食品化学酶幻灯片.ppt
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1、食品化学课件酶第1页,共57页,编辑于2022年,星期三p主要内容:主要内容:酶的化学本质和作用特点酶的化学本质和作用特点酶的命名和分类酶的命名和分类酶的作用机制酶的作用机制影响酶促反应速度的因素影响酶促反应速度的因素抑制剂和激活剂对酶促反应的影响抑制剂和激活剂对酶促反应的影响酶促褐变的机理及其控制酶促褐变的机理及其控制食品加工中重要的酶食品加工中重要的酶固定化酶固定化酶p难点:酶的作用机制和酶促褐变的机理难点:酶的作用机制和酶促褐变的机理第2页,共57页,编辑于2022年,星期三第一节 概述酶(酶(enzyme)是一类由活细胞产生的,对其)是一类由活细胞产生的,对其特异底物具有高效催化作用的
2、蛋白质。特异底物具有高效催化作用的蛋白质。新发现:新发现:RNA、DNA的催化作用的催化作用1.1.酶的化学本质酶的化学本质第3页,共57页,编辑于2022年,星期三2.酶的组成酶的组成蛋白质部分:酶蛋白蛋白质部分:酶蛋白(apoenzyme)辅助因子辅助因子(cofactor)金属离子金属离子小分子有机化合物小分子有机化合物全酶全酶(holoenzyme)第4页,共57页,编辑于2022年,星期三辅助因子分类辅助因子分类(按其(按其与酶蛋白结合的紧密程度与酶蛋白结合的紧密程度)辅酶辅酶(coenzyme):与酶蛋白结合与酶蛋白结合疏松,可用疏松,可用透析或超滤的方透析或超滤的方法除去。法除去
3、。辅基辅基(prosthetic group):与酶蛋白结合与酶蛋白结合紧密,不能用紧密,不能用透析或超滤的透析或超滤的方法除去方法除去。第5页,共57页,编辑于2022年,星期三第6页,共57页,编辑于2022年,星期三3.3.酶的作用特点酶的作用特点催化剂的共同点催化剂的共同点量少高效;量少高效;只加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。只加速可逆反应的进程,而不改变反应的平衡点。都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应速度。都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应速度。酶的特性酶的特性高效催化,条件温和高效催化,条件温和高度专一高度专一不稳定性不稳定性活性可调节活性可调节第7页,共
4、57页,编辑于2022年,星期三(一)(一)酶促反应具有极高的效率酶促反应具有极高的效率 3.1 3.1 酶促反应的特点酶促反应的特点酶酶的的催催化化效效率率通通常常比比非非催催化化反反应应高高1081020倍倍,比比一一般般催催化化剂高剂高1071013倍。倍。酶的催化不需要较高的反应温度。酶的催化不需要较高的反应温度。酶酶和和一一般般催催化化剂剂加加速速反反应应的的机机理理都都是是降降低低反反应应的的活活化化能能(activation energy)。酶酶比比一一般般催催化化剂剂更更有有效效地地降降低低反反应应的的活化能。活化能。第8页,共57页,编辑于2022年,星期三(三)酶促反应的可
5、调节性(三)酶促反应的可调节性对酶生成与降解量的调节对酶生成与降解量的调节酶催化效力的调节酶催化效力的调节通过改变底物浓度对酶进行调节等通过改变底物浓度对酶进行调节等酶促反应受多种因素的调控,以适应机体对不断变化的酶促反应受多种因素的调控,以适应机体对不断变化的内外环境和生命活动的需要。其中包括三方面的调节。内外环境和生命活动的需要。其中包括三方面的调节。第10页,共57页,编辑于2022年,星期三4.酶的命名和分类n习惯命名法习惯命名法 A.根据作用底物来命名,如淀粉酶、蛋白酶等。根据作用底物来命名,如淀粉酶、蛋白酶等。B.根据所催化的反应的类型命名,如脱氢酶、转移酶等。根据所催化的反应的类
6、型命名,如脱氢酶、转移酶等。C.两个原则结合起来命名,例如丙酮酸脱羧酶等。两个原则结合起来命名,例如丙酮酸脱羧酶等。D.根据酶的来源或其它特点来命名,如胃蛋白酶、胰蛋白酶等。根据酶的来源或其它特点来命名,如胃蛋白酶、胰蛋白酶等。n系统命名法系统命名法 1971年国际生化协会酶命名委员会根据酶所催化的反应类型将酶分年国际生化协会酶命名委员会根据酶所催化的反应类型将酶分为六大类,为六大类,分别用分别用1、2、3、4、5、6的编号来表示,的编号来表示,再根据底物再根据底物中被作用的基团或键的特点将每一大类分为若干个亚类,每个亚中被作用的基团或键的特点将每一大类分为若干个亚类,每个亚类可再分若干个亚类
7、可再分若干个亚-亚类,仍用亚类,仍用1、2、3、编号。故每一个酶编号。故每一个酶的分类编号由用的分类编号由用“”隔开的四个数字组成。编号之前是酶学委隔开的四个数字组成。编号之前是酶学委员会的缩写员会的缩写EC。酶编号的前三个数字表明酶的特性:反应性质、。酶编号的前三个数字表明酶的特性:反应性质、反应物(或底物)性质、键的类型,第四个数字则是酶在亚反应物(或底物)性质、键的类型,第四个数字则是酶在亚-亚类亚类中的顺序号。中的顺序号。EC 1.1.1.27 大类大类 亚类亚类 亚亚类亚亚类 序号序号如乙醇脱氢酶如乙醇脱氢酶第11页,共57页,编辑于2022年,星期三国际酶学委员会根据酶催化反应的类
8、型,把酶分为:国际酶学委员会根据酶催化反应的类型,把酶分为:1、氧化还原酶类、氧化还原酶类 即催化生物氧化还原反应的酶,如脱氢酶、氧化酶、过氧化物即催化生物氧化还原反应的酶,如脱氢酶、氧化酶、过氧化物 酶、羟化酶以及加氧酶类。酶、羟化酶以及加氧酶类。2、转移酶类、转移酶类 催化不同物质分子间某种基团的交换或转移的酶,如转甲基催化不同物质分子间某种基团的交换或转移的酶,如转甲基 酶、转氨基酶、已糖激酶、磷酸化酶等。酶、转氨基酶、已糖激酶、磷酸化酶等。3、水解酶类、水解酶类 利用水使共价键分裂的酶,如淀粉酶、蛋白酶、酯酶等。利用水使共价键分裂的酶,如淀粉酶、蛋白酶、酯酶等。第12页,共57页,编辑
9、于2022年,星期三4、裂解酶类、裂解酶类 由其底物移去一个基团而使共价键裂解的酶,如脱羧酶、醛由其底物移去一个基团而使共价键裂解的酶,如脱羧酶、醛 缩酶和脱水酶等。缩酶和脱水酶等。5、异构酶类、异构酶类 促进异构体相互转化的酶,如消旋酶、顺反异构酶等。如:促进异构体相互转化的酶,如消旋酶、顺反异构酶等。如:6-磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。磷酸葡萄糖异构酶催化的反应。6、合成酶类、合成酶类 促进两分子化合物互相结合,同时使促进两分子化合物互相结合,同时使ATP分子中的高能磷分子中的高能磷 酸键断裂的酶,如谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽合成酶等。酸键断裂的酶,如谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽合成酶等。第13
10、页,共57页,编辑于2022年,星期三5.酶的作用机制n酶之所以具有催化能力,主要在于它们具有一个所谓的酶之所以具有催化能力,主要在于它们具有一个所谓的“活性部位活性部位”。正是由于有这种结构才使之具备上述催化生物化学反应的功能。正是由于有这种结构才使之具备上述催化生物化学反应的功能。又称又称“活性中心活性中心”。指由少数必需基团组成的能与底物分子结合并。指由少数必需基团组成的能与底物分子结合并完成特定催化反应的空间小区域。完成特定催化反应的空间小区域。活性部位本质上是蛋白质多肽链上原本相距较远的一系列氨基酸残活性部位本质上是蛋白质多肽链上原本相距较远的一系列氨基酸残基经由折叠而形成的特定区域
11、。在这个区域内,特定的、对于催化基经由折叠而形成的特定区域。在这个区域内,特定的、对于催化反应具有贡献的氨基酸残基的侧链基团的空间配置恰到好处,有助反应具有贡献的氨基酸残基的侧链基团的空间配置恰到好处,有助于酶与底物的结合,有助于底物的转变。于酶与底物的结合,有助于底物的转变。第14页,共57页,编辑于2022年,星期三活性部位和必需基团活性部位和必需基团必需基团:这些基团若经化学修饰使其改变,则酶的活性 丧失。活性部位:酶分子中直接与底物结合,并和酶催化作用 直接有关的部位。必需基团必需基团活性部位维持酶的空间结构结合基团催化基团专一性催化性质第15页,共57页,编辑于2022年,星期三活性
12、中心内的必需基团活性中心内的必需基团结合基团结合基团(binding group)与底物相结合与底物相结合催化基团催化基团(catalytic group)催化底物转变成产物催化底物转变成产物 位于活性中心以外,维持酶活性中心应有的空间位于活性中心以外,维持酶活性中心应有的空间构象所必需。构象所必需。活性中心外的必需基团活性中心外的必需基团第16页,共57页,编辑于2022年,星期三底底 物物 活性中心以外活性中心以外的必需基团的必需基团结合基团结合基团催化基团催化基团 活性中心活性中心 第17页,共57页,编辑于2022年,星期三第18页,共57页,编辑于2022年,星期三q温度的双重影响温
13、度的双重影响(1)随着温度的增加,反应速)随着温度的增加,反应速 度也增加,直至最大速度为止。度也增加,直至最大速度为止。(2)随温度升高而使酶逐步变)随温度升高而使酶逐步变 性,反应速度减小。性,反应速度减小。第二节第二节 影响酶活力的因素影响酶活力的因素q最适温度最适温度 酶促反应速度最快时的环境温酶促反应速度最快时的环境温 度。此时酶的活力最高度。此时酶的活力最高。其不是其不是 酶的特征性常数酶的特征性常数酶酶活活性性0.51.02.01.50 10 20 30 40 50 60 温度温度 C 温度对淀粉酶活性的影响温度对淀粉酶活性的影响 第19页,共57页,编辑于2022年,星期三2.
14、pH对酶促反应的影响对酶促反应的影响1.最适pH 2.pH稳定性表现出酶最大活力的表现出酶最大活力的pHpH值值在一定的在一定的pH范围内酶是稳范围内酶是稳定的。定的。pH对酶作用的影响机制对酶作用的影响机制:1.1.环境过酸、过碱使酶变性失活;环境过酸、过碱使酶变性失活;2.2.影响酶活性基团的解离;影响酶活性基团的解离;3.3.影响底物的解离。影响底物的解离。0酶酶活活性性pH pH对某些酶活性的影响对某些酶活性的影响 胃蛋白酶胃蛋白酶胃蛋白酶胃蛋白酶 淀粉酶淀粉酶淀粉酶淀粉酶 胆碱酯酶胆碱酯酶胆碱酯酶胆碱酯酶 246810第20页,共57页,编辑于2022年,星期三3.酶浓度对酶促反应的
15、影响酶浓度对酶促反应的影响在有在有足够底物足够底物和其他条件不变的情况下:和其他条件不变的情况下:v=k E4.底物浓度对酶促反应的影响底物浓度对酶促反应的影响(1)底物浓度对酶反应速度的影响底物浓度对酶反应速度的影响酶促反应的速度与酶浓度成正比酶促反应的速度与酶浓度成正比第21页,共57页,编辑于2022年,星期三当底物浓度较低时当底物浓度较低时反应速度与底物浓度成正比;反应反应速度与底物浓度成正比;反应为一级反应。为一级反应。SVVmax第22页,共57页,编辑于2022年,星期三随着底物浓度的增高随着底物浓度的增高反应速度不再成正比例加速;反应为混合反应速度不再成正比例加速;反应为混合级
16、反应。级反应。SVVmax第23页,共57页,编辑于2022年,星期三当底物浓度高达一定程度当底物浓度高达一定程度反应速度不再增加,达最大速度;反应反应速度不再增加,达最大速度;反应为零级反应为零级反应SVVmax第24页,共57页,编辑于2022年,星期三(2)米曼氏方程式)米曼氏方程式中间产物中间产物pp 酶促反应模式酶促反应模式中间产物学说中间产物学说E+S k1k2k3ESE+P酶酶底物底物酶酶产物产物ppMichaelisMichaelis和和和和MentenMenten提提提提出出出出反反反反应应应应速速速速度度度度与与与与底底底底物物物物浓浓浓浓度度度度关关关关系系系系的的的的数
17、数数数学学学学方方方方程程程程式式式式,即即即即米米米米曼曼曼曼氏氏氏氏方方方方程程程程式式式式,简简简简称称称称米米米米氏氏氏氏方方方方程程程程式式式式(Michaelis(Michaelis equation)equation)。VmaxS Km+S S:底物浓度底物浓度V:不同不同S时的反应速度时的反应速度Vmax:最大反应速度最大反应速度(maximum velocity)m:米氏常数米氏常数(Michaelis constant)第25页,共57页,编辑于2022年,星期三p米曼氏方程式推导基于两个假设:米曼氏方程式推导基于两个假设:lE与与S形成形成ES复合物的反应是快速平衡反应,
18、而复合物的反应是快速平衡反应,而ES分解分解为为E及及P的反应为慢反应,反应速度取决于慢反应即的反应为慢反应,反应速度取决于慢反应即 Vk3ES。(1)lS的总浓度远远大于的总浓度远远大于E的总浓度,因此在反应的初始阶段,的总浓度,因此在反应的初始阶段,S的浓度可认为不变即的浓度可认为不变即SSt。第26页,共57页,编辑于2022年,星期三当反应速度为最大反应速度一半时当反应速度为最大反应速度一半时v Km值的推导值的推导KmS Km值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的值等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度,单位是底物浓度,单位是mol/L。2Km+S Vmax VmaxSVm
19、axVSKmVmax/2 第27页,共57页,编辑于2022年,星期三第28页,共57页,编辑于2022年,星期三(3)Km与与Vmax的意义的意义 Km值值 Km等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物等于酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物 浓度。浓度。(Km的单位为浓度单位)的单位为浓度单位)是酶在一定条件下的是酶在一定条件下的特征物理常数特征物理常数,通过测定,通过测定Km的数值,可鉴别酶。的数值,可鉴别酶。可近似表示酶和底物亲合力,可近似表示酶和底物亲合力,Km愈小,愈小,E对对S的亲的亲 合力愈大,合力愈大,Km愈大,愈大,E对对S的亲合力愈小的亲合力愈小。在已知在已知Km的情
20、况下,应用米氏方程可计算任意的情况下,应用米氏方程可计算任意s 时的时的v,或任何,或任何v下的下的s。(用。(用Km的倍数表示)的倍数表示)第29页,共57页,编辑于2022年,星期三 Vmax定义:定义:Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度,是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。与酶浓度成正比。意义:意义:Vmax=K3 E如果酶的总浓度已知,可从如果酶的总浓度已知,可从Vmax计算计算 酶的转换酶的转换数数(turnover number),即动力学常数,即动力学常数K3。第30页,共57页,编辑于2022年,星期三(4)m值与值与max值的测定值的测定基本原则基本原则:将米氏方
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