微生物的培养与应用h讲稿.ppt

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1、微生物的培养与应用h第一页，讲稿共三十二页哦培养基的类型培养基的类型按物理状态分按物理状态分固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基允许特定种类的微生物允许特定种类的微生物 生长，同时抑制或阻止生长，同时抑制或阻止 其他微生物生长其他微生物生长根据微生物的代谢特点，根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指在培养基中加入某种指 示剂或化学药品示剂或化学药品按功能分按功能分选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基培养基类型第二页，讲稿共三十二页哦培养基的营养物质培养基的营养物质培养基的营养物质培养基的营养物质 水水、无机盐、无机盐、碳源、氮源碳源、氮源碳源、氮源碳源、氮源、生长因子、生长因子培养

2、基组分培养基组分提供的主要营养提供的主要营养牛肉膏牛肉膏 5g 5g碳源碳源、氮源氮源、磷酸盐、维生素、磷酸盐、维生素蛋白胨蛋白胨 10g 10g氮源氮源、维生素、维生素NaCl 5gNaCl 5g无机盐无机盐水水 1000ml 1000ml氢元素、氧元素氢元素、氧元素牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成培养基组成第三页，讲稿共三十二页哦可以作为硝化细菌碳源、氮源和能源的是：可以作为硝化细菌碳源、氮源和能源的是：可以作为硝化细菌碳源、氮源和能源的是：可以作为硝化细菌碳源、氮源和能源的是：A ACOCO2、NHNH3 3、光能、光能、光能、光能 B B(CH(CH2 2O)、

3、N2 2、NH3CCO2、NHNH3、NH3 3 D(CH2 2O)O)、NHNH3、N N2 2【解析】本题考查知识点：【解析】本题考查知识点：硝化细菌是化能自养型微生物；硝化细菌是化能自养型微生物；硝化细菌合成有机物所需能量来源来自氧化分解硝化细菌合成有机物所需能量来源来自氧化分解外界环境中的外界环境中的NHNH3 3；合成有机物所需的碳源是合成有机物所需的碳源是合成有机物所需的碳源是合成有机物所需的碳源是COCOCOCO2 2 2 2；NHNH3 3氧化分解的产物是氧化分解的产物是氧化分解的产物是氧化分解的产物是NONONONO3 3 3 3，也就是硝化细菌的氮源，也就是硝化细菌的氮源第

4、四页，讲稿共三十二页哦关于微生物营养物质的叙述中，正确的是：关于微生物营养物质的叙述中，正确的是：关于微生物营养物质的叙述中，正确的是：关于微生物营养物质的叙述中，正确的是：A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C.C.C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.D.D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量【解析】【解析】有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳

5、源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如有的碳源可同时是氮源，如NHNH4 4HCOHCO3 3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。第五页，讲稿共三十二页哦【解析】【解析】【解析】【解析】对于对于C C选项，除水以外的无机物种类繁多功能也多样。选项，除水以外的无机物种类繁多功能也多样。二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；二氧化碳，可作为自

6、养型微生物的碳源；二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3NaHCO3可作为自养型微生物的碳源和无机盐；可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而而NaClNaCl则只能提供无机盐。则只能提供无机盐。对于对于D D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如如NH3NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。可为硝化细菌提供能量和氮源。第六页，讲稿共三十二页哦土壤中分解尿素细菌的分离土壤中分解尿素细菌的分离土壤中分解尿素细菌的分离土壤中分解尿素细菌的分离分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离分解

7、纤维素的微生物的分离选择培养基的成分：选择培养基的成分：尿素作为唯一氮源尿素作为唯一氮源选择培养基的成分：选择培养基的成分：纤维素作为唯一碳源纤维素作为唯一碳源纤维素作为唯一碳源纤维素作为唯一碳源鉴定方法：鉴定方法：在培养基中加入在培养基中加入酚红酚红指示剂，若指示剂指示剂，若指示剂指示剂，若指示剂指示剂，若指示剂变红，变红，pHpH升高，说明细菌能分解尿素升高，说明细菌能分解尿素鉴定方法：鉴定方法：刚果红染色法刚果红染色法刚果红染色法刚果红染色法第七页，讲稿共三十二页哦透明圈 透明圈越大，细菌透明圈越大，细菌分解纤维素的能力越强分解纤维素的能力越强第八页，讲稿共三十二页哦(2013(2013

8、广东广东)以下为某兴趣小组获得的实验结果及以下为某兴趣小组获得的实验结果及以下为某兴趣小组获得的实验结果及以下为某兴趣小组获得的实验结果及其分析，正确的是：其分析，正确的是：解析：细菌分解纤维素后会形成一个透明圈，解析：细菌分解纤维素后会形成一个透明圈，透明圈越大，细菌分解能力越强。透明圈越大，细菌分解能力越强。第九页，讲稿共三十二页哦（20112011 新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染

9、的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：(1)(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为为为为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于该培养基属于_培养基。培养基。培养基。培养基。(3)(3)为了筛选出高效菌株，可比较

10、单菌落周围分解为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。选择选择原油原油原油原油强强强强第十页，讲稿共三十二页哦(2)(2)(2)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即即即即_ _ _ _ 和和_ _ _ _ _。(4)(4)(4)(4)通常情况下，在微生物培养过程中

11、，实验室常用通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、的灭菌方法有灼烧灭菌、的灭菌方法有灼烧灭菌、的灭菌方法有灼烧灭菌、_和和_ _ _ _ _。无菌技术要求实验操作应在酒精灯无菌技术要求实验操作应在酒精灯无菌技术要求实验操作应在酒精灯无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进附近进附近进附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。行，以避免周围环境中微生物的污染。火焰火焰平板划线法平板划线法 稀释涂布平板法稀释涂布平板法干热灭菌高压蒸汽灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌第十一页，讲稿共三十二页哦 富集培养

12、指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的富集培养应选择_ _ _的培养基，的培养基，的培养基，的培养基，并在并在并在并在_条件下培养。条件下培养。条件下培养。条件下培养。高温高温以淀粉为唯一碳源以淀粉为唯一碳源以淀粉为唯一碳源以淀粉为唯一碳源 脲酶可以将尿素分解为脲

13、酶可以将尿素分解为脲酶可以将尿素分解为脲酶可以将尿素分解为NHNHNHNH3 3，从而使尿素溶液，从而使尿素溶液pHpH升升高，这可用高，这可用高，这可用高，这可用_试剂来检验。用纤维素作唯一碳试剂来检验。用纤维素作唯一碳试剂来检验。用纤维素作唯一碳试剂来检验。用纤维素作唯一碳源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能源的培养基培养微生物，得到的纤维素分解菌中可能还混有还混有_ _ _ _ _。自养微生物自养微生物(硝化细菌硝化细菌)酚红酚红酚红酚红第十二页，讲稿共三十二页哦练习下表表示某培养基的配

14、方，下列有关叙下表表示某培养基的配方，下列有关叙下表表示某培养基的配方，下列有关叙下表表示某培养基的配方，下列有关叙述正确的是：述正确的是：A.A.A.A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从物理性质看该培养基属于液体培养基，从物理性质看该培养基属于液体培养基，从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于鉴别培养基从用途看该培养基属于鉴别培养基 B B培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨属于氮源的物质是蛋白胨 C C该培养基缺少提供生长因子的物质该培养基缺少提供生长因子的物质 D D D D该培养基调节到合适的该培养基调节

15、到合适的该培养基调节到合适的该培养基调节到合适的pHpHpHpH后就可以接种菌种后就可以接种菌种后就可以接种菌种后就可以接种菌种第十三页，讲稿共三十二页哦【解析】【解析】【解析】【解析】伊红、美蓝能使某些细菌着色，起鉴别作用；伊红、美蓝能使某些细菌着色，起鉴别作用；糖类糖类糖类糖类(尤其是葡萄糖尤其是葡萄糖尤其是葡萄糖尤其是葡萄糖)是最常用的碳源；是最常用的碳源；是最常用的碳源；是最常用的碳源；蛋白胨主要用作氮源，但也提供生长因子，并作为蛋白胨主要用作氮源，但也提供生长因子，并作为异养型微生物的碳源、能源。异养型微生物的碳源、能源。异养型微生物的碳源、能源。异养型微生物的碳源、能源。伊红美蓝培

16、养基上伊红美蓝培养基上伊红美蓝培养基上伊红美蓝培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色大肠杆菌的菌落呈现黑色大肠杆菌的菌落呈现黑色大肠杆菌的菌落呈现黑色第十四页，讲稿共三十二页哦选择培养基的制作方法选择培养基的制作方法选择培养基的制作方法选择培养基的制作方法(1)(1)基础培养基中加抗性物质。举例：基础培养基中加抗性物质。举例：加高浓度食盐：分离金黄色葡萄球菌。加高浓度食盐：分离金黄色葡萄球菌。加高浓度食盐：分离金黄色葡萄球菌。加高浓度食盐：分离金黄色葡萄球菌。加青霉素：分离酵母菌和细菌。加青霉素：分离酵母菌和细菌。加青霉素：分离酵母菌和细菌。加青霉素：分离酵母菌和细菌。(2)(2)(2)(2)通过改变

17、培养基的成分。举例：通过改变培养基的成分。举例：通过改变培养基的成分。举例：通过改变培养基的成分。举例：培养基中缺乏氮源：可分离自生固氮微生物。培养基中缺乏氮源：可分离自生固氮微生物。培养基中缺乏氮源：可分离自生固氮微生物。培养基中缺乏氮源：可分离自生固氮微生物。培养基中缺乏有机碳源：可分离自养微生物。培养基中缺乏有机碳源：可分离自养微生物。培养基中缺乏有机碳源：可分离自养微生物。培养基中缺乏有机碳源：可分离自养微生物。第十五页，讲稿共三十二页哦(3)(3)利用培养基的特定成分。举例：利用培养基的特定成分。举例：当石油是唯一碳源：可分离出能消除石油污染的微生物。当石油是唯一碳源：可分离出能消除

18、石油污染的微生物。当石油是唯一碳源：可分离出能消除石油污染的微生物。当石油是唯一碳源：可分离出能消除石油污染的微生物。当纤维素为唯一碳源：可分离纤维素分解菌。当纤维素为唯一碳源：可分离纤维素分解菌。当纤维素为唯一碳源：可分离纤维素分解菌。当纤维素为唯一碳源：可分离纤维素分解菌。(4)(4)(4)(4)通过某些特殊环境分离微生物。举例：通过某些特殊环境分离微生物。举例：通过某些特殊环境分离微生物。举例：通过某些特殊环境分离微生物。举例：在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存。失水而不能生存。在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，

19、其他微生物在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。在高温环境中因酶失活而无法生存。在高温环境中因酶失活而无法生存。在高温环境中因酶失活而无法生存。第十六页，讲稿共三十二页哦消毒和灭菌获得纯净培养物的获得纯净培养物的关键关键关键关键防止外来杂菌的入侵防止外来杂菌的入侵防止外来杂菌的入侵防止外来杂菌的入侵 指使用指使用强烈强烈的理化因素杀死物体的理化因素杀死物体的理化因素杀死物体的理化因素杀死物体内外内外内外内外 所有所有微生物，包括芽孢和孢子。微生物，包括芽孢和

20、孢子。使用较为使用较为温和温和的物理或化学方法，仅的物理或化学方法，仅 杀死物体杀死物体表面或内部一部分表面或内部一部分表面或内部一部分表面或内部一部分对人体有对人体有对人体有对人体有 害的微生物（不包括芽孢和孢子）。害的微生物（不包括芽孢和孢子）。害的微生物（不包括芽孢和孢子）。害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒消毒灭菌灭菌常用的消毒和灭菌的方法常用的消毒和灭菌的方法常用的消毒和灭菌的方法常用的消毒和灭菌的方法 P15-16 P15-16第十七页，讲稿共三十二页哦计算计算计算计算 称量称量称量称量 溶化溶化溶化溶化 灭菌灭菌灭菌灭菌 倒平板倒平板倒平板倒平板培养基的制备培养基的制备P17P

21、17P17P17倒平板操作的讨论：倒平板操作的讨论：倒平板操作的讨论：倒平板操作的讨论：(1)(1)培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到5050左右时，才能左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚的温度下降到刚刚不烫手不烫手不烫手不烫手时，就可以进行倒平板了。时，就可以进行倒平板了。时，就可以进行倒平板了。时，就可以进行倒平板了。(2)(2)(2)(2)为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什

22、么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过通过灼烧灭菌灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。，防止瓶口的微生物污染培养基。第十八页，讲稿共三十二页哦(3)(3)平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的基表面的基表面的基表面的水分更好地挥发水分更好地挥发水分更好地挥发水分更好地挥发，又可以，又可以，又可以，又可以防止防止防止防止皿盖上的水珠皿盖上的水珠落入培养基，造

23、成落入培养基，造成污染污染。(4)(4)(4)(4)在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？吗？为什么？吗？为什么？吗？为什么？空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基空气中的微生物可能在皿

24、盖与皿底之间的培养基上上上上滋生滋生滋生滋生，因此最好，因此最好，因此最好，因此最好不要用不要用不要用不要用这个平板培养微生物。这个平板培养微生物。这个平板培养微生物。这个平板培养微生物。第十九页，讲稿共三十二页哦纯化原理：原理：原理：原理：在培养基上将细菌在培养基上将细菌稀释或分散稀释或分散成单个细胞，成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。菌落。纯化技术纯化技术纯化技术纯化技术接种的方法接种的方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法第二十页，讲稿共三十二页哦平板划线法平板划线法第二十一页，讲稿共三十二页哦稀稀释释涂涂

25、布布平平板板法法第二十二页，讲稿共三十二页哦平板划线操作的讨论平板划线操作的讨论平板划线操作的讨论平板划线操作的讨论(1)(1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？吗？为什么？操作的操作的操作的操作的第一步灼烧第一步灼烧第一步灼烧第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能接种环是为了避免接种环上可能接种环是为了避免接种环上可能接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；存在的微生物污染培养物；存在的微生物污染培养物；存在的微生物污染培养物；

26、每次划线前灼烧每次划线前灼烧每次划线前灼烧每次划线前灼烧接种环是接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。种的数目逐渐减少，以便得到菌落。种的

27、数目逐渐减少，以便得到菌落。种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。污染环境和感染操作者。污染环境和感染操作者。污染环境和感染操作者。第二十三页，讲稿共三十二页哦(2)(2)在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？划线？划线？划线？以免接种环温度太高，杀死菌种。以免接种环温度太高，杀死菌种。以免接种环温度太高，杀死菌种。以

28、免接种环温度太高，杀死菌种。(3)(3)(3)(3)在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？从上一次划线的末端开始划线？划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随能使细菌的数目随能使细菌的数目随能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个，最终能得到由单个，最终能得到由单个，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。细菌繁殖而来的菌落。第二十四页，讲稿共三十二页哦 显微镜

29、直接计数显微镜直接计数显微镜直接计数显微镜直接计数 原理原理利用利用利用利用特定细菌计数板或血细胞计数板特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量，但在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量，但不能区分不能区分不能区分不能区分死菌与活菌死菌与活菌统计微生物数目的方法统计微生物数目的方法 活菌计数法活菌计数法活菌计数法活菌计数法 原理原理原理原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的生长的生长的生长的一个一个菌落菌落菌落菌落，来源于来源于来源于来源于样品稀释液中的样品稀释液中的一个活菌一个活菌一个活菌一个活菌。通过统计平板上的通过统

30、计平板上的菌落数菌落数，就能推测出样品中就能推测出样品中大约大约大约大约含含含含有多少有多少活菌活菌活菌活菌。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低统计的菌落数往往比活菌的实际数目低第二十五页，讲稿共三十二页哦(2)(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即即即即_ _ _ _ 和和_ _ _ _ _。(4)(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、的灭菌方

31、法有灼烧灭菌、_和和和和_ _ _ _ _。无菌技术要求实验操作应在酒精灯无菌技术要求实验操作应在酒精灯无菌技术要求实验操作应在酒精灯无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。行，以避免周围环境中微生物的污染。火焰火焰火焰火焰平板划线法平板划线法平板划线法平板划线法 稀释涂布平板法稀释涂布平板法稀释涂布平板法稀释涂布平板法干热灭菌干热灭菌干热灭菌干热灭菌 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌（20112011 新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而新课标全国卷）有些细菌可

32、分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：第二十六页，讲稿共三十二页哦练习(2013(2013(2013(2013四川四川)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽胞杆菌的人将地衣芽胞杆菌的-淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的

33、工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。工程酵母菌固体平板培养接种接种筛选、接种液体培养菌种-淀粉酶基因重组质粒接种到新鲜培养基图甲图甲中，过程图甲中，过程图甲中，过程图甲中，过程需要的酶有需要的酶有需要的酶有需要的酶有 。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以 作为作为作为作为唯一碳源。唯一碳源。、过程需要重复几次，目的是过程需要重复几次，目的是 。筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种筛选出真正高效

34、利用淀粉的工程酵母菌菌种筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种筛选出真正高效利用淀粉的工程酵母菌菌种限制酶和限制酶和DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶 淀粉淀粉第二十七页，讲稿共三十二页哦练习 某同学尝试过程某同学尝试过程某同学尝试过程某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培的操作，其中一个平板经培的操作，其中一个平板经培的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是 ，推测该同学接种时可能的操作，推测该同学接种时可能的操作，推测该同学接种时可能的操作，推测该同学接种时可能的操作失误是失误是失误是失误是 。以淀粉为原料，用工程酵

35、母菌以淀粉为原料，用工程酵母菌以淀粉为原料，用工程酵母菌以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下和普通酵母菌在相同的适宜条件下和普通酵母菌在相同的适宜条件下和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种密闭发酵，接种密闭发酵，接种密闭发酵，接种 菌的发酵罐菌的发酵罐需要先排气，其原因是需要先排气，其原因是需要先排气，其原因是需要先排气，其原因是 。用凝胶色谱法分离用凝胶色谱法分离用凝胶色谱法分离用凝胶色谱法分离-淀粉酶时，在色谱柱中移淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较动速度较慢的蛋白质，相对

36、分子质量较 。图乙稀释涂布平板法稀释涂布平板法涂布不均匀涂布不均匀（3 3）工程酵母）工程酵母 工程酵母菌利用淀粉的速度很快，工程酵母菌利用淀粉的速度很快，发酵产生发酵产生CO2CO2的速度也很快的速度也很快 （4 4）小）小）小）小第二十八页，讲稿共三十二页哦练习（20132013新课标卷新课标卷新课标卷新课标卷IIII）临床试用抗生素前，有时需要做）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作

37、，以确定某致病菌对不同样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题：抗生素的敏感性。回答下列问题：抗生素的敏感性。回答下列问题：抗生素的敏感性。回答下列问题：（1 1 1 1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用）为了从样本中获取致病菌菌落，可用）为了从样本中获取致病菌菌落，可用）为了从样本中获取致病菌菌落，可用_法法法法或或或或_法将样本借种于固体培养基表面，经过法将样本借种于固体培养基表面，经过法将样本借种于固体培养基表面，经过法将样本借种于固体培养

38、基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。选择培养、鉴别等步骤获得。（2 2 2 2）取该单菌落适当稀释，用）取该单菌落适当稀释，用）取该单菌落适当稀释，用）取该单菌落适当稀释，用_ _ _法接种于固体法接种于固体培养基表面，在培养基表面，在培养基表面，在培养基表面，在3737培养箱中培养培养箱中培养培养箱中培养培养箱中培养24h24h，使其均匀生，使其均匀生长，布满平板。长，布满平板。第二十九页，讲稿共三十二页哦练习（3 3 3 3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有别含有别含有别含有A A A A，B B，C C C C，D D四种抗生素的

39、滤纸片均匀置于该平四种抗生素的滤纸片均匀置于该平四种抗生素的滤纸片均匀置于该平四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含板上的不同位置，培养一段时间后，含板上的不同位置，培养一段时间后，含板上的不同位置，培养一段时间后，含A A A A的滤纸片周的滤纸片周的滤纸片周的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_A_；含；含B B B B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌

40、对抗生素的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_B_B_B_；含；含C C的滤纸片周围的透明圈比含的滤纸片周围的透明圈比含的滤纸片周围的透明圈比含的滤纸片周围的透明圈比含A A A A的小，说的小，说的小，说的小，说明明明明_ _ _ _ _；含；含；含；含D D的滤纸片周围的透明圈也比含的滤纸片周围的透明圈也比含A A的的的的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素此菌落很可能是抗生素此

41、菌落很可能是抗生素此菌落很可能是抗生素D D的的_。（4 4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素选择抗生素选择抗生素选择抗生素_。第三十页，讲稿共三十二页哦练习【答案答案】（1 1 1 1）平板划线）平板划线）平板划线）平板划线 稀释涂布平板稀释涂布平板稀释涂布平板稀释涂布平板 （2 2 2 2）稀释涂布平板）稀释涂布平板 （3 3）敏感）敏感 不敏感不敏感 该致病菌对该致病菌对C C C C的敏感性比对的敏感性比对A A弱弱 耐药菌耐药菌 （4 4 4 4）A A A A【解析解析】（1 1 1 1）分离菌落常用稀释涂布平板法或平板）

42、分离菌落常用稀释涂布平板法或平板）分离菌落常用稀释涂布平板法或平板）分离菌落常用稀释涂布平板法或平板划线法划线法（2 2）取该单菌落适当稀释，稀释用涂布平板法进行）取该单菌落适当稀释，稀释用涂布平板法进行接种接种接种接种（3 3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。抗生素不具有敏感性。透明

43、圈越大的敏感性越强。抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。（4 4 4 4）实验结果抗生素）实验结果抗生素A A对该致病菌的作用最好。对该致病菌的作用最好。对该致病菌的作用最好。对该致病菌的作用最好。第三十一页，讲稿共三十二页哦练习（2013201320132013上海）回答下列关于微生物的问题。上海）回答下列关于微生物的问题。阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深表深表深表深1010101015cm15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株酶的菌株酶的菌株酶的菌株SM01SM01SM01SM01，以下为该菌株的鉴定过程。，以下为该菌株的鉴定过程。为获得单菌落，可采用为获得单菌落，可采用 法将初筛菌液接种法将初筛菌液接种在在_培养基上。培养基上。表表表表4 4中培养液中培养液pHpH均为均为均为均为6.06.0，若对，若对SM01SM01中阿拉伯胶降中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的解酶的活力进行测定，则应选用表中的_培养液，培养液，培养液，培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因。针对不选用的其他培养液，分别说明原因。第三十二页，讲稿共三十二页哦