赖氨酸的生产工艺.ppt
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1、关于赖氨酸的生产工艺现在学习的是第1页,共72页1.1.赖氨酸概述赖氨酸概述 (1)(1)l赖氨酸是人和动物营养的赖氨酸是人和动物营养的必需氨基酸必需氨基酸,它,它对于机体的生长有着重要的影响。对于机体的生长有着重要的影响。l在八种必需氨基酸中,是唯一的仅在八种必需氨基酸中,是唯一的仅L-L-型成型成分才能有效利用的基本氨基酸。分才能有效利用的基本氨基酸。l而在小麦、玉米、稻米等植物蛋白质中缺而在小麦、玉米、稻米等植物蛋白质中缺乏赖氨酸,因此赖氨酸广泛应用于营养食乏赖氨酸,因此赖氨酸广泛应用于营养食品、食品强化剂、饲料及医药等方面。品、食品强化剂、饲料及医药等方面。现在学习的是第2页,共72页
2、1.赖氨酸概述赖氨酸概述(2)l赖赖氨氨酸酸广广泛泛存存在在于于动动物物蛋蛋白白质质中中,赖赖氨氨酸酸的的生生产产最最早早是是用用酸酸水水解解酪酪素素,经经分分离离谷谷氨氨酸酸后后制制得得,其其后后又又从从血血粉粉中中提提取取(猪猪血血粉粉中中赖赖氨氨酸酸含含量量约约9%9%10%10%),但但这这种种方方法法,工艺比较复杂,产量受到限制。工艺比较复杂,产量受到限制。现在学习的是第3页,共72页1.赖氨酸概述赖氨酸概述(3)l1960年年以以来来,日日本本用用营营养养缺缺陷陷型型的的谷谷氨氨酸酸菌菌株株直直接接发发酵酵生生产产赖赖氨氨酸酸,其其产产量量不不断断扩扩大。大。l1977年年,日日本
3、本东东丽丽公公司司以以合合成成的的己己内内酰酰胺胺为原料,用酶法生产为原料,用酶法生产L-赖氨酸。赖氨酸。现在学习的是第4页,共72页1.赖氨酸概述赖氨酸概述(4)l目目前前,国国际际上上赖赖氨氨酸酸产产生生菌菌种种的的生生产产水水平平一一般般为为121214 14 g/Lg/L,对对糖糖的的转转化化率率为为45%45%。采采用用淀淀粉粉水水解解糖糖(或或纯纯糖糖)发发酵酵,其其产产酸酸率率、提提取取率率较较高高;而而采采用用糖糖蜜蜜发发酵酵,其其产产酸率、提取率要低一些。酸率、提取率要低一些。现在学习的是第5页,共72页1.赖氨酸概述赖氨酸概述(5)l采采用用淀淀粉粉水水解解糖糖(或或纯纯糖
4、糖)发发酵酵,其其产产酸酸率率为为9%9%11%11%,提提取取率率为为83%83%87%87%,原原料料消消耗耗3.23.23.5t(3.5t(淀粉淀粉)/t()/t(赖氨酸赖氨酸);现在学习的是第6页,共72页l而而采采用用糖糖蜜蜜(含含糖糖50%)发发酵酵,其其产产酸酸率率7%9%,提提取取率率80%85%,原原料料消消耗耗68t/t。我我国国广广西西赖赖氨氨酸酸厂厂,采采用用甘甘蔗蔗糖糖蜜蜜发发酵酵,菌菌种种产产酸酸率率8.2%,提提取取率率82.4%,接近国际先进水平。接近国际先进水平。现在学习的是第7页,共72页2.2.赖氨酸的性质赖氨酸的性质(1)(1)l赖赖氨氨酸酸盐盐酸酸盐盐
5、的的化化学学式式为为C C6 6H H1414O O2 2N N2 2HClHCl,含氮量为含氮量为15.34%15.34%,相对分子质量,相对分子质量182.65182.65。l由由于于游游离离的的赖赖氨氨酸酸易易吸吸收收空空气气中中的的二二氧氧化化碳碳,故故制制取取结结晶晶比比较较困困难难。一一般般商商品品都都是是赖氨酸盐酸盐的形式。赖氨酸盐酸盐的形式。现在学习的是第8页,共72页2.赖氨酸的性质赖氨酸的性质(2)l赖赖氨氨酸酸的的化化学学名名为为2,6-2,6-二二氨氨基基己己酸酸,具具有有不不对对称称的的-碳碳原原子子,故故有有两两种种光光学学活活性性的的异构体(异构体(L/DL/D型
6、)。型)。现在学习的是第9页,共72页2.赖氨酸的性质赖氨酸的性质(3)l赖赖氨氨酸酸盐盐酸酸盐盐熔熔点点为为263,单单斜斜晶晶系系,比旋光度比旋光度+21。l在在水水中中的的溶溶解解度度为为0时时53.6g/100mL,25时时 为为 89g/100mL,50时时 为为 111.5 g/100 mL,70时为时为142.8 g/100 mL。l在酒精中的溶解度为在酒精中的溶解度为0.1g/100mL。现在学习的是第10页,共72页2.赖氨酸的性质赖氨酸的性质(4)l赖赖氨氨酸酸含含有有-氨氨基基及及-氨氨基基,只只有有在在-氨氨基基为为游游离离状状态态时时,才才能能被被动动物物机机体体所所
7、利利用用,故故具具有有游游离离-氨氨基基的的赖赖氨氨酸酸被被称称为为有有效效赖赖氨氨酸酸。故故在在提提取取浓浓缩缩中中,要要特特别别注注意意防防止止有有效效赖赖氨氨酸酸受受热热破破坏坏而而影影响响其其使用价值。使用价值。现在学习的是第11页,共72页3.赖氨酸生物合成途径赖氨酸生物合成途径l赖赖氨氨酸酸的的生生物物合合成成途途径径与与其其他他氨氨基基酸酸不不同同,依微生物的种类而异。依微生物的种类而异。l细细菌菌的的赖赖氨氨酸酸生生物物合合成成途途径径需需要要经经过过二二氨氨基庚二酸(基庚二酸(DAPDAP)合成赖氨酸;)合成赖氨酸;现在学习的是第12页,共72页3.赖氨酸生物合成途径赖氨酸生
8、物合成途径(续)续)l酵酵母母、霉霉菌菌的的赖赖氨氨酸酸生生物物合合成成途途径径,需需要要经过经过-氨基己二酸氨基己二酸合成赖氨酸。合成赖氨酸。l同同样样是是二二氨氨基基庚庚二二酸酸合合成成赖赖氨氨酸酸途途径径,不不同同的的细细菌菌,赖赖氨氨酸酸的的生生物物合合成成途途径径的的调调节节机制有所不同。机制有所不同。现在学习的是第13页,共72页4赖氨酸的生产发酵赖氨酸的生产发酵l赖赖氨氨酸酸的的发发酵酵生生产产有有直直接接(一一步步)发发酵酵和和两步发酵。两步发酵。l赖赖氨氨酸酸的的直直接接发发酵酵法法可可使使用用黄黄色色短短杆杆菌菌、谷谷氨氨酸酸棒棒杆杆菌菌、乳乳糖糖发发酵酵短短杆杆菌菌、诺诺
9、卡卡杆杆菌菌等等,碳碳源源可可为为葡葡萄萄糖糖、醋醋酸酸、乙乙醇醇和和石石蜡。其转化率和产酸率也有所不同。蜡。其转化率和产酸率也有所不同。现在学习的是第14页,共72页直接发酵法工艺流程现在学习的是第15页,共72页赖氨酸的两步发酵法l先先使使用用大大肠肠杆杆菌菌的的赖赖氨氨酸酸缺缺陷陷型型菌菌株株,因因缺缺少少二二氨氨基基庚庚二二酸酸脱脱羧羧酶酶,不不能能生生成成赖赖氨氨酸酸,于于 是是 积积 累累 大大 量量 的的 二二 氨氨 基基 庚庚 二二 酸酸(DAPDAP)。)。l然然后后再再选选用用含含有有二二氨氨基基庚庚二二酸酸脱脱羧羧酶酶的的产产气气杆杆菌菌或或大大肠肠杆杆菌菌,进进行行酶酶
10、法法脱脱羧羧而而生生成成L-L-赖氨酸。赖氨酸。现在学习的是第16页,共72页4.1L-赖氨酸生产菌种及扩大培养赖氨酸生产菌种及扩大培养直接发酵法生产赖氨酸工艺生产菌种:直接发酵法生产赖氨酸工艺生产菌种:l中中科科院院北北京京微微生生物物研研究究所所选选育育的的北北京京棒棒杆杆菌菌AS1.563AS1.563和和钝钝齿齿棒棒杆杆菌菌PI-3-2(AECPI-3-2(AECr r、HseHse-);AECAEC赖赖氨氨酸酸类类似似物物S-2-S-2-氨氨基乙基基乙基-L-L-半胱氨酸半胱氨酸;Hse;Hse天冬氨酰半醛脱氢酶天冬氨酰半醛脱氢酶l黑龙江轻工研究所选育的黑龙江轻工研究所选育的2411
11、34241134及及179179等。等。现在学习的是第17页,共72页L-赖氨酸生产菌种(续)赖氨酸生产菌种(续)l这这些些菌菌种种产产酸酸水水平平一一般般为为7 78g/L,8g/L,转转化化率率25%25%35%35%,对对我我国国赖赖氨氨酸酸的的生生产产起起了了较较大大的的作作用用。但但产产酸酸率率和和转转化化率率均均较较低低,与与国国外先进水平相比还有较大差距。外先进水平相比还有较大差距。现在学习的是第18页,共72页种子扩大培养l赖赖氨氨酸酸发发酵酵一一般般根根据据接接种种量量及及发发酵酵罐罐规规模模采用二级或三级种子培养。采用二级或三级种子培养。l培培养养条条件件:培培养养温温度度
12、30-3230-32。通通风风比比1:0.2m1:0.2m3 3/(m/(m3 3 min)min),搅搅拌拌转转速速200r/min200r/min。培养时间培养时间 8 811h11h。l根据发酵规模,必要时可采用三级培养。根据发酵规模,必要时可采用三级培养。现在学习的是第19页,共72页4.2赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点l(1)发酵工艺流程)发酵工艺流程现在学习的是第20页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(2)l(2 2)发酵培养基组成)发酵培养基组成 不同菌株,发酵培养基的组成不完全不同菌株,发酵培养基的组成不完全相同,赖氨酸发酵培养基的组
13、成见有关文相同,赖氨酸发酵培养基的组成见有关文献。献。现在学习的是第21页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(3)l(3 3)发酵工艺条件及影响因素)发酵工艺条件及影响因素 温度、温度、pHpH值控制、种龄和接种量、值控制、种龄和接种量、供氧供氧对赖氨酸发酵的影响、生物素对赖氨酸生对赖氨酸发酵的影响、生物素对赖氨酸生物合成的影响、硫酸铵对赖氨酸发酵的影物合成的影响、硫酸铵对赖氨酸发酵的影响。响。现在学习的是第22页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(4)l温度:温度:l幼幼龄龄菌菌对对温温度度敏敏感感,在在发发酵酵前前期期,提提高高温温度度,生生
14、长长代代谢谢加加快快,产产酸酸期期提提前前,但但菌菌体体的的酶酶容容易易失失活活,菌菌体体衰衰老老,赖赖氨氨酸酸产产量量少少。赖赖氨氨酸酸发发酵酵,前前期期控控制制温温度度32 32,中中后后期期30 30。现在学习的是第23页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(5)pHpH值控制值控制 赖氨酸发酵最适赖氨酸发酵最适pH pH 值为值为6.56.57.07.0。控制。控制范围在范围在pH=6.5pH=6.57.5,7.5,在整个发酵过程中,在整个发酵过程中,应尽量保持应尽量保持 pHpH值平稳。值平稳。现在学习的是第24页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺
15、及控制要点(6)l种种龄龄和和接接种种量量一一般般在在采采用用二二级级种种子子扩扩大大培培养养时时,接接种种量量较较少少,约约2%,种种龄龄一一般般为为812h,当当采采用用三三及及种种子子扩扩大大培培养养时时,种种量量较较大大约约10%,种种龄龄一一般般为为68h。总总之,以对数生长期的种子为好。之,以对数生长期的种子为好。现在学习的是第25页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(7)l供供氧氧对对赖赖氨氨酸酸发发酵酵的的影影响响 赖赖氨氨酸酸是是天天冬冬氨氨酸酸族族氨氨基基酸酸,它它的的最最大大生生成成量量是是在在供供氧氧充充足足,细细菌菌呼呼吸吸充充足足条条件件下下
16、实实现现的的。供供氧氧不不足足,细细菌菌呼呼吸吸受受抑抑制制,赖赖氨氨酸酸产产量量降降低低,供供氧氧不不足足只只是是轻轻微微影影响响赖赖氨氨酸酸生生成成。严严重重供氧不足时,产赖氨酸量很少而积累乳酸供氧不足时,产赖氨酸量很少而积累乳酸。现在学习的是第26页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(8)l生生物物素素对对赖赖氨氨酸酸生生物物合合成成的的影影响响在在以以葡葡萄萄糖糖,丙丙酮酮酸酸为为唯唯一一碳碳源源的的情情况况下下,添添加加过过量量生生物物素素(200200500g/L500g/L),赖赖氨氨酸酸积积累累量量显显著著增增加加。因因为为生生物物素素量量增增加加,促促
17、进进了了草草酰酰乙乙酸酸的的合合成成,增增加加了了天天冬冬氨氨酸酸供供给。给。现在学习的是第27页,共72页生物素对赖氨酸生物合成的影响(续)生物素对赖氨酸生物合成的影响(续)l另另一一方方面面,过过量量生生物物素素使使细细胞胞内内合合成成的的谷谷氨氨酸酸对对谷谷氨氨酸酸脱脱氢氢酶酶起起反反馈馈抑抑制制作作用用,抑抑制制谷谷氨氨酸酸的的大大量量合合成成,使使代代谢谢流流转转向向合合成成天冬氨酸的方向进行。天冬氨酸的方向进行。现在学习的是第28页,共72页赖氨酸发酵工艺及控制要点赖氨酸发酵工艺及控制要点(9)(9)l硫硫酸酸铵铵对对赖赖氨氨酸酸发发酵酵的的影影响响硫硫酸酸铵铵对对赖赖氨氨酸酸发发
18、酵酵影影响响很很大大。当当硫硫酸酸铵铵含含量量大大时时菌菌体体生生长长迅迅速速,使使赖赖氨氨酸酸产产量量低低。但但在在无无其其他他铵铵离离子子情情况况下下,用用量量为为4.0%4.0%4.5%4.5%时时赖赖氨酸产量最高。氨酸产量最高。现在学习的是第29页,共72页6.6.赖氨酸的提取和精制赖氨酸的提取和精制l赖氨酸的提炼过程包括:赖氨酸的提炼过程包括:发酵液预处理发酵液预处理 提取提取 精制精制现在学习的是第30页,共72页6.1 6.1 赖氨酸发酵液的主要性质赖氨酸发酵液的主要性质l赖赖氨氨酸酸发发酵酵液液由由于于所所用用的的原原料料、培培养养基基组组成成及及浓浓度度、菌菌种种和和发发酵酵
19、工工艺艺不不同同,其其组组成成也不同,一般由以下四部分组成:也不同,一般由以下四部分组成:氨基酸、菌体、氨基酸、菌体、培养基残留物、培养基残留物、现在学习的是第31页,共72页(1 1)氨基酸)氨基酸l氨基酸氨基酸 l代代谢谢主主产产物物赖赖氨氨酸酸,含含量量为为78g/L;少少量量其其他他氨氨基基酸酸,如如缬缬氨氨酸酸,丙丙氨氨酸酸和和甘甘氨氨酸酸,当当发发酵酵不不正正常常时时含含有有谷谷氨氨酸酸;少少量量有有机机酸酸,特别是发酵工艺控制不好时,含有乳酸。特别是发酵工艺控制不好时,含有乳酸。现在学习的是第32页,共72页(2)菌体)菌体l菌体菌体l一般含量在一般含量在1520g(干重)(干重
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- 赖氨酸 生产工艺
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