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1、不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求 PCR设计引物时酶切位点的保护碱基表1酶寡核苷酸序列 切割率 2 hr 20h cc I GTACC GGGACG CCGGTGCG 0 00 0 0Afl IIICCATGG CCACTTGG CCACTTG 90 900 909 sc I GGGCGCC AGCCGCT TTGGCGCGCA 90 90 9 9 909 AvI CGGG CCCCCGGGG TCCCCGGGGA 5090 0 9 90 BaHI CGGTCCG GGTCG CGACGCG 090 90 25 90 90 BglIICAGTCTG AAGAC GAAGATCTT
2、C 07 25 0 9 90BsH IIGGGCC AGGGCCCT TTGGCGCAA 0 0 50 0 90 BstE IIGGT(A)ACC0 10BtXI AACTCAACAATGATTG AAATGAGCCAATGCATTGAA CTGCAGAACAATGATTAAT0 25 250 90 Ca I ATCGAT GATCGT ATCGAGGCCCAATGGG 0 90 0 0 90 0 EoRI GGAC CGGACCGCGAATT 9909090 9090 Hae IIIGGGGCCCCGCGCT TGCGGCGCAA9090 90 0 90 9 Hid III ACTG CAG
3、CTTGCAGCGGG 01 05 pI GACCCGGGGTACCCCGGGGACCCG 9 0 0Mlu I ACGCGT CGGCGTG 0 5 0 5 No I CCATGG CAGCATGCATG050 5 de I CCAG CCTTG CGCATATGCG GGGTTTTATAACCCGGATCATATGATTCCGGAATTCATATGATCCC0 0 0 0 7 75 00 0 90 90NeGCTGCC CGCTAGCCG CTGTATAG00 550 PCR设计引物时酶切位点的保护碱基表2酶寡核苷酸序列切割率2 hr20 rNo ITCGCGCAA ATTTGGGCCGT
4、TA AATAGCGGCCGTAAAAATAAGAATGCGGCGCTAACTAT AAGAAAAGCGCCGCAAAAAAA0 1105 20 1 0 9 90Nsi ITGATGCAGCACGCATTGTTCTGCAGTT1 09 90Pac ITTAATAA GTAAT CAATTAAG0 0 0 2590PeIGTTCGTTTAACC GGGTTTAAACC ACTTTGTAAACGGCCCCGG0 0 0 5025 5090Ps IGTCAGC TGCATGCATGCA CTGCAGACAATGCTTG AACTAATGCATGGA CTCAGAACATAGGATGC010 90 0
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