食品检验工微生物基础幻灯片.ppt
《食品检验工微生物基础幻灯片.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《食品检验工微生物基础幻灯片.ppt(55页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、食品检验工微生物基础第1页,共55页,编辑于2022年,星期三目录微生物检测基础知识食品检测基础知识(微生物检验部分)食品安全卫生基础知识饮料中的致病菌、商业无菌进行测定菌落总数测定大肠菌群数测定致病菌检测技术检验结果的分析及检验报告的编写第2页,共55页,编辑于2022年,星期三一、微生物检测基础知识一、微生物检测基础知识1微生物学检验的范围生产环境的检验空气墙壁、地面及生产用水空气墙壁、地面及生产用水原辅料的检验主料、辅料、添加剂等主料、辅料、添加剂等食品加工、储藏、销售环节的检验对生产人员的卫生状况、食品加工工具、运输工具及包装材对生产人员的卫生状况、食品加工工具、运输工具及包装材料等料
2、等食品的检验出口食品、可疑食品及食物中毒食品出口食品、可疑食品及食物中毒食品第3页,共55页,编辑于2022年,星期三2微生物学检验的指标细菌菌落总数细菌菌落总数反映食品的新鲜度、被细菌污染的程度及在加工过细菌菌落总数反映食品的新鲜度、被细菌污染的程度及在加工过程中细菌繁殖动态的一项指标程中细菌繁殖动态的一项指标判断食品卫生质量的重要依据判断食品卫生质量的重要依据大肠菌群数作为人畜粪便污染的指标,评价食品卫生质量作为人畜粪便污染的指标,评价食品卫生质量的重要依据的重要依据致病菌第4页,共55页,编辑于2022年,星期三3微生物检验的要求微生物检验室的基本要求微生物学检验人员的要求微生物检验程序
3、的基本要求培养基与试剂的基本要求培养基的分类培养基原料的质量控制第5页,共55页,编辑于2022年,星期三培养基的分类培养基的分类培养基的分类培养基的分类据组成成分可分为据组成成分可分为:a合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。合成培养基:由各种纯化学物质按一定比例配制而成。b半合成培养基:有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配半合成培养基:有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。制而成。c天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成。天然培养基:利用天然来源的有机物配制而成。按用途可分为按用途可分为按用途可分为按用途可分为a基础培养基:能满足各种微生物的营养需求基础培养基:能满足
4、各种微生物的营养需求加富培养基:加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质,使加富培养基:加入某种微生物生长繁殖所需的营养物质,使其快速生长,便于分离其快速生长,便于分离b选择培养基:加入某种物质抑制其他微生物生长,使目标选择培养基:加入某种物质抑制其他微生物生长,使目标微生物得到富集,便于分离微生物得到富集,便于分离c鉴别培养基:用来检测微生物的某些代谢特性鉴别培养基:用来检测微生物的某些代谢特性d特殊培养基:加入一些特殊营养物质,如血清、血液等特殊培养基:加入一些特殊营养物质,如血清、血液等第6页,共55页,编辑于2022年,星期三培养基原料的质量控制琼脂质量的控制琼脂粉和琼脂条,一般为琼脂粉和
5、琼脂条,一般为1.5-2%蛋白胨的质量控制胆盐的质量控制选择性培养基选择应控制好选择性培养基选择应控制好牛肉膏及酵母浸膏的质量控制培养基性能的控制染色液的控制各种诊断血清的质量控制第7页,共55页,编辑于2022年,星期三3微生物检验样品的采取及处理样品采集的目的和要求采集目的:准确评价食品的卫生状况,为保证食品质量、准确评价食品的卫生状况,为保证食品质量、改进管理提供依据改进管理提供依据采集的要求:必须有代表性必须有代表性采样前应事先准备好灭菌采样前应事先准备好灭菌的容器和采样工具,在无菌条件下,按照国家有关样品的容器和采样工具,在无菌条件下,按照国家有关样品采集标准均匀而准确地取样,使其具
6、有代表性;同时采采集标准均匀而准确地取样,使其具有代表性;同时采样必须妥善存放,严防污染或再污染;微生物学检验必样必须妥善存放,严防污染或再污染;微生物学检验必须具有及时性,采集后的样品送到检验室越快越好,一须具有及时性,采集后的样品送到检验室越快越好,一般不超过般不超过3h,若路途遥远,可进行低温保藏;做好相应,若路途遥远,可进行低温保藏;做好相应的记录。的记录。第8页,共55页,编辑于2022年,星期三4培养基的制备培养基配方的选定培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据
7、自己的使用目的,加以选用,记录其来源。培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。培养基成分的称取培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于旁侧,每称完一种成分即在配方上面做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。第9页,共55页,编辑于2022年,星期三培养基各成份的混合和溶化培养基各成份的混合和
8、溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,直至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。第10页,共55页,编辑于2022年,星期三培养基培养基pH的初步调整的初步调整培养基的过滤澄清培养基的过滤澄
9、清培养基的分装培养基的分装分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为恰当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以测定该批培养基最终pH之用第11页,共55页,编辑于2022年,星期三培养基的质量测试培养基的质量测试每批培养基制备好以后,应仔细检查一遍,如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终pH。将全部培养基放入361恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。用有关的标准菌株接种1-2管或瓶培养基,培养24-48小时,如无菌生长或生长不好。
10、应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。培养基的保存培养基的保存培养基应存放于冷暗处,最好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。第12页,共55页,编辑于2022年,星期三培养基的配制培养基的配制(1)称量)称量按培养基的配方准确称取各成分,其中牛肉膏放在小烧杯里称量,其他成分放在称量纸上称量。(2)溶化)溶化用烧杯先装少许水,依次将药品倒入铝锅中,加足水,然后在电炉上加热溶化。(3)PH值值值值用精密的PH试纸测定,并用1%氧化钠或5%盐酸调节到所需的PH值。(4 4)过滤)
11、过滤趁热用纱布将培养基进行过滤。(5 5)分装)分装)分装)分装过滤后根据不同需要,立即趁热装入试管或三角瓶等容器中。第13页,共55页,编辑于2022年,星期三第14页,共55页,编辑于2022年,星期三注意事项注意事项(1)不要使培养基沾在管口,如沾上,需用干净的纱布擦干净。(2)液体培养基:分装高度以试管的1/4左右为宜。(3)固体培养基:分装试管,其装量为管高的1/61/5灭菌后制成斜面。分装三角瓶容量之一半为宜。(4)半固体培养基:分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后,垂直待凝成半固体深层琼脂。第15页,共55页,编辑于2022年,星期三(6)做棉塞装好培养基的试管都要加上棉塞
12、,这样既可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发,制棉塞的方法多种,形状各异,总原则如下:(1)用脱脂棉制作(脱脂棉花易吸水)(2)松紧适合(3)塞头不要太大,一般为球状。(7)包装试管口或三角瓶口棉塞部分,用牛皮纸扎,以防灭菌时水蒸气打湿棉塞。第16页,共55页,编辑于2022年,星期三(8)灭菌)灭菌灭菌是指杀死物品上或环境中的所有微生物。灭菌方法可分为四种:物理灭菌、机械灭菌、化学灭菌和生物灭菌。物理灭菌:1、热力灭菌:2、紫外光灭菌:一般应用于无菌室和接种箱的灭菌。第17页,共55页,编辑于2022年,星期三干热灭菌:适用于玻璃仪器,将物品放入烘箱,160170oC,12小时
13、。火焰灭菌:适用于常用用具,如接种环、镊子等。灭菌方法是放在火焰上直接灼烧。湿热灭菌:(1)高压蒸汽灭菌:适用于培养基、衣物等的灭菌。(2)间歇蒸汽灭菌:适用于不耐高温的培养基或无高压蒸汽灭菌锅时。(3)巴斯德灭菌:适用于牛乳类等不耐高温的物体。紫外光灭菌:一般应用于无菌室和接种箱的灭菌。第18页,共55页,编辑于2022年,星期三高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌锅是一个耐高压又密闭的金属锅。它是利用在密闭条件下产生高压蒸汽来达到灭菌的效果。其温度在100oC以上,有强大的杀菌能力。因此它是一种用途广泛,效率高的灭菌工具。分类:1、卧式2、立式具体操作步骤:(1)加入适量自来水于灭菌锅中(至水位线)(
14、2)摆入上述包装好的待灭菌的培养基,注意:不要摆得太挤,以免影响蒸汽流通和灭菌效果。(3)加盖旋紧螺旋,使蒸汽锅密闭不漏气(对角线均匀拧旋)第19页,共55页,编辑于2022年,星期三(4)打开放气阀,打开电源,自开始产生蒸汽后10分钟(此时蒸汽锅内的冷空气由排气阀排尽)关紧放气阀,让温度随蒸汽压力上升而上升,当达所需压力时(15磅/时2)控制热源维持所需时间(30分钟)然后停止加热,让其自然冷却。(5)待压力降至0磅时,打开排气阀,再打开锅盖,取出灭菌物。注意:压力未降至0磅时,切勿打开锅盖,否则突然降压,招致培养基沸腾,沾湿棉塞,甚至冲出管外。(6)自锅中取出灭菌好的培养基,放置稍冷却后摆
15、成斜面,而后至37oC恒温箱培养24小时,无菌生长,方可保存备用。应用此法灭菌是否彻底的一个重要关键是在压力上升之前,必须将锅内的冷空气完全排尽,否则虽然压力表已指15磅/时,但锅内的温度还只有100oC,结果往往造成灭菌不彻底。第20页,共55页,编辑于2022年,星期三斜面摆放示意图:第21页,共55页,编辑于2022年,星期三无菌水的制备无菌水的制备 用10ml量筒量取9.0的自来水,装入18*180的中号试管中,用100ml量筒量取99ml的自来水装入250ml的三角瓶中,做好棉塞,用牛皮纸包好,高压灭菌,备用。移液管、培移液管、培养养皿的皿的干干热灭菌菌(1)在移液管尾部塞上少许脱脂
16、棉花,然后用报纸条包好。(2)用报纸条包好干燥的培养皿。(3)将已包好的移液管、培养皿放入电烘箱干热灭菌。干热灭菌是在恒温电箱中进行,它是利用高热空气来达到灭菌效果,因此称干热灭菌。适合玻璃器皿和金属用具的灭菌。带有胶皮的物品,含水份的物质,培养基等不可用这种方法。第22页,共55页,编辑于2022年,星期三操作步骤:(1)将待灭菌物品包扎好,均匀放入烘箱内,注意不要摆的太挤,以免妨碍气流流通。(2)打开鼓风机、开启电源,当温度100oC时,关闭通气孔,调温度至160oC,借恒温调节器的自动控制调节器,保持此温度12小时。(3)中断电源,待温度降至70oC以下时,打开箱门,取出灭菌物品。第23
17、页,共55页,编辑于2022年,星期三第24页,共55页,编辑于2022年,星期三1)实验前,无菌室应打开紫外线灯灭菌30分钟以上,实验中应穿工作衣帽.2)严格无菌操作,接种针、接种环在使用前后都必须火焰灼烧。3)实验前后用75%(v/v)酒精对手消毒。4)沾有病原微生物的器材,应置于指定地点。废弃物应用5%苯酚浸泡。第25页,共55页,编辑于2022年,星期三5显微镜的使用第26页,共55页,编辑于2022年,星期三罗伯特罗伯特 虎克观察虎克观察到的细胞罗伯特虎克制造的显微镜(1665)第27页,共55页,编辑于2022年,星期三列文虎克和他的显微镜(约1680)1680荷兰人A.van L
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 食品 检验 微生物 基础 幻灯片
限制150内