生物催化剂的修饰与改造讲稿.ppt

《生物催化剂的修饰与改造讲稿.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生物催化剂的修饰与改造讲稿.ppt（47页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于生物催化剂的修饰与改造第一页，讲稿共四十七页哦 第一节第一节 酶化学修饰及修饰目的酶化学修饰及修饰目的 一、酶化学修饰一、酶化学修饰 1.1.限制酶大规模应用的原因：限制酶大规模应用的原因：1)1)细胞外稳定性差；细胞外稳定性差；2)2)酶活性不够高；酶活性不够高；3)3)具有抗原性。具有抗原性。第二页，讲稿共四十七页哦2.2.改变酶特性有两种主要的方法改变酶特性有两种主要的方法：1)1)通过分子修饰的方法来改变已分离出来的通过分子修饰的方法来改变已分离出来的天然酶的活性。天然酶的活性。2)2)通过基因工程方法改变编码酶分子的基通过基因工程方法改变编码酶分子的基因而达到改造酶的目的。因而达

2、到改造酶的目的。第三页，讲稿共四十七页哦3.3.酶化学修饰的概念酶化学修饰的概念酶的化学修饰（酶的化学修饰（chemical modificationchemical modification）：）：通过化学基团的引入或除去，使蛋白质共价结构发生通过化学基团的引入或除去，使蛋白质共价结构发生改变。改变。酶选择性化学修饰：酶选择性化学修饰：描述肽链侧链基团被化学试剂专一性地修饰。描述肽链侧链基团被化学试剂专一性地修饰。第四页，讲稿共四十七页哦二、酶化学修饰的目的二、酶化学修饰的目的1.1.研究酶的结构与功能的关系。研究酶的结构与功能的关系。（5050年代末）年代末）2.2.人为改变天然酶的某些性

3、质，扩大酶的应用人为改变天然酶的某些性质，扩大酶的应用 范围。范围。（7070年代末之后）年代末之后）1 1）提高酶的生物活性（酶活力）。）提高酶的生物活性（酶活力）。过氧化氢酶用右旋糖酐修饰后，在有机溶剂中的溶解性和酶活性过氧化氢酶用右旋糖酐修饰后，在有机溶剂中的溶解性和酶活性也得到提高，如在三氯乙烷中酶活是天然酶的也得到提高，如在三氯乙烷中酶活是天然酶的200倍，在水溶液中酶活倍，在水溶液中酶活是天然酶的是天然酶的15-20倍。倍。第五页，讲稿共四十七页哦2）增强酶的稳定性（热稳定性）。）增强酶的稳定性（热稳定性）。-胰凝乳蛋白酶表面的氨基修饰成亲水性更强的胰凝乳蛋白酶表面的氨基修饰成亲水

4、性更强的-NHCH2COOH后，该酶抗不可逆热失活的稳定性后，该酶抗不可逆热失活的稳定性在在60可提高可提高1000倍。这种稳定的酶能经受灭菌的倍。这种稳定的酶能经受灭菌的极端条件而不失活。极端条件而不失活。3）消除抗原性（针对特异性反应降低生）消除抗原性（针对特异性反应降低生物识别能力）。物识别能力）。4）产生新的催化能力。）产生新的催化能力。木瓜蛋白酶用黄素共价结合修饰后，蛋白酶变成木瓜蛋白酶用黄素共价结合修饰后，蛋白酶变成氧化还原酶。氧化还原酶。第六页，讲稿共四十七页哦 第二节第二节 酶化学修饰的原理酶化学修饰的原理一、如何增强酶天然构象的稳定性与耐热性一、如何增强酶天然构象的稳定性与耐

5、热性 修饰剂分子存在多个反应基团，可与酶形修饰剂分子存在多个反应基团，可与酶形成多点交联。使酶的天然构象产生成多点交联。使酶的天然构象产生“刚性刚性”结结构。构。二、如何保护酶活性部位与抗抑制剂二、如何保护酶活性部位与抗抑制剂 大分子修饰剂与酶结合后，产生的空间障大分子修饰剂与酶结合后，产生的空间障碍或静电斥力阻挡抑制剂，碍或静电斥力阻挡抑制剂，“遮盖遮盖”了酶的活了酶的活性部位性部位。第七页，讲稿共四十七页哦三、如何维持酶功能结构的完整性与抗蛋白水解酶三、如何维持酶功能结构的完整性与抗蛋白水解酶 酶化学修饰后通过两种途径抗蛋白水解酶：酶化学修饰后通过两种途径抗蛋白水解酶：1.1.大分子修饰剂

6、产生空间障碍阻挡蛋白水解酶接近酶大分子修饰剂产生空间障碍阻挡蛋白水解酶接近酶分子。分子。“遮盖遮盖”酶分子上敏感键免遭破坏。酶分子上敏感键免遭破坏。2.2.酶分子上许多敏感基团交联上修饰剂后，减少了酶分子上许多敏感基团交联上修饰剂后，减少了受蛋白水解酶破坏的可能性。受蛋白水解酶破坏的可能性。第八页，讲稿共四十七页哦四、如何消除酶的抗原性及稳定酶的微环境四、如何消除酶的抗原性及稳定酶的微环境1.1.酶蛋白氨基酸组成的抗原决定簇，与修饰剂形成了酶蛋白氨基酸组成的抗原决定簇，与修饰剂形成了共价键。共价键。破坏了抗原决定簇破坏了抗原决定簇抗原性降低乃至消除抗原性降低乃至消除 “遮盖遮盖”了抗原决定簇了

7、抗原决定簇阻碍抗原、抗体结合阻碍抗原、抗体结合2.2.大分子修饰剂本身是多聚电荷体，能在酶分子表面大分子修饰剂本身是多聚电荷体，能在酶分子表面形成形成“缓冲外壳缓冲外壳”，抵御外界环境的极性变化，维持，抵御外界环境的极性变化，维持酶活性部位微环境相对稳定。酶活性部位微环境相对稳定。第九页，讲稿共四十七页哦 第三节第三节 酶化学修饰的设计酶化学修饰的设计 一、充分认识酶分子的特性一、充分认识酶分子的特性 包括酶的包括酶的 1.1.活性部位情况活性部位情况 2.2.稳定条件及反应最佳条件稳定条件及反应最佳条件 3.3.侧链基团的化学性质及反应活泼性侧链基团的化学性质及反应活泼性第十页，讲稿共四十七

8、页哦二、二、修饰剂的选择修饰剂的选择 要考虑要考虑 1.1.修饰剂的分子量及链的长度（要求有较大的分修饰剂的分子量及链的长度（要求有较大的分子量）子量）2.2.修饰剂上反应基团的数目及位置（要求有较多修饰剂上反应基团的数目及位置（要求有较多的反应活性基团）的反应活性基团）3.3.修饰剂上反应基团的活化方法与条件修饰剂上反应基团的活化方法与条件第十一页，讲稿共四十七页哦三、反应条件的选择三、反应条件的选择 要注意要注意 1.1.酶与修饰剂的分子比例酶与修饰剂的分子比例 2.2.反应体系的溶剂性质、盐浓度、反应体系的溶剂性质、盐浓度、pHpH条件条件 3.3.反应温度及时间反应温度及时间第十二页，

9、讲稿共四十七页哦第四节第四节 酶化学修饰的种类及应用酶化学修饰的种类及应用 一、酶的表面化学修饰一、酶的表面化学修饰 （一）大分子修饰（大分子结合修饰）（一）大分子修饰（大分子结合修饰）是目前应用最广的酶分子修饰方法。是目前应用最广的酶分子修饰方法。1.1.定义：定义：利用利用水溶性水溶性大分子与酶结合，使酶的空间大分子与酶结合，使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性与结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性与功能的方法。功能的方法。第十三页，讲稿共四十七页哦2.2.修饰剂：修饰剂：聚乙二醇（聚乙二醇（PEGPEG）、右旋糖酐（）、右旋糖酐（dextrandextran）、肝素）、

10、肝素（heparinheparin）、蔗糖聚合物（）、蔗糖聚合物（FicollFicoll）等。）等。修饰方法：修饰前活化，然后在一定条件下与酶修饰方法：修饰前活化，然后在一定条件下与酶分子共价结合。分子共价结合。第十四页，讲稿共四十七页哦3.3.应用：应用：如：如：PEGPEG超氧化物歧化酶（超氧化物歧化酶（SODSOD）PEGPEG人血红蛋白人血红蛋白 PEGPEG天门冬酰胺酶（天门冬酰胺酶（ASNaseASNase）降低了抗原性降低了抗原性 延长了酶在体内的半衰期延长了酶在体内的半衰期又如：用又如：用DextranDextran修饰修饰-淀粉酶，淀粉酶，淀粉酶，胰蛋淀粉酶，胰蛋白酶、过氧

11、化氢酶，白酶、过氧化氢酶，提高了酶的热稳定性。提高了酶的热稳定性。第十五页，讲稿共四十七页哦（二）小分子修饰（二）小分子修饰 （酶蛋白侧链基团修饰）（酶蛋白侧链基团修饰）定义：定义：采用小分子试剂使酶分子侧链上特定的功能采用小分子试剂使酶分子侧链上特定的功能基团发生化学反应。基团发生化学反应。侧链基团：侧链基团：组成蛋白质氨基酸残基上的功能团。主组成蛋白质氨基酸残基上的功能团。主要有：要有：氨基、羧基、胍基、巯基、酚基、咪唑基。氨基、羧基、胍基、巯基、酚基、咪唑基。侧链基团修饰剂：侧链基团修饰剂：采用的各种小分子化合物。采用的各种小分子化合物。2020种不同氨基酸的侧链基团中只有极性氨基酸的侧

12、种不同氨基酸的侧链基团中只有极性氨基酸的侧链易被修饰，它们一般具有亲核性。链易被修饰，它们一般具有亲核性。第十六页，讲稿共四十七页哦根据氨基酸侧链根据氨基酸侧链R R基的极性，基的极性，2020种氨基酸可分成种氨基酸可分成4 4类类。1.1.非极性非极性R R基氨基酸基氨基酸（共（共8 8种）：种）：丙氨酸丙氨酸(Alanine,Ala,A),(Alanine,Ala,A),亮氨酸亮氨酸(Leucine,Leu,L),(Leucine,Leu,L),缬氨酸缬氨酸(Valine,Val,V),(Valine,Val,V),异亮氨酸异亮氨酸(Isoleucine,Ile,I),(Isoleucin

13、e,Ile,I),苯丙氨酸苯丙氨酸(Phenylalanine,Phe,F),(Phenylalanine,Phe,F),色氨酸色氨酸(Tryptophan,Trp,W),(Tryptophan,Trp,W),甲硫氨酸甲硫氨酸(Methionine,Met,M),(Methionine,Met,M),脯氨酸脯氨酸(Proline,Pro,P)(Proline,Pro,P)第十七页，讲稿共四十七页哦2.2.无电荷的极性无电荷的极性R R基氨基酸基氨基酸（共（共7 7种）：种）：丝氨酸丝氨酸(Serine,Ser,S),(Serine,Ser,S),苏氨酸苏氨酸(Threonine,Thr,T),

14、(Threonine,Thr,T),酪氨酸酪氨酸(Tyrosine,Tyr,Y),(Tyrosine,Tyr,Y),半胱氨酸半胱氨酸(Cysteine,Cys,C),(Cysteine,Cys,C),天冬酰胺天冬酰胺(Asparagine,Asn,N),(Asparagine,Asn,N),甘氨酸甘氨酸(Glycine,Gly,G),(Glycine,Gly,G),谷氨酰胺谷氨酰胺(Glutamine,Gln,Q)(Glutamine,Gln,Q)3.3.带正电荷的极性带正电荷的极性R R基氨基酸基氨基酸（共（共3 3种）：种）：赖氨酸赖氨酸(Lysine,Lys,K),(Lysine,Lys

15、,K),精氨酸精氨酸(Arginine,Arg,R),(Arginine,Arg,R),组氨酸组氨酸(Histidine,His,H)(Histidine,His,H)4.4.带负电荷的极性带负电荷的极性R R基氨基酸基氨基酸（共（共2 2种）：种）：天冬氨酸天冬氨酸(Aspartic acid,Asp,D),(Aspartic acid,Asp,D),谷氨酸谷氨酸(Glutamic acid,Glu,E)(Glutamic acid,Glu,E)第十八页，讲稿共四十七页哦几种重要的修饰反应：几种重要的修饰反应：烷基化反应烷基化反应酰化反应酰化反应氧化还原反应氧化还原反应芳香环取代反应芳香环取

16、代反应第十九页，讲稿共四十七页哦1.1.化学修饰反应的类型化学修饰反应的类型 1)1)烷基化反应烷基化反应试试剂剂特特点点：烷烷基基上上带带活活泼泼卤卤素素，导导致致酶酶分分子子的的亲亲核核基基团团（如（如NHNH2 2，-SH-SH等）发生烷基化。等）发生烷基化。可作用基团：可作用基团：氨氨基基（LysLys，ArgArg），巯巯基基（CysCys），羧羧基基（AspAsp、GluGlu），甲甲硫基（硫基（MetMet），咪唑基（），咪唑基（HisHis）。）。修饰剂：修饰剂：2 2，4 4二硝基氟苯、碘乙酸、碘乙酰胺等。二硝基氟苯、碘乙酸、碘乙酰胺等。第二十页，讲稿共四十七页哦烷基化反应第

17、二十一页，讲稿共四十七页哦 2)2)酰基化反应酰基化反应试剂特点：试剂特点：含含有有 结结构构，作作用用于于侧侧链链基基团团上上的的亲亲核基团，使之酰基化。核基团，使之酰基化。可作用基团：可作用基团：氨氨基基，巯巯基基，醇醇羟羟基基（SerSer、ThrThr），酚酚羟羟基基（TyrTyr）第二十二页，讲稿共四十七页哦酰基化反应 第二十三页，讲稿共四十七页哦 3)3)氧化和还原反应氧化和还原反应试剂特点：试剂特点：具有氧化性或还原性。具有氧化性或还原性。氧化剂：氧化剂：H2O2，N-溴代琥珀酰亚胺溴代琥珀酰亚胺可可被被氧氧化化的的侧侧链链基基团团：巯巯基基，甲甲硫硫基基，吲吲哚哚基基（Trp）

18、、咪咪唑唑基，酚基等。基，酚基等。还原剂：还原剂：2巯基乙醇、巯基乙醇、DTT等。等。可被还原的侧链基团：可被还原的侧链基团：二硫键。二硫键。第二十四页，讲稿共四十七页哦连四硫酸盐氧化巯基，连四硫酸盐氧化巯基，DTTDTT还原逆回，用于保护巯基。还原逆回，用于保护巯基。第二十五页，讲稿共四十七页哦 4)4)芳香环取代反应芳香环取代反应试剂：卤（碘）化，硝化试剂。试剂：卤（碘）化，硝化试剂。碘代：碘代：I2+HI 硝化：硝化：(NO2)4C+(NO2)3CH（四硝基甲烷）（四硝基甲烷）第二十六页，讲稿共四十七页哦2.2.特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰1)1)氨基

19、的化学修饰：氨基的化学修饰：来源：来源：Lys,Arg,His,GlnLys,Arg,His,Gln修饰反应：修饰反应：酰基化与烷基化酰基化与烷基化酰基化酰基化修饰剂修饰剂:三硝基苯磺酸（三硝基苯磺酸（TNBSTNBS）、丹磺酰氯（）、丹磺酰氯（DNSDNS）烷基化烷基化修饰剂修饰剂：2 2，4 4二硝基氟苯（二硝基氟苯（DNFBDNFB）、碘乙酸、碘乙酰胺、）、碘乙酸、碘乙酰胺、亚硝酸等亚硝酸等第二十七页，讲稿共四十七页哦第二十八页，讲稿共四十七页哦 2)2)羧基的化学修饰羧基的化学修饰修饰羧基的反应专一性较差。修饰羧基的反应专一性较差。常用常用水溶性碳化二亚胺水溶性碳化二亚胺修饰天冬氨酸和

20、谷氨酸。可修饰天冬氨酸和谷氨酸。可定量测定酶分子中羧基的数目。定量测定酶分子中羧基的数目。+水溶性碳化二亚胺水溶性碳化二亚胺第二十九页，讲稿共四十七页哦3)3)胍基的化学修饰胍基的化学修饰来源：来源：ArgArg修饰反应：修饰反应：本质上是本质上是羰基羰基对对氨基氨基酰基化酰基化。修饰剂：修饰剂：丁二酮丁二酮 二羰基化合物二羰基化合物 1 1，2 2环己二酮环己二酮 苯乙二醛苯乙二醛第三十页，讲稿共四十七页哦第三十一页，讲稿共四十七页哦4)4)巯基的化学修饰巯基的化学修饰 来源：来源：CysCys 修饰反应修饰反应:烷基化烷基化 修饰剂：修饰剂：碘乙酸碘乙酸(IAA)(IAA)碘乙酰胺碘乙酰胺

21、(IAM)(IAM)E-SH+R-XE-SR+HXN-N-乙基马来酰亚胺（乙基马来酰亚胺（NEMNEM）（常用的专一修饰巯基试剂）（常用的专一修饰巯基试剂）ESH第三十二页，讲稿共四十七页哦5)5)二硫键的化学修饰二硫键的化学修饰还原：还原：巯基乙醇、二硫苏糖醇（巯基乙醇、二硫苏糖醇（DTTDTT）第三十三页，讲稿共四十七页哦氧化：氧化：过甲酸过甲酸:Performicacid第三十四页，讲稿共四十七页哦 6)6)咪唑基的化学修饰咪唑基的化学修饰 来源：来源：HisHis 修饰反应修饰反应:酰基化与酰基化与烷基化烷基化 酰基化酰基化修饰剂修饰剂:常用焦碳酸二乙酯（常用焦碳酸二乙酯（diethy

22、l paracarbonatediethyl paracarbonate）+C2H5OH+CO2 烷基化烷基化修饰剂：修饰剂：碘乙酸碘乙酸+ICH2COOH+HI第三十五页，讲稿共四十七页哦7 7）酚羟基的化学修饰）酚羟基的化学修饰来源：来源：TyrTyr修饰反应：修饰反应：芳香环取代反应芳香环取代反应修饰剂：修饰剂：碘、硝化试剂（四硝基甲烷）碘、硝化试剂（四硝基甲烷）第三十六页，讲稿共四十七页哦8 8）吲哚基的化学修饰）吲哚基的化学修饰 来源：来源：TrpTrp 修饰反应：修饰反应：氧化反应氧化反应 修饰剂：修饰剂：N-N-溴代琥珀酰亚胺溴代琥珀酰亚胺 2-2-羟基羟基-5-5硝基苄溴硝基苄

23、溴第三十七页，讲稿共四十七页哦氨基酸氨基酸侧链基团侧链基团修饰剂修饰剂LysLys氨基氨基三硝基苯磺酸、丹磺酰氯；三硝基苯磺酸、丹磺酰氯；2 2，4 4二硝基二硝基氟苯、碘乙酸、碘乙酰胺、亚硝酸氟苯、碘乙酸、碘乙酰胺、亚硝酸AspAsp、GluGlu羧基羧基水溶性碳化二亚胺水溶性碳化二亚胺ArgArg胍基胍基苯乙二醛，苯乙二醛，1,21,2环己二酮、丁二酮环己二酮、丁二酮CysCys巯基巯基碘乙酸、碘乙酰胺、碘乙酸、碘乙酰胺、N-N-乙基马来酰亚胺乙基马来酰亚胺二硫键二硫键巯基乙醇、巯基乙醇、DTTDTTHisHis咪唑基咪唑基焦碳酸二乙酯、碘乙酸焦碳酸二乙酯、碘乙酸TyrTyr酚羟基酚羟基碘

24、、四硝基甲烷碘、四硝基甲烷TrpTrp吲哚基吲哚基N-N-溴代琥珀酰亚胺溴代琥珀酰亚胺 各种氨基酸侧链的修饰剂各种氨基酸侧链的修饰剂第三十八页，讲稿共四十七页哦 但解释修饰效果须十分小心，因为：但解释修饰效果须十分小心，因为：任何一种修饰剂不是绝对专一的。任何一种修饰剂不是绝对专一的。有些修饰剂引起蛋白质构象变化有些修饰剂引起蛋白质构象变化失活，失活，不不一定是活性中心基团被共价修饰。一定是活性中心基团被共价修饰。不同部分的相同基团，修饰效果不同，分子内不同部分的相同基团，修饰效果不同，分子内部的必需基团，不易被修饰。部的必需基团，不易被修饰。第三十九页，讲稿共四十七页哦蛋白质化学修饰的局限性

25、蛋白质化学修饰的局限性化学修饰的专一性是相对的；化学修饰的专一性是相对的；酶的构象有些改变；酶的构象有些改变；化学修饰只能在具有极性的氨基酸残基化学修饰只能在具有极性的氨基酸残基侧链上进行侧链上进行。第四十页，讲稿共四十七页哦（三）交联修饰（三）交联修饰（交联法）（交联法）用双功能基团试剂用双功能基团试剂(如戊二醛如戊二醛)，与酶分子内不同，与酶分子内不同肽链部分共价交联，使酶分子空间构象更加稳定。肽链部分共价交联，使酶分子空间构象更加稳定。分子间交联、分子内交联分子间交联、分子内交联（四）固定化修饰（四）固定化修饰（共价偶联法）（共价偶联法）通过酶表面的酸性或碱性残基，将酶共价连接到惰通过酶

26、表面的酸性或碱性残基，将酶共价连接到惰性载体上，由于酶所处的微环境发生改变，使酶的最适性载体上，由于酶所处的微环境发生改变，使酶的最适pHpH、最适温度和稳定性发生改变。、最适温度和稳定性发生改变。第四十一页，讲稿共四十七页哦二、酶分子内部修饰二、酶分子内部修饰（一）蛋白主链修饰（肽链有限水解修饰）（一）蛋白主链修饰（肽链有限水解修饰）蛋白主链修饰采用酶法（用专一性较强的蛋白蛋白主链修饰采用酶法（用专一性较强的蛋白酶或肽酶为修饰剂）。酶或肽酶为修饰剂）。（与前面化学修饰区别）（与前面化学修饰区别）第四十二页，讲稿共四十七页哦 酶蛋白的肽链被水解后，可能出现以下三种情况中的一酶蛋白的肽链被水解后

27、，可能出现以下三种情况中的一种：种：1 1 引起酶活性中心的破坏，酶失去催化功能。引起酶活性中心的破坏，酶失去催化功能。2 2 仍维持活性中心的完整构象，保持酶活力。仍维持活性中心的完整构象，保持酶活力。3 3 有利于活性中心与底物结合并形成准确的催化部位，有利于活性中心与底物结合并形成准确的催化部位，酶活力提高。酶活力提高。后两种情况，肽链的水解在限定的肽键上进行，称后两种情况，肽链的水解在限定的肽键上进行，称肽链有限水解。肽链有限水解。第四十三页，讲稿共四十七页哦应用实例：应用实例：1 1）提高酶活力：）提高酶活力：天冬氨酸酶用胰蛋白酶进行有限水解，从其羧基末端水解天冬氨酸酶用胰蛋白酶进行

28、有限水解，从其羧基末端水解切除切除10多个氨基酸残基，可使天冬氨酸酶的活力提高多个氨基酸残基，可使天冬氨酸酶的活力提高4-5倍以上。倍以上。2 2）消除抗原性：）消除抗原性：木瓜蛋白酶用氨肽酶进行水解，使其全部肽的木瓜蛋白酶用氨肽酶进行水解，使其全部肽的2/3被去除，该被去除，该酶的活力保持不变，而其抗原性却大大降低。酶的活力保持不变，而其抗原性却大大降低。第四十四页，讲稿共四十七页哦（二）氨基酸置换修饰（二）氨基酸置换修饰 将肽链上的某一个氨基酸换成另一个氨基酸，引起酶蛋白将肽链上的某一个氨基酸换成另一个氨基酸，引起酶蛋白空间构象的改变，从而改变酶的某些特性和功能的方法。空间构象的改变，从而

29、改变酶的某些特性和功能的方法。（三）金属离子置换修饰（三）金属离子置换修饰 通过改变酶分子中所含的金属离子，使酶的特性和功通过改变酶分子中所含的金属离子，使酶的特性和功能发生改变的方法。能发生改变的方法。第四十五页，讲稿共四十七页哦氨基酸酰化酶活性部位中的锌被钴取代时，酶的氨基酸酰化酶活性部位中的锌被钴取代时，酶的底物专一性和最适底物专一性和最适pH值都发生改变：锌酶对值都发生改变：锌酶对N-氯氯-乙酰丙氨酸的最适乙酰丙氨酸的最适pH为为8.5，而钴酶的最适，而钴酶的最适pH是是7.0；钴酶对；钴酶对N-氯氯-乙酰丙氨酸水解活力增强，而乙酰丙氨酸水解活力增强，而对对N-氯氯-乙酰蛋氨酸的活力降低。乙酰蛋氨酸的活力降低。天然含铁超氧化物歧化酶的铁被锰取代，酶的稳天然含铁超氧化物歧化酶的铁被锰取代，酶的稳定性和抑制作用发生显著变化，含锰酶对过氧化定性和抑制作用发生显著变化，含锰酶对过氧化氢的稳定性增强，对氢的稳定性增强，对NaN3抑制作用敏感性降低。抑制作用敏感性降低。第四十六页，讲稿共四十七页哦感谢大家观看第四十七页，讲稿共四十七页哦