PPE)用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。第八页,讲稿共五十八页哦2.11 实验室分区实验室分区
6、 laboratory area按按照照生生物物因因子子污污染染概概率率的的大大小小,实实验验室室可可进进行行合合理理的分区。的分区。2.12 缓冲间缓冲间buffer room设设置置在在清清洁洁区区、半半污污染染区区和和污污染染区区相相临临两两区区之之间间的的缓缓冲冲密密闭闭室室,具具有有通通风风系系统统,其其两两个个门门具具有有互互锁功能,且不能同时处于开启状态。锁功能,且不能同时处于开启状态。2.13 气锁气锁air lock 气气压压可可调调节节的的气气密密室室,用用于于连连接接气气压压不不同同的的两两个个相相邻邻区区域域,其其两两个个门门具具有有互互锁锁功功能能,不不能能同同时时处
7、处于于开开启启状状态态。在在实实验验室室中中用用作作特特殊殊通道。通道。第九页,讲稿共五十八页哦危害程度分级危害程度分级根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级。级。w 危害等级危害等级(低个体危害,低群体危害)(低个体危害,低群体危害)不不会会导导致致健健康康工工作作者者和和动动物物致致病病的的细细菌菌、真真菌菌、病病毒毒和和寄寄生生虫虫等生物因子。等生物因子。w 危害等级危害等级(中等个体危害,有限群体危害)(中等个体危害,有限群体危害)能能引引起起人人或或动动物物发发病病,但但一一般般情情况况下下对对健健康康工工作作者者、群群体体、家家畜畜
8、或或环环境境不不会会引引起起严严重重危危害害的的病病原原体体。实实验验室室感感染染不不导导致致严严重重疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险有限。疾病,具备有效治疗和预防措施,并且传播风险有限。第十页,讲稿共五十八页哦危害程度分级危害程度分级 危害等级危害等级(高个体危害,低群体危害)(高个体危害,低群体危害)能能引引起起人人类类或或动动物物严严重重的的疾疾病病,或或造造成成严严重重经经济济损损失失,但但通通常常不不能能因因偶偶然然接接触触而而在在个个体体间间传传播播,或或能能使使用用抗抗生生互不、抗寄生虫药治疗的病原体。互不、抗寄生虫药治疗的病原体。危害等级危害等级(高个体危害,高群体危
9、害)(高个体危害,高群体危害)能能引引起起人人类类或或动动物物非非常常严严重重的的疾疾病病,一一般般不不能能治治愈愈,容容易易直直接接、间间接接或或因因偶偶然然接接触触在在人人与与人人,或或动动物物与与人人,或或人人与与动动物物,或动物与动物间传播的病原体。或动物与动物间传播的病原体。第十一页,讲稿共五十八页哦生物危害评估生物危害评估 当当实实验验室室活活动动涉涉及及传传染染或或潜潜在在传传染染性性生生物物因因子子时时,应应进进行行危危害害程程度度评评估估。危危害害程程度度评评估估应应至至少少包包括括下下列列内内容容:生生物物因因子子的的种种类类(已已知知的的、未未知知的的、基基因因修修饰饰的
10、的或或未未知知传传染染性性的的生生物物材材料料)、来来源源、传传染染性性、致致病病性性、传传播播途途径径、在在环环境境中中的的稳稳定定性性、感感染染剂剂量量、浓浓度度、动动物物实实验数据、预防和治疗。验数据、预防和治疗。危危害害程程度度评评估估应应由由适适当当的的有有经经验验的的专专业业人人员进行。员进行。第十二页,讲稿共五十八页哦 防护屏障和生物安全水平分级防护屏障和生物安全水平分级5.1 防护屏障防护屏障5.1.1 一级防护屏障一级防护屏障实验室的生物安全柜和个人防护装备等构成的防护屏障。实验室的生物安全柜和个人防护装备等构成的防护屏障。5.1.2 二级防护屏障二级防护屏障实验室的设施结构
11、和通风系统等构成的防护屏障。实验室的设施结构和通风系统等构成的防护屏障。5.2 生物安全水平分级生物安全水平分级 根根据据所所操操作作的的生生物物因因子子的的危危害害程程度度和和采采取取的的防防护护措措施施,将将生生物物安安全全防防护护水水平平(biosafety level,BSL)分分为为4级级,I级级防防护护水水平平最最低低,级级防防护护水水平平最最高高。以以BSL1、BSL2、BSL3、BSL4表表示示实实验验室室的的相相应应生生物物安安全全防防护护水水平平;以以ABSL1、ABSL2、ABSL3、ABSL4表示动物实验室的相应生物安全防护水平。表示动物实验室的相应生物安全防护水平。第
12、十三页,讲稿共五十八页哦生物安全柜的分级 I 级生物安全柜 class I biosafety cabinet 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化,工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察,下部为操作窗口.外部空气由操作窗口吸进,而不可能由操作窗口逸出.工作状态时保证工作人员不受侵害,但不保证实验对象不受污染。级生物安全柜 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化,工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气.工作时正面玻璃推拉窗打开一半,上部为观察窗,下部为操作窗口.外部空气由操作窗口吸进,而不可能由操作窗口逸出。工作状态下遵守操作规程时既保证工作人员不受侵害,也保证实验对象不受污
13、染。级生物安全柜 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化,工作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空气。正面上部为观察窗,下部为手套箱式操作口。箱内对外界保持负压.可确保人体与柜内物品完全隔绝。第十四页,讲稿共五十八页哦生物安全实验室分级生物安全实验室分级1 没有特殊要求没有特殊要求,不需要特殊培训。进行一级生物安全实验。不需要特殊培训。进行一级生物安全实验。2 工作人员需要经过培训,配备生物安全柜(工作人员需要经过培训,配备生物安全柜(1级或级或2级),有可能发生气级),有可能发生气溶胶或溢出的实验要求在安全柜内进行。进行二级生物安全实验。溶胶或溢出的实验要求在安全柜内进行。进行二级生物
14、安全实验。3 工工作作人人员员必必须须经经过过特特殊殊培培训训,配配备备生生物物安安全全柜柜(1级级或或2级级),有有感感染染性性材材 料料的的实实验验,有有可可能能发发生生气气溶溶胶胶或或溢溢出出的的实实验验要要求求在在安安全全柜柜内内进进行行,实实验验室室内内为为负负压压,进进行行三三级级生生物物安安全全的的实实验验。4 除除BSL-3的条件外的条件外,必须是独立的建筑物,生物安全柜为必须是独立的建筑物,生物安全柜为2或或3级,进行级,进行四级生物安全的实验。四级生物安全的实验。第十五页,讲稿共五十八页哦实验室标记举例实验室标记举例三级生物安全实验室三级生物安全实验室BSL-3病原体名称病
15、原体名称实验室负责人实验室负责人生物危害标记生物危害标记第十六页,讲稿共五十八页哦实验室和微生物的分级w一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室w 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。包含微生物举例:大肠杆菌、格鲁伯耐格里原虫、感染性犬肝炎病毒、枯草杆菌等。第十七页,讲稿共五十八页哦实验室和微生物的分级w二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室w 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。包含微生物举例:麻疹病毒、沙门氏菌、弓形体、乙型肝炎病毒、衣原体、志贺氏菌。w 三
16、级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室 实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗和相应的治疗方法。第十八页,讲稿共五十八页哦实验室和微生物的分级 艾滋病病毒的研究(血清学实验除外)应在三级生物安全防护实验室中进行。包含微生物举例:结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、鼠疫杆菌、炭疽杆菌、热病原体、HIV(血清学检测除外)、澳大利亚立克次氏体、加拿大立克次氏体。第十九页,讲稿共五十八页哦实验室和微生物的分级w四级生物安全防护实验室四级生物安全防护实验室w实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有
17、高度危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物,也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别进行。第二十页,讲稿共五十八页哦实验室和微生物的分级w实验脊椎动物生物安全防护实验室,其适用微生物范围与同级的一般生物安全防护实验室相同。以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物实验室的相应生物安全防护水平。第二十一页,讲稿共五十八页哦生物安全防护实验室基本要求(设施和设备)第二十二页,讲稿共五十八页哦一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室 BSL
18、-1w6.1w1)无需特殊选址,普通建筑物即可,但应有防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。w2)每个实验室应设洗手池,宜设置在靠近出口处。w3)在实验室门口处应设挂衣装置,个人便装与实验室工作服分开放置。w4)实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙,不得铺设地毯。第二十三页,讲稿共五十八页哦w5)实验台表面应不透水,耐腐蚀、耐热。w6)实验室中的家具应牢固。为易于清洁,各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。w7)实验室如有可开启的窗户,应设置纱窗。w8)实验室内应保证工作照明,避免不必要的反光和强光。w9)应有适当的消毒设备。第二十四页,讲稿共五十八
19、页哦二级生物安全防护实验室二级生物安全防护实验室BSL-2BSL-2w6.2w1)满足6.1的要求w2)实验室门宜带锁、可自动关闭。实验室的门应有可视窗。w3)应有足够的储存空间摆放物品以便使用。在实验室工作区域外还应当有供长期使用的储存空间。w4)在实验室内应使用专门的工作服;戴乳胶手套。w5)在实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件。第二十五页,讲稿共五十八页哦w6)在实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器,并按期检查和验证,以保证符合要求。w7)应在实验室内配备生物安全柜。w8)应设置洗眼装置。必要时应有应急喷淋装置。w9)应通风,如使用窗户自然通风,应有防虫纱窗。w10)有可靠的电力
20、供应和应急照明。必要时,重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用电源。w11)实验室出口应有在黑暗中可辨认的标识。第二十六页,讲稿共五十八页哦三级生物安全防护实验室三级生物安全防护实验室BSL-3BSL-3w6.3w应在建筑物中自成隔离区(有出入控制)或为独立建筑物。w6.3.1布局w1)由清洁区、半污染区和污染区组成。污染区和半污染区之间应设缓冲间。必要时,半污染区和清洁区之间应设缓冲间。w2)在半污染区应设供紧急撤离使用的安全门。w3)半污染区和污染区之间、半污染区和清洁区之间应设置传递窗、传递窗双门不能同时处于开启状态,传递窗内应设物理消毒装置。第二十七页,讲稿共五十八页哦6.3.2
21、6.3.2围护结构围护结构w1)实验室(含缓冲间)围护结构内表面必须光滑耐腐蚀、防水,以易于消毒清洁。所有缝隙必须加以可靠密封,防震、防火。w2)围护结构外围墙体应有适当的抗震和防火能力。w3)天花板、地板、墙间的交角均为圆弧且可靠密封。w4)地面应防渗漏、无接缝、光洁、防滑。w5)实验室内所有的门均可自动关闭;实验室出口应有在黑暗中可明确辨认的标识。w6)外围结构不应有窗户;内设窗户应防破碎、防漏气及安全。w7)所有出入口应采用防止节肢动物和啮齿动物进入的设计。第二十八页,讲稿共五十八页哦w6.3.3送排风系统w1)应安装独立的送排风系统以控制实验室气流方向和压力梯度。应确保在使用实验室时气
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