第2章临床微生物检验标本的采集.ppt
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1、第2章临床微生物检验标本的采集现在学习的是第1页,共72页 在临床微生物检验工作中,标本的正确选择、采在临床微生物检验工作中,标本的正确选择、采集和运送是保证实验室质量的重要环节,是实验室工集和运送是保证实验室质量的重要环节,是实验室工作准确和有效的前提。作准确和有效的前提。现在学习的是第2页,共72页第一节第一节 标本的采集和处理原则标本的采集和处理原则现在学习的是第3页,共72页一、标本采集的一般原则一、标本采集的一般原则1.早期采集早期采集2.无菌采集无菌采集3.根据目的菌的特性用不同的方法采集根据目的菌的特性用不同的方法采集4.采集适量标本采集适量标本5.安全采集安全采集现在学习的是第
2、4页,共72页二、标本的处理二、标本的处理一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送,厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送,有时可直接用抽取标本的注射器运送。有时可直接用抽取标本的注射器运送。现在学习的是第5页,共72页其他所有的标本采集后最好在其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能及时送检,之内送到实验室。若不能及时送检,标本应置于一定环境中保存,如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应置于一定环境中保存,如支气管洗液、心包液
3、、痰、尿等标本应保存在标本应保存在4环境中,脑脊液等则要在环境中,脑脊液等则要在25保存。保存。患者标本中可能含有大量致病菌,不管标本运送距离远近,患者标本中可能含有大量致病菌,不管标本运送距离远近,都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁,容都必须注意安全防护。标本切勿污染容器的瓶口和外壁,容器必须包装好,防止送检过程中倒翻或碰破流出。器必须包装好,防止送检过程中倒翻或碰破流出。现在学习的是第6页,共72页现在学习的是第7页,共72页临床常见微生物学检验标本通常有血液、脑脊液、临床常见微生物学检验标本通常有血液、脑脊液、尿液、伤口的脓液、胸水、腹水、粪便、痰液及泌尿液、伤口的脓液、胸
4、水、腹水、粪便、痰液及泌尿生殖系统的分泌物等,下面分别介绍各种标本的尿生殖系统的分泌物等,下面分别介绍各种标本的采集方法及检测出不同病原体的临床意义。采集方法及检测出不同病原体的临床意义。现在学习的是第8页,共72页第二节第二节 血液血液现在学习的是第9页,共72页一、一、标本采集标本采集1.皮肤消毒程序皮肤消毒程序 严格执行以下三步法严格执行以下三步法:(1)70%酒精擦拭静脉穿刺部位待酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。秒以上。(2)1%2%碘酊作用碘酊作用60秒或秒或10%碘氟碘氟6090秒,秒,从穿从穿刺点向外画圈消毒刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达至消毒区域直径达3cm以上。以上。(
5、3)70%酒精脱碘:对碘过敏的患者,用酒精脱碘:对碘过敏的患者,用70%酒精消酒精消 毒毒60秒,待酒精挥发干燥后采血。秒,待酒精挥发干燥后采血。现在学习的是第10页,共72页2.采血部位采血部位 通常采血部位为肘静脉。通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时,以肘动脉或股动脉采血为宜。疑似细菌性心内膜炎时,以肘动脉或股动脉采血为宜。对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者,在病灶或者髂前(后)上棘处严对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者,在病灶或者髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培养。作增菌培养。现在学习的是第11页,共72页3.静脉穿刺和培养瓶接种程序静脉穿刺和培养瓶接种程序(
6、1)在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手 套固定静脉,不可接触穿刺点。套固定静脉,不可接触穿刺点。(2)用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入血培养 瓶,或严格按厂商推荐的方法采血。瓶,或严格按厂商推荐的方法采血。(3)血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检,切勿冷藏。立即送检,切勿冷藏。4.采血量采血量 自动化仪器要求成人采血量是自动化仪器要求成人采血量是810 ml/瓶,儿童瓶,儿童15 ml/瓶。瓶。现在学习的是第12页
7、,共72页5.血培养次数和采血时间血培养次数和采血时间只要怀疑血液细菌感染,应即刻采集。只要怀疑血液细菌感染,应即刻采集。采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行,在采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行,在1h内采集内采集23次做血次做血培养。培养。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.51h 采集血液,采集血液,或于寒战或发烧后或于寒战或发烧后1h进行。进行。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者,连续入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3d,每天采,每天采2 份。份。6.标本运送标本运送采血后应该立即送检采血后应该立即送检,如不能立即送
8、检,可室温保存,切勿冷藏。如不能立即送检,可室温保存,切勿冷藏。现在学习的是第13页,共72页二、血液中常见的病原体二、血液中常见的病原体 种种 类类病病 原原 菌菌革革兰兰阳性球菌阳性球菌金黄色葡萄球菌、凝固金黄色葡萄球菌、凝固酶酶阴性葡萄球菌、肺炎阴性葡萄球菌、肺炎链链球菌、化球菌、化脓链脓链球菌、草球菌、草绿绿色色链链球菌、球菌、肠肠球菌球菌革革兰兰阳性杆菌阳性杆菌结结核分枝杆菌、核分枝杆菌、产单产单核李斯特菌、阴道加特核李斯特菌、阴道加特纳纳菌菌革兰阴性球菌革兰阴性球菌脑脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉兰汉菌菌革革兰兰阴性杆菌阴性杆菌大大肠肠埃希菌、埃
9、希菌、铜绿铜绿假假单单胞菌、克雷伯杆菌、胞菌、克雷伯杆菌、肠肠杆菌、杆菌、变变形杆菌、沙雷菌、形杆菌、沙雷菌、沙沙门门菌、不菌、不动动杆菌、嗜肺杆菌、嗜肺军团军团菌、嗜血杆菌菌、嗜血杆菌真菌真菌念球菌、曲霉菌、念球菌、曲霉菌、隐隐球菌、球球菌、球孢孢子菌子菌厌厌氧菌氧菌拟拟杆菌、杆菌、产产气气荚荚膜梭菌膜梭菌现在学习的是第14页,共72页三、临床意义三、临床意义血液感染是一种危重的全身感染,对其进行病原菌的检验,提血液感染是一种危重的全身感染,对其进行病原菌的检验,提供病原学的诊断极为重要。供病原学的诊断极为重要。当少量细菌侵入血液循环,为一过性,不繁殖或很少繁殖,不引当少量细菌侵入血液循环,
10、为一过性,不繁殖或很少繁殖,不引起或仅引起轻微的炎症反应者称为菌血症起或仅引起轻微的炎症反应者称为菌血症,若有全身性炎症反应若有全身性炎症反应的表现称为脓毒症。的表现称为脓毒症。血液标本的细菌培养是诊断菌血症的基本而重要的方法,若从患血液标本的细菌培养是诊断菌血症的基本而重要的方法,若从患者血液中检出细菌,一般视为病原菌感染,提示有菌血症。者血液中检出细菌,一般视为病原菌感染,提示有菌血症。现在学习的是第15页,共72页常见的菌血症或脓毒症有:常见的菌血症或脓毒症有:葡萄球菌菌血症葡萄球菌菌血症 由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及凝固)及凝固酶阴性葡萄球菌引起
11、的菌血症和脓毒症逐年增多,占酶阴性葡萄球菌引起的菌血症和脓毒症逐年增多,占菌血症的菌血症的10%15%,临床表现明显,发病急,中毒症,临床表现明显,发病急,中毒症状重。状重。现在学习的是第16页,共72页肠球菌菌血症肠球菌菌血症 近年来明显增多,约占菌血症的近年来明显增多,约占菌血症的10%。常见泌尿。常见泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者,易并发心内膜炎。生殖道、消化道和腹腔感染的患者,易并发心内膜炎。此菌可对多种抗生素耐药,病情较重。此菌可对多种抗生素耐药,病情较重。现在学习的是第17页,共72页革兰阴性杆菌菌血症革兰阴性杆菌菌血症 主要侵犯危及机体免疫功能低下的患者。常可引主要侵犯危及机
12、体免疫功能低下的患者。常可引起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染。起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染。现在学习的是第18页,共72页厌氧菌菌血症厌氧菌菌血症 厌氧菌常寄居于口腔、肠道和泌尿生殖道,并引起厌氧菌常寄居于口腔、肠道和泌尿生殖道,并引起相应部位的感染。相应部位的感染。真菌血症真菌血症 常由条件致病性真菌引起,有假丝酵母菌、曲常由条件致病性真菌引起,有假丝酵母菌、曲霉菌和毛霉菌等,以白假丝酵母菌最多见,多数伴霉菌和毛霉菌等,以白假丝酵母菌最多见,多数伴有细菌感染。有细菌感染。现在学习的是第19页,共72页第三节第三节 脑脊液脑脊液现在学习的是第20页,共72页一、标本采集一、标本
13、采集采集脑脊液一般用腰椎穿剌术获得,特殊情况可采用小脑延髓池或采集脑脊液一般用腰椎穿剌术获得,特殊情况可采用小脑延髓池或脑室穿刺术。脑室穿刺术。标本采集后要立即送检、化验,一般不能超过标本采集后要立即送检、化验,一般不能超过1小时。小时。腰穿法无菌取脑脊液腰穿法无菌取脑脊液35ml,置无菌管内立即送检。培养脑膜,置无菌管内立即送检。培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时,应将标本置于炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时,应将标本置于35条件条件下保温送检,不可置冰箱保存。但做病毒检查的脑脊液标本下保温送检,不可置冰箱保存。但做病毒检查的脑脊液标本应放置冰块,可在应放置冰块,可在4保存保存72h。
14、现在学习的是第21页,共72页二、脑脊液中常见病原体二、脑脊液中常见病原体 革革兰兰阴性菌阴性菌病毒病毒真菌及其他真菌及其他肺炎肺炎链链球菌球菌脑脑膜炎奈瑟菌膜炎奈瑟菌乙型乙型脑脑炎病毒炎病毒新生新生隐隐球菌球菌B群群链链球菌球菌大大肠肠埃希菌埃希菌柯柯萨萨奇病毒奇病毒A白假白假丝丝酵母菌酵母菌A群群链链球菌球菌铜绿铜绿假假单单胞菌胞菌柯柯萨萨奇病毒奇病毒B钩钩端螺旋体端螺旋体消化消化链链球菌球菌卡他布卡他布兰汉兰汉菌菌脊髓灰脊髓灰质质炎病毒炎病毒结结核分枝杆菌核分枝杆菌拟拟杆菌杆菌新新肠肠道病毒道病毒6871产单产单核核细细胞李斯特菌胞李斯特菌不不动动杆菌杆菌狂犬病毒狂犬病毒炭疽芽胞杆菌炭疽
15、芽胞杆菌葡萄球菌葡萄球菌肺炎克雷白杆菌肺炎克雷白杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌现在学习的是第22页,共72页三、临床意义三、临床意义细菌性脑膜炎:是中枢神经系统感染的常见类型,其中以细菌性脑膜炎:是中枢神经系统感染的常见类型,其中以流行性脑脊髓膜炎为常见,有的呈暴发型,病情严重,病流行性脑脊髓膜炎为常见,有的呈暴发型,病情严重,病死率较高;多发年龄在死率较高;多发年龄在529岁,冬春季多发,可用青霉岁,冬春季多发,可用青霉素类、磺胺类、头孢霉素类抗生素治疗。结核性脑膜炎素类、磺胺类、头孢霉素类抗生素治疗。结核性脑膜炎最常见,近几年呈回升趋势,为防治重点。最常见,近几年呈回升趋势,为防治重点。现在
16、学习的是第23页,共72页真菌性脑膜炎:最常见于隐球菌脑膜炎,其他的真菌性脑真菌性脑膜炎:最常见于隐球菌脑膜炎,其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢子性脑膜炎日渐增多,特别是膜炎如白假丝酵母菌、球孢子性脑膜炎日渐增多,特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易并发,如免疫功能低下和恶性疾病患者易并发,如AIDS、恶性肿、恶性肿瘤,严重糖尿病、瘤,严重糖尿病、SLE等患者易发生。等患者易发生。现在学习的是第24页,共72页流行性乙型脑炎:是一种人兽共患的自然疫源性疾病。流行性乙型脑炎:是一种人兽共患的自然疫源性疾病。传染源为患者和家禽、家畜及野生动物,蚊虫为传播媒传染源为患者和家禽、家畜及野生动物,蚊
17、虫为传播媒介,经蚊虫叮咬、吸血而传播,人群对本病普遍易感,介,经蚊虫叮咬、吸血而传播,人群对本病普遍易感,感染后多数人无症状而成为隐性感染。但可获得持久免感染后多数人无症状而成为隐性感染。但可获得持久免疫力,再次发病者极少见。少数患者病情严重,病死率疫力,再次发病者极少见。少数患者病情严重,病死率高,可留有后遗症。高,可留有后遗症。现在学习的是第25页,共72页肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人们肠道病毒对中枢神经系统的危害性已逐渐引起人们的关注和重视。除原有脊髓灰质炎常见外,还可见的关注和重视。除原有脊髓灰质炎常见外,还可见多种病毒引起脑膜炎或脑炎,还不断发现新的肠道多种病毒引起脑膜
18、炎或脑炎,还不断发现新的肠道病毒(新肠道病毒病毒(新肠道病毒6871型)引起的脑膜炎及脑炎。型)引起的脑膜炎及脑炎。现在学习的是第26页,共72页第四节第四节 脓脓 液液现在学习的是第27页,共72页一、标本采集一、标本采集先清洗,再采集。先清洗,再采集。脓性标本是用针和注射器抽吸采集,如果没有得到抽吸物,脓性标本是用针和注射器抽吸采集,如果没有得到抽吸物,也可以用拭子在伤口深部采集渗出物。也可以用拭子在伤口深部采集渗出物。脓肿标本以无菌注射器抽取为好,也可由排液法取得。脓肿标本以无菌注射器抽取为好,也可由排液法取得。厌氧菌感染的脓液常有腐臭应予注意。特别要注意避免正厌氧菌感染的脓液常有腐臭应
19、予注意。特别要注意避免正常菌群所污染以及由采集至接种前尽量避免接触空气。常菌群所污染以及由采集至接种前尽量避免接触空气。现在学习的是第28页,共72页二、脓液中常见病原体二、脓液中常见病原体 细菌种类细菌种类 革兰阳性菌革兰阳性菌 革兰阴性菌革兰阴性菌 球菌球菌 金黄色葡萄球菌、凝固酶金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、化脓链球阴性葡萄球菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、菌、肺炎链球菌、肠球菌、消化链球菌、四联球菌消化链球菌、四联球菌 肺炎克雷白杆菌、变形杆肺炎克雷白杆菌、变形杆菌、菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌奈瑟菌、卡他布兰汉菌 杆菌杆菌 结核分枝杆菌、非结
20、核分结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌、枝杆菌、破伤风杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌杆菌 大肠埃希菌、铜绿假单胞大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、拟杆菌、流感嗜血杆菌、拟杆菌、菌、梭杆菌梭杆菌 其他其他 放线菌(衣氏放线菌、诺放线菌(衣氏放线菌、诺卡菌)卡菌)现在学习的是第29页,共72页三、临床意义三、临床意义由创伤、手术、侵入性器械操作等外科治疗引起的感染最为常由创伤、手术、侵入性器械操作等外科治疗引起的感染最为常见。细菌造成伤口感染一般认为需每克组织内细菌数量在见。细菌造成伤口感染一般认为需每克组织内细菌数量在105 106个以上。个以上。外伤性创伤感
21、染以葡萄球菌和链球菌多见,且易发生混合感外伤性创伤感染以葡萄球菌和链球菌多见,且易发生混合感染。染。烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染,如铜绿假单胞菌等,次为革烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染,如铜绿假单胞菌等,次为革兰阳性球菌感染,可单独也可混合细菌感染。兰阳性球菌感染,可单独也可混合细菌感染。现在学习的是第30页,共72页急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌、溶血性急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌感染所致。链球菌、淋病奈瑟菌、肺炎链球菌感染所致。放线菌感染可发生在免疫功能下降时或由于拔牙、口腔放线菌感染可发生在免疫功能下降时或由于拔牙、口腔黏膜损伤时。黏
22、膜损伤时。现在学习的是第31页,共72页第五节第五节 痰液痰液现在学习的是第32页,共72页一、标本采集一、标本采集自然咳痰法自然咳痰法 以晨痰为佳,尽可能在用抗菌药物之前采集标本。以晨痰为佳,尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸道深部的痰,将痰液直接吐入无菌、清洁、用力咳出呼吸道深部的痰,将痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中,标本量应干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中,标本量应1ml。现在学习的是第33页,共72页支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌
23、洗法均由临吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集,但必须注意采集标本时尽可床医生按相应操作规程采集,但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。能避免咽喉部正常菌群的污染。现在学习的是第34页,共72页小儿取痰法小儿取痰法 用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳痰用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳痰时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方,以诱发咳痰。叩胸骨柄上方,以诱发咳痰。注意:对可疑烈性呼吸道传染病(如注意:对可疑烈性呼吸道传
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