转基因动物.ppt

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1、关于转基因动物关于转基因动物现在学习的是第1页，共59页转基因动物的概念转基因动物的概念借助基因工程技术把借助基因工程技术把外源目外源目的基因的基因导入动物的导入动物的生殖生殖细胞、胚胎干细胞或早期细胞、胚胎干细胞或早期胚胎胚胎，使之在受体染色，使之在受体染色体上稳定整合，并能把体上稳定整合，并能把外源目的基因传给子代外源目的基因传给子代的个体，叫转基因动物的个体，叫转基因动物（transgenic animals）1982现在学习的是第2页，共59页现在学习的是第3页，共59页现在学习的是第4页，共59页第一节 动物转基因技术l1 1 显微注射法显微注射法l2 2 逆转录病毒法逆转录病毒法l

2、3 3 胚胎干细胞法胚胎干细胞法l4 4 精子载体法精子载体法l5 5 体细胞核移植法体细胞核移植法现在学习的是第5页，共59页一.显微注射法 在显微镜下将体外构建的将体外构建的外源目的基因外源目的基因，用注射针用注射针注射到动物受精卵注射到动物受精卵中，中，使之使之与动物基因组与动物基因组整合，从而得到转基因动物的方法整合，从而得到转基因动物的方法。现在学习的是第6页，共59页现在学习的是第7页，共59页1 1、目的、目的DNADNA的准备的准备l构建目的基因的表达载体：构建目的基因的表达载体：目的基因应包含完整的目的基因应包含完整的ORF,ORF,顺式调控序列，顺式调控序列，加尾信号。加尾

3、信号。l线性线性DNADNA分子的准备分子的准备lDNADNA浓度：浓度：1-3g/ml.1-3g/ml.现在学习的是第8页，共59页2 2、小鼠的准备和要求、小鼠的准备和要求l超排受精卵的准备超排受精卵的准备：l选择选择4 46 6周龄的小鼠，用孕马血清促性腺激素素周龄的小鼠，用孕马血清促性腺激素素（PMSGPMSG）和人绒毛促性）和人绒毛促性腺激素腺激素（hCGhCG）先后进行腹腔注射，做超数排卵处理；先后进行腹腔注射，做超数排卵处理；注射后注射后10101313小时超排卵，每个母鼠与一个公鼠交配小时超排卵，每个母鼠与一个公鼠交配。l假孕母鼠的准备：假孕母鼠的准备：l通过注射通过注射PMS

4、GPMSG和和hCGhCG诱导产生，再与结扎的公鼠交配诱导产生，再与结扎的公鼠交配。现在学习的是第9页，共59页3 3、受精卵的分离、受精卵的分离l处死经超排处理的小鼠，从输卵管膨大部位取出处死经超排处理的小鼠，从输卵管膨大部位取出受精卵受精卵l解散卵丘细胞解散卵丘细胞,清洗受精卵清洗受精卵l在显微镜下在显微镜下确认和选择受精卵。确认和选择受精卵。现在学习的是第10页，共59页4 4、显微注射、显微注射将受精卵置于将受精卵置于培养皿或玻片的液滴培养皿或玻片的液滴内，用吸持针吸住受精卵；将外源内，用吸持针吸住受精卵；将外源基因注入基因注入受精卵的雄原核受精卵的雄原核内。内。现在学习的是第11页，

5、共59页首只转基因猴首只转基因猴安迪安迪和制备它和制备它的卵母细胞的卵母细胞现在学习的是第12页，共59页转基因转基因果蝇的果蝇的制作制作现在学习的是第13页，共59页5 5、受精卵的移植、受精卵的移植l将假孕小鼠麻醉，在腹部下方与最后一根肋骨平行的地方开一个将假孕小鼠麻醉，在腹部下方与最后一根肋骨平行的地方开一个小口，在小口，在输卵管壶口处用微吸管将注射过的受精卵移入，输卵管壶口处用微吸管将注射过的受精卵移入，缝合伤口。缝合伤口。按常规饲养，按常规饲养，2020天前后，后代幼鼠将产出。天前后，后代幼鼠将产出。现在学习的是第14页，共59页6 6、转基因小鼠的鉴定、转基因小鼠的鉴定lPCRlS

6、outhern blotlNorthern blotlWestern blotl标记性状标记性状现在学习的是第15页，共59页标记性状鉴标记性状鉴定转基因果定转基因果蝇蝇现在学习的是第16页，共59页显微注射法的效率显微注射法的效率l每天可注射几百个卵，但大约只有每天可注射几百个卵，但大约只有66%66%能存活；移入能存活；移入子宫后，大约子宫后，大约25%25%的受精卵能发育成幼鼠；其中又有的受精卵能发育成幼鼠；其中又有大约大约25%25%左右的幼鼠是转基因鼠。左右的幼鼠是转基因鼠。l理想情况下，理想情况下，303050/100050/1000l一般情况下，一般情况下，1/10001/100

7、0现在学习的是第17页，共59页影响影响转基转基因动因动物成物成功的功的关键关键制约制约因素因素是什是什么？么？现在学习的是第18页，共59页提高目的提高目的DNADNA的整合率与表达率的整合率与表达率顺式调控顺式调控序列序列MARMAR序列序列同源重同源重组组转座子转座子现在学习的是第19页，共59页7 7、显微注射法的不足显微注射法的不足l外源基因整合效率低；外源基因整合效率低；l随机整合或随机插入，存在插入突变的风险随机整合或随机插入，存在插入突变的风险l方法复杂，技术性强，设备昂贵等。方法复杂，技术性强，设备昂贵等。压力压力调节调节仪仪或或程控程控注射注射仪仪现在学习的是第20页，共5

8、9页（1 1）逆转录病毒的结构）逆转录病毒的结构二二二二.逆转录病毒法逆转录病毒法逆转录病毒法逆转录病毒法现在学习的是第21页，共59页（2 2）逆转录病毒的基因组）逆转录病毒的基因组l基因组长基因组长9kb9kb，LTRLTR细分为细分为5-u3-R-u5-35-u3-R-u5-3。其中。其中u3u3区包含病毒的区包含病毒的增强子和启动子序列，增强子和启动子序列，R R区包含一个区包含一个CapCap区区。u5u5区包含聚腺苷酸加尾信区包含聚腺苷酸加尾信号号。5LTR5LTR的的33边界区是引物结合位点（边界区是引物结合位点（PBSPBS）。）。U5U5的下游还有的下游还有序列，包装识别信号

9、。序列，包装识别信号。5 LTR LTR 35 LTR LTR 3U3U3R RU5U5U3U3R RU5U5 小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒(Mo-MLV)(Mo-MLV)gag pol envgag pol env病毒核心病毒核心病毒核心病毒核心 逆转录酶逆转录酶逆转录酶逆转录酶 外壳蛋白外壳蛋白外壳蛋白外壳蛋白抗原基因抗原基因抗原基因抗原基因 基因基因基因基因 基因基因基因基因现在学习的是第22页，共59页(3)(3)逆转录病毒的生活周期逆转录病毒的生活周期 l病毒侵入细胞；病毒侵入细胞；l病毒的病毒的RNARNA基因组在细胞质中基因组在细胞质中反转录反转录成双

10、链的前病毒成双链的前病毒DNA(DNA(复制形式复制形式DNA)DNA)；l前病毒前病毒DNADNA被传送至细胞核，并最终整合到宿主染色体上；被传送至细胞核，并最终整合到宿主染色体上；l整合后的前病毒整合后的前病毒DNADNA进而使用宿主细胞的进而使用宿主细胞的RNARNA聚合酶转录自己；聚合酶转录自己；l最后，部分转录的信息被翻译成病毒蛋白质，组装成新的病毒。最后，部分转录的信息被翻译成病毒蛋白质，组装成新的病毒。现在学习的是第23页，共59页l受体受体l吞噬吞噬l脱外壳脱外壳l逆转录逆转录l核蛋白复合核蛋白复合体体l有丝分裂有丝分裂l复合体进入复合体进入核核现在学习的是第24页，共59页l

11、病毒病毒DNADNA蛋白复合体中含有由一个病毒蛋白复合体中含有由一个病毒DNADNA的的polpol基因所编基因所编码的内切酶码的内切酶，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，而病，在此酶的作用下，宿主染色体被切开，而病毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂的毒的染色体得以嵌入。此过程发生在细胞有丝分裂的S S期。期。l嵌入后的前病毒被细胞的嵌入后的前病毒被细胞的RNARNA聚合酶聚合酶IIII转录为病毒转录为病毒RNARNA，其蛋，其蛋白质表达完全依赖于细胞的蛋白质合成机构。白质表达完全依赖于细胞的蛋白质合成机构。现在学习的是第25页，共59页(4)(4)逆转录病毒载体的构建逆转录病毒载体

12、的构建 l为了保证逆转录病毒载体的感染功能，建立为了保证逆转录病毒载体的感染功能，建立包装细胞包装细胞，在包装，在包装细胞里细胞里表达三个逆转录病毒的结构基因表达三个逆转录病毒的结构基因。所以首先让携带有外。所以首先让携带有外源目的基因的逆转录病毒载体感染包装细胞，在包装细胞中源目的基因的逆转录病毒载体感染包装细胞，在包装细胞中被包装成新的子代病毒颗粒，再去感染动物宿主细胞。被包装成新的子代病毒颗粒，再去感染动物宿主细胞。5 LTR LTR 35 LTR LTR 3U3U3R RU5U5U3U3R RU5U5 小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒小鼠白血病病毒(Mo-MLV)(Mo-ML

13、V)外源目的基因外源目的基因现在学习的是第26页，共59页现在学习的是第27页，共59页（5 5）逆转录病毒介导转基因的优势）逆转录病毒介导转基因的优势l逆转录病毒载体可同时感染大量胚胎，也可感染稍晚阶段的逆转录病毒载体可同时感染大量胚胎，也可感染稍晚阶段的不同发育时期的胚胎；不同发育时期的胚胎；l高效率感染并能在宿主细胞高效率感染并能在宿主细胞DNADNA上高度整合，可以大大提高上高度整合，可以大大提高基因的转移效率。基因的转移效率。l但这一高的感染率绝对依赖于细胞的两个特性：一是细胞要具有但这一高的感染率绝对依赖于细胞的两个特性：一是细胞要具有逆转录病毒的受体，二是目标细胞需要进行细胞分裂

14、。二者缺一逆转录病毒的受体，二是目标细胞需要进行细胞分裂。二者缺一不可。不可。现在学习的是第28页，共59页（6 6）逆转录病毒的安全性问题）逆转录病毒的安全性问题 l虽然逆转录病毒载体可同时感染大量胚胎，感染效率高，并能虽然逆转录病毒载体可同时感染大量胚胎，感染效率高，并能在宿主细胞在宿主细胞DNADNA上高度整合，但只可以转移小片断的小于上高度整合，但只可以转移小片断的小于10kb10kb的的DNADNA。而且存在安全隐患。如逆转录病毒在靶细胞染色体上的整。而且存在安全隐患。如逆转录病毒在靶细胞染色体上的整合可能造成：合可能造成：l1 1）破坏细胞正常生长的必须基因）破坏细胞正常生长的必须

15、基因/抑癌基因抑癌基因l2 2）LTRLTR激活原癌基因激活原癌基因l3 3）染色体重排激活原癌基因）染色体重排激活原癌基因 现在学习的是第29页，共59页三三.胚胎干细胞法胚胎干细胞法l胚胎干细胞（胚胎干细胞（embryonic stem cell,ESembryonic stem cell,ES细胞）细胞）是指从是指从哺乳动物囊胚期内的细胞团中分离出来的尚未分化的哺乳动物囊胚期内的细胞团中分离出来的尚未分化的胚胎细胞，这种细胞具有发育的潜能性，能够分化出胚胎细胞，这种细胞具有发育的潜能性，能够分化出各种组织。各种组织。现在学习的是第30页，共59页（1 1）利用）利用ESES细胞制备转基因

16、小鼠细胞制备转基因小鼠 l从从受精后受精后3.53.5天的雌鼠子宫天的雌鼠子宫中取出胚胎，在胚胎培养基中培养中取出胚胎，在胚胎培养基中培养直至囊胚期，脱去透明带。直至囊胚期，脱去透明带。l鼠胚贴壁生长鼠胚贴壁生长4 46 6天后，天后，ICMICM增殖为一团圆柱形的细胞，即增殖为一团圆柱形的细胞，即内内细胞团细胞团ICMICM。l在体视镜下离散在体视镜下离散ICMICM，分别培养在培养板中，筛选，分别培养在培养板中，筛选ESES细胞克隆，细胞克隆，特征是细胞小，核大，胞质少，核内有一个或多个凸出的深色特征是细胞小，核大，胞质少，核内有一个或多个凸出的深色核仁结构核仁结构，细胞紧靠，很难辨认单个

17、细胞。，细胞紧靠，很难辨认单个细胞。现在学习的是第31页，共59页现在学习的是第32页，共59页现在学习的是第33页，共59页胚胎干细胞介导转基因动物的产生胚胎干细胞介导转基因动物的产生l体外直接体外直接将外源基因导入将外源基因导入ESES细胞细胞l体外培养筛选体外培养筛选l再再注入到受体囊胚腔中，与其中的囊胚细胞聚集在一起，成为受注入到受体囊胚腔中，与其中的囊胚细胞聚集在一起，成为受体胚胎的一部分体胚胎的一部分，参与其分化，参与其分化l成为嵌合体成为嵌合体l再通过杂交成为纯合体再通过杂交成为纯合体现在学习的是第34页，共59页现在学习的是第35页，共59页（2 2）利用）利用ESES细胞进行

18、基因敲除细胞进行基因敲除 基因敲除的概念：基因敲除的概念：l利用外源的已利用外源的已突变的基因通过同源重组的方法突变的基因通过同源重组的方法替换掉内源的同替换掉内源的同源基因源基因,从而使内源基因失活而表现突变体的性状的技术或方从而使内源基因失活而表现突变体的性状的技术或方法法.现在学习的是第36页，共59页基因敲除的步骤基因敲除的步骤l筛选小鼠目的基因或基因片筛选小鼠目的基因或基因片段段l构建目的基因靶标载体构建目的基因靶标载体（带（带新霉素抗性基因）新霉素抗性基因）l电穿孔技术将载体转入电穿孔技术将载体转入ESES细细胞胞l挑选新霉素抗性集落、挑选新霉素抗性集落、ESES细细胞培养胞培养l

19、分离分离DNADNA、PCRPCR或或Southern Southern blot blot l保存签定发生同源重组的保存签定发生同源重组的ESES细胞株细胞株l通过胚囊腔注射将通过胚囊腔注射将ESES细胞转细胞转入胚囊中入胚囊中l转入假孕鼠子宫中转入假孕鼠子宫中l嵌合体嵌合体 正常鼠正常鼠l l 杂合体杂合体 杂合体杂合体l(即被敲除一个基即被敲除一个基l 因拷贝的老鼠因拷贝的老鼠)纯合体纯合体 表型分析表型分析*现在学习的是第37页，共59页现在学习的是第38页，共59页正负筛选法正负筛选法l正选择标记的基因：正选择标记的基因：neoneor r，新霉素抗性基因，能在，新霉素抗性基因，能在

20、G418G418培养培养基上生长；基上生长；l负选择标记基因：负选择标记基因：tktk，简单庖疹病毒胸腺嘧啶核苷酸激酶简单庖疹病毒胸腺嘧啶核苷酸激酶基因。使核苷酸类似物基因。使核苷酸类似物GANGGANG或或FIAUFIAU磷酸化，在磷酸化，在DNADNA复制时整复制时整合到合到DNADNA链上，导致链上，导致DNADNA合成终止，造成细胞死亡。合成终止，造成细胞死亡。现在学习的是第39页，共59页现在学习的是第40页，共59页四四.精子载体法精子载体法l19891989年，年，LavitranoLavitrano等首次利用小鼠附睾精子与外源等首次利用小鼠附睾精子与外源DNADNA温育温育产生

21、转基因小鼠，产生转基因小鼠，转基因效率高达转基因效率高达30%30%；外源基因稳定整合到；外源基因稳定整合到生殖细胞中，由此获得了转基因的株系；生殖细胞中，由此获得了转基因的株系；l哺乳动物精子能够吸附结合外源哺乳动物精子能够吸附结合外源DNADNA；但不同的哺乳动物；但不同的哺乳动物细胞精子吸附细胞精子吸附DNADNA的能力不同，活精子比死精子能吸附更多的的能力不同，活精子比死精子能吸附更多的DNA;DNA;l经研究发现，经研究发现，外源外源DNADNA主要集中在精子的头部主要集中在精子的头部，作用部位是精子，作用部位是精子头部的赤道段和顶体后区。头部的赤道段和顶体后区。现在学习的是第41页

22、，共59页精子吸附外源的精子吸附外源的DNA DNA 方法方法l与精子共育法：用含与精子共育法：用含BSABSA的的PBSPBS对精液进行稀释，与外源对精液进行稀释，与外源DNADNA溶溶液混合温育液混合温育20204040分钟；分钟；l电穿孔导入法：短时电脉冲引起细胞膜瞬时产生微孔，使外电穿孔导入法：短时电脉冲引起细胞膜瞬时产生微孔，使外源源DNADNA进入细胞内；进入细胞内；l脂质体转染法脂质体转染法l体外受精法：超排处理的卵子与吸附了体外受精法：超排处理的卵子与吸附了DNADNA的精子共温育；的精子共温育；l胞质内显微注射法：先将精子与外源胞质内显微注射法：先将精子与外源DNADNA共孵

23、育，然后将精子头共孵育，然后将精子头部显微注射到处于减数分裂部显微注射到处于减数分裂IIII期的卵母细胞质中。期的卵母细胞质中。l脂质体转染法脂质体转染法现在学习的是第42页，共59页五五.体细胞核移植法体细胞核移植法 l将外源将外源目的基因导入能传代培养的动物体细胞目的基因导入能传代培养的动物体细胞（包括动物（包括动物成体体细胞、胎体成纤维细胞等），以这些动物体细胞为核成体体细胞、胎体成纤维细胞等），以这些动物体细胞为核供体，通过显微操作或电融合方法使核供体与供体，通过显微操作或电融合方法使核供体与去核的原核胚去核的原核胚细胞或去核的成熟卵母细胞细胞或去核的成熟卵母细胞核受体进行细胞重组融合

24、，使其核受体进行细胞重组融合，使其不经过有性繁殖过程。然后再对重组的胚胎进行胚胎移植，不经过有性繁殖过程。然后再对重组的胚胎进行胚胎移植，进而得到带有外源基因的转基因动物。进而得到带有外源基因的转基因动物。现在学习的是第43页，共59页l19971997年，英国罗斯林研究所的年，英国罗斯林研究所的WilmutWilmut等通过细胞核移植先后克等通过细胞核移植先后克隆隆绵羊绵羊“多莉多莉”和和“波莉波莉”成功，其中成功，其中“波莉波莉”是带有人血友是带有人血友病的凝血因子病的凝血因子IXIX的转基因羊。的转基因羊。l该技术转基因效率大为提高，转基因后代数目也迅速扩增。该技术转基因效率大为提高，转

25、基因后代数目也迅速扩增。在胚胎移植之前，已经筛选阳性细胞作为核供体，核移植之在胚胎移植之前，已经筛选阳性细胞作为核供体，核移植之后产生的胚胎后产生的胚胎100100为转基因个体。为转基因个体。现在学习的是第44页，共59页多莉绵羊的产生过程多莉绵羊的产生过程现在学习的是第45页，共59页现在学习的是第46页，共59页现在学习的是第47页，共59页第二节第二节 提高转基因效率的策略提高转基因效率的策略 l转基因动物效率普遍偏低，表达障碍或表达不可预见性是困扰转基因动物效率普遍偏低，表达障碍或表达不可预见性是困扰转基因研究的一个难题。提高转基因效率的策略有：转基因研究的一个难题。提高转基因效率的策

26、略有：l提高定点整合率；提高定点整合率；l建立更完善的转基因方法；建立更完善的转基因方法；l选择更好的标记基因；选择更好的标记基因；l使用大的外源使用大的外源DNADNA片段；片段；l选择强启动子系统促进基因表达等选择强启动子系统促进基因表达等。现在学习的是第48页，共59页第三节第三节 转基因动物的应用转基因动物的应用 1.1.采用转基因的过表达系统或基因剔除技术开展采用转基因的过表达系统或基因剔除技术开展基基因功能研究，基因调控机制的研究因功能研究，基因调控机制的研究等。等。现在学习的是第49页，共59页2.2.转基因动物在动物育种中的应用转基因动物在动物育种中的应用l提高抗病能力：如将流

27、感病毒基因或衣壳蛋白基因转入动物体内，提高抗病能力：如将流感病毒基因或衣壳蛋白基因转入动物体内，增强抗病力。增强抗病力。l提高动物生长速度：导入生长激素基因，生长激素释放因子基提高动物生长速度：导入生长激素基因，生长激素释放因子基因，类胰岛素生长因子基因等，提高生长速度。如硕鼠。因，类胰岛素生长因子基因等，提高生长速度。如硕鼠。l提高动物产毛性能：如将细菌的丝氨酸转移酶基因（提高动物产毛性能：如将细菌的丝氨酸转移酶基因（SATSAT）,D,D乙酰丝氨硫化氢解酶基因（乙酰丝氨硫化氢解酶基因（DASDAS）导入羊体内，将二硫化物转）导入羊体内，将二硫化物转化为半胱氨酸，提高角蛋白的合成量，改善羊毛

28、性能。化为半胱氨酸，提高角蛋白的合成量，改善羊毛性能。l改善乳品品质：如导入乳腺特异性表达启动子及大鼠肠乳糖改善乳品品质：如导入乳腺特异性表达启动子及大鼠肠乳糖酶基因，降低牛奶中乳糖含量。酶基因，降低牛奶中乳糖含量。l提高动物生存能力：提高鱼的耐受低溶氧性提高动物生存能力：提高鱼的耐受低溶氧性 。现在学习的是第50页，共59页WhyWhyTransgenic AnimalsTransgenic Animals现在学习的是第51页，共59页3.3.转基因动物在医药科学研究中的应用转基因动物在医药科学研究中的应用l异种器官移植：猪器官移植到人身上，要克服受体对外源器官异种器官移植：猪器官移植到人身

29、上，要克服受体对外源器官的超急性排斥反应（的超急性排斥反应（HAPHAP）的障碍，克服措施有）的障碍，克服措施有l降低或消除补体反应将人的补体调节蛋白因子基因CD55，CD59等通过转基因方法导入器官供体动物，含有CD55基因猪的心脏移植到猴体内后，猪心脏跳动了10天；l通过基因剔除来减少或改变供体器官的表面抗原，降低免疫排斥反应；l使供体器官表达人体免疫抑制因子，使得该种猪器官移植后在移植部位持续释放免疫抑制因子，抑制机体对移植物的免疫排斥，形成局部免疫耐受。现在学习的是第52页，共59页基因工程：基因治疗与器官移植基因工程：基因治疗与器官移植现在学习的是第53页，共59页l转基因动物模型转

30、基因动物模型作为人类疾病模型、治疗人类疾病的动物作为人类疾病模型、治疗人类疾病的动物模型及新药的筛选模型，如老年痴呆症动物模型的建立：模型及新药的筛选模型，如老年痴呆症动物模型的建立：将突变的淀粉样前提蛋白基因通过转基因方法导入小鼠，将突变的淀粉样前提蛋白基因通过转基因方法导入小鼠，使其在小鼠脑部过量表达。对转基因鼠的脑皮层和海马部使其在小鼠脑部过量表达。对转基因鼠的脑皮层和海马部位进行组织切片分析，发现大量的老年斑样结构。位进行组织切片分析，发现大量的老年斑样结构。现在学习的是第54页，共59页模式生物：疾病模型模式生物：疾病模型肝癌模型肝癌模型老年痴呆症模老年痴呆症模型型高血压模型高血压模

31、型I I型糖尿病转基型糖尿病转基因动物模型因动物模型现在学习的是第55页，共59页4.4.动物生物反应器动物生物反应器l生物反应器：从转基因动物体液或血液种收获基因产物的方生物反应器：从转基因动物体液或血液种收获基因产物的方式。乳腺生物反应器和血液生物反应器。式。乳腺生物反应器和血液生物反应器。l优点：生产成本低（优点：生产成本低（10001000倍），产量大（一只绵羊每年产倍），产量大（一只绵羊每年产奶奶300300500kg500kg），动物乳腺可对蛋白质进行复杂而专一的），动物乳腺可对蛋白质进行复杂而专一的翻译后加工，其过程类似于人体，可得到天然活性较高的翻译后加工，其过程类似于人体，可

32、得到天然活性较高的产品。乳汁纯化蛋白的激素简单，不污染环境。产品。乳汁纯化蛋白的激素简单，不污染环境。现在学习的是第56页，共59页现在学习的是第57页，共59页利用哺乳动物工程细胞生产的重组蛋白利用哺乳动物工程细胞生产的重组蛋白b b 干扰素干扰素g g 干扰素干扰素凝血因子凝血因子VIIIVIII凝血因子凝血因子IXIX促红细胞生成素（促红细胞生成素（EPOEPO）生长因子（生长因子（hGHhGH）白介素白介素 2 2（IL-2IL-2）乙型肝炎表面抗原乙型肝炎表面抗原单克隆抗体单克隆抗体 CD4CD4受体受体组织型纤溶酶原激活剂（组织型纤溶酶原激活剂（tPAtPA）迄今为止，已有大约迄今为止，已有大约300300种重组蛋白药物正在进行临种重组蛋白药物正在进行临床试验，但在哺乳动物工程细胞中大规模生产的只有床试验，但在哺乳动物工程细胞中大规模生产的只有少数几种：少数几种：现在学习的是第58页，共59页感谢大家观看现在学习的是第59页，共59页