第二节基因工程及其应用ppt.ppt
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1、第二节基因工程及其应用ppt现在学习的是第1页,共52页什么是基因工程什么是基因工程?基因工程的原理是什么基因工程的原理是什么?本课聚焦:现在学习的是第2页,共52页豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮资料一:目前,资料一:目前,全球的氮肥生产全球的氮肥生产耗费世界总电力耗费世界总电力的的3%-4%,且,且农作物只能吸农作物只能吸收氮肥的收氮肥的1/10,造成了大面积土造成了大面积土壤和水质的污染。壤和水质的污染。资料分析引入资料分析引入现在学习的是第3页,共52页蜘蛛能够吐出蛛丝蜘蛛能够吐出蛛丝资料二:蛛丝是自然资料二:蛛丝是自然界最奇特的物质之一,界最奇特的物质
2、之一,它具有极强的韧度,它具有极强的韧度,其韧度是同样直径钢其韧度是同样直径钢材的好几倍。但与家材的好几倍。但与家蚕不同,蜘蛛不能家蚕不同,蜘蛛不能家养,因为它们会互相养,因为它们会互相吞食,所以不可能建吞食,所以不可能建立人工饲养蜘蛛的农立人工饲养蜘蛛的农场。场。30多年来,多年来,科科学家们一直试图找到学家们一直试图找到利用其他生物体来制利用其他生物体来制造蛛丝造蛛丝的办法。的办法。现在学习的是第4页,共52页资料三资料三(问题探讨问题探讨)以往,治疗糖尿病以往,治疗糖尿病的胰岛素是从动物的胰岛素是从动物胰腺中提取的,从胰腺中提取的,从100千克猪、牛等动千克猪、牛等动物的胰腺只能提取物的
3、胰腺只能提取34克胰岛素,治疗克胰岛素,治疗一个患者需宰杀一个患者需宰杀4050头牛,这种药物头牛,这种药物的造价就可想而知的造价就可想而知了。了。微生物可以微生物可以有分泌产物,且有分泌产物,且微生物繁殖速率快微生物繁殖速率快现在学习的是第5页,共52页设想一设想一能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮?能否让细菌能否让细菌“吐出吐出”蛛丝?蛛丝?设想二设想二能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等能否让微
4、生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物?珍贵的药物?珍贵的药物?珍贵的药物?设想三设想三经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术基因工程。现在学习的是第6页,共52页思考:思考:1、为什么能把一种生物的基因、为什么能把一种生物的基因“嫁接嫁接”到另一种生到另一种生物上?物上?2、推测这种、推测这种“嫁接嫁接”怎样能实现?怎样能实现?3、这种、这种“嫁接嫁接”对品种的改良有什么意义?对品种的改良有什么意义?现在学习的是第7页,共52页一基因工程的原理一基因工程的原理(一)概念:(一)概念:又叫做基因拼接技术或又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。重组技术。通俗的说,
5、通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。,定向地改造生物的遗传性状。操作水平(对象):操作水平(对象):DNA分子(基因)分子(基因)操作环境:操作环境:生物生物体外体外工程原理(实质):工程原理(实质):基因重组基因重组优点:优点:目的性强目的性强,育种周期短;,育种周期短;克服了远缘杂交不亲和的障碍。克服了远缘杂交不亲和的障碍。结结果:果:受体细胞受体细胞获得新性状获得新性状现在学习的是第8页,共52页(二)基因操
6、作的工具(二)基因操作的工具(3 3种)种)1.1.基因的基因的“剪刀剪刀”限制性内切酶(限制酶)限制性内切酶(限制酶)特点?特点?一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割序列,并在特定的切点上切割DNADNA分子。分子。专一性专一性如如:EcoRI限制酶限制酶现在学习的是第9页,共52页限制性内切酶限制性内切酶(EcoREcoR)作用过作用过程程点击播放点击播放现在学习的是第10页,共52页被同一种限制酶切断的几个被同一种限制酶切断的几个DNADNA是否具有是否具有相同的相同的黏性末端?黏性末端?思考?思考?是。因为具专一性!是。因为具专
7、一性!现在学习的是第11页,共52页GAATTCCGTAGAATTCGGATTCTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAACTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG现在学习的是第12页,共52页1实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别内分离出来,这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别分子的顺序,切点在和之间,这是利用了分子的顺序,切点
8、在和之间,这是利用了酶的()酶的()高效性专一性高效性专一性多样性催化活性易受外界影响多样性催化活性易受外界影响现在学习的是第13页,共52页、基因的针线、基因的针线DNADNA连接酶连接酶连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接酶的作用是:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的连接起来,使之成为一个完整的DNADNA分子。分子。现在学习的是第14页,共52页DNA连接酶的作用过程连接酶的作用过程点击播放点击播放现在学习的是第15页,共52页基因的针线:基因的针线:DNA连接酶连接酶G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C
9、 T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割DNA连接酶连接连接酶连接的是的是DNA骨架上的骨架上的缺口,缺口,不是不是碱基间碱基间的氢键的氢键现在学习的是第16页,共52页3 3、基因的运输工具、基因的运输工具运载体运载体 常常用用的的运运载载体体:质质粒粒、噬噬菌菌体体和和动动植物病毒等植物病毒等标记基标记基因,便因,便于进行于进行检测。检测。质粒存在于许质粒存在于许多细菌和酵母菌等多细菌和酵母菌等生物中生物中,是细胞染是细胞染色体外能够自主复色体外能够自主复制的很小的环
10、状制的很小的环状DNADNA分子分子.现在学习的是第17页,共52页运载体必须同时满足三运载体必须同时满足三个要求:个要求:具有一到多个限制酶的酶具有一到多个限制酶的酶切位点切位点,以便与外源基因连以便与外源基因连接接;能进入受体细胞并在受体能进入受体细胞并在受体细胞内稳定存在并能复制、细胞内稳定存在并能复制、表达(表达(小型环状小型环状)具有具有标记(志)基因标记(志)基因,便便于目的基因的找到于目的基因的找到现在学习的是第18页,共52页(三)基因工程基本步骤(三)基因工程基本步骤(图图6-66-6)1 1、获取目的基因、获取目的基因(剪切)剪切)现在学习的是第19页,共52页提取目的基因
11、的方法(提取目的基因的方法(工具呢?工具呢?)用限制酶切用限制酶切断成许多片段断成许多片段直接分离基因直接分离基因鸟枪法鸟枪法将供体生物将供体生物(原核生物原核生物)的)的DNADNA用限制酶切割为许多片段,再用运载用限制酶切割为许多片段,再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达,基因工需要的目的基因并得以表达,基因工程就算成功了。程就算成功了。该法最大的缺点是该法最大的缺点是带有很大的盲带有很大的盲目性,工作量大,成功率低。目性,工作量大,成功率低。且不且不能将真核生物的基
12、因转移到原核生能将真核生物的基因转移到原核生物中去。物中去。现在学习的是第20页,共52页人工合成基因法:人工合成基因法:真核生物的基因真核生物的基因DNADNA合成仪合成仪现在学习的是第21页,共52页用与提取目的基因用与提取目的基因相同的相同的限制酶限制酶切割质粒使切割质粒使之出现一个切口,将目的之出现一个切口,将目的基因插入切口处,让目的基因插入切口处,让目的基因的黏性末端与切口上基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后,的黏性末端互补配对后,在在DNADNA连接酶连接酶的作用下连接的作用下连接形成重组形成重组DNADNA分子。分子。2 2、目的基因与运载体、目的基因与运载体结合结合现
13、在学习的是第22页,共52页2要使目的基因与对应的载体重组,所需的两要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是种酶是()限制酶限制酶DNA连接酶连接酶解旋酶解旋酶还原酶还原酶现在学习的是第23页,共52页3、将目的基因、将目的基因导入导入受体细胞受体细胞导入导入扩增扩增常用的受体细胞:常用的受体细胞:菌类菌类和和动植物细动植物细胞胞怎样导入?怎样导入?借助借助细菌或病毒细菌或病毒侵染细胞侵染细胞的途径的途径现在学习的是第24页,共52页3采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是()法正确的是()将毒素蛋白注射到棉受精卵中将
14、毒素蛋白注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的序列,注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的序列,注射到棉受精卵中将编码毒素蛋白的序列,与质粒重组,导入将编码毒素蛋白的序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,在进行组织培养细菌,用该细菌感染棉的体细胞,在进行组织培养将编码毒素蛋白的序列,与细菌质粒重组,将编码毒素蛋白的序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵中注射到棉的子房并进入受精卵中现在学习的是第25页,共52页4、目的基因的检测、目的基因的检测和和表达表达大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少,必须
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- 第二 基因工程 及其 应用 ppt
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