第十二章 毛细管电泳法优秀课件.ppt

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1、第十二章毛细管电泳法第1页，本讲稿共17页12.1基本概念电泳：一个“自由”带电粒子在一定介质中在电场作用下的迁移淌度：ep表述物质电泳特性的参数，与粒子电荷、质量、半径、介质等有关第2页，本讲稿共17页电电渗渗：eo由于粘滞阻力的存在，离子的电泳会带动溶剂同向运动。正负离子当量数相同时，溶剂受到大小相等方向相反的作用力，因此通常观测不到溶剂的运动。若设法使某种离子不运动，则作用于溶剂的力便失去了平衡，溶剂发生单向流动，这种流动称电渗。第3页，本讲稿共17页在不考虑相互作用的前提下，粒子在毛细管介质中的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。一般情况下，电渗流速度是电泳流速度的5-7倍，混合物中

2、所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。式中E：场强eo电泳淌度ep电渗淌度第4页，本讲稿共17页12.2原理电渗流方向：高电位低电位正溶质离子所受的力：电场力+电渗力负溶质离子所受的力：电场力电渗力中性分子所受的力：电渗力柱效：N5.54（tR/W1/2)2tR、W1/2取同一单位第5页，本讲稿共17页溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定，一般来说，溶质迁移方向与电渗流同。流出顺序：正离子中性粒子负离子高压(+)电渗流()地第6页，本讲稿共17页电渗流XXXXX（）（）高压（）（）地第7页，本讲稿共17页12.3 高效毛细管电泳高效毛细管电泳仪器装置图清洗记录检测器高压电源毛细管电解液第8页，

3、本讲稿共17页12.3.1高压电源0-30KV输出，恒压恒流，正负极性可调。Pt丝为电极12.3.2进样系统A、重力（高度差）进样B、负压进样C、电渗法进样12.3.3分离系统毛细管：I.D.：50m-75m，长30-100cm 第9页，本讲稿共17页12.3.4检测系统商品仪器：UV-VIS，加石英聚焦镜；激光荧光实验室：质谱，电分析12.3.5清洗系统一般用负压法，NaOH洗液，减少吸附，清洗对重现性影响重大 第10页，本讲稿共17页12.4分类q常规区带电泳（CZE）q胶束电动毛细管色谱（MECC）q毛细管离子分析SO3SO3SO3SO3SO3SO3第11页，本讲稿共17页12.4.1常

4、规区带电泳（CZE）电解质缓冲液，正高压分离阳离子和大分子阴离子12.4.2胶束电动毛细管色谱（MECC）揉合了毛细管电泳和液相分配色谱的原理，将表面活性剂加到电解液中，溶质分子进入体系后在胶束相和水相之间进行分配，不同的溶质分子因电泳速度和分配系数的不同而分离。第12页，本讲稿共17页主要用于分离中性分子，正高压MECC体系存在着类似于色谱的两相，一是流动的水相，另一相是移动的“固定相”-胶束相，溶质在这两相之间分配。表面活性剂的浓度足够大时，单体结合在一起，形成一个球体，称为胶束，这个足够大的浓度称为临界浓度。第13页，本讲稿共17页12.4.3毛细管离子分析加电渗流改性剂使电渗流反向，用

5、于淌度很大的离子的分离，主要是无机阴离子的分离。负高压加阳离子表面活性剂，e.g.十六烷基三甲基溴化铵第14页，本讲稿共17页12.5应用及前景应用及前景 特点：A、分离效率高：104理论塔板数，接近GCB、分离速度快：优于LC，接近GCC、进样量少：nLD、可分离GC受限制的物质第15页，本讲稿共17页应用：A、药物分析：旋光异构体B、生化分析：氨基酸衍生物、蛋白、DNAC、环境分析：PAH、阴离子、酚弱点：检测器的绝对灵敏度高，但浓度灵敏度仅为ppm第16页，本讲稿共17页发展趋势：A、检测器的创新B、预浓缩富集技术：利用电泳原理富集阴阳离子；C18等吸附剂在线应用C、移植成熟的液相色谱技术于毛细管电泳中第17页，本讲稿共17页