蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌标本制备.ppt

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1、蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌标本制备现在学习的是第1页，共26页刺激和兴奋刺激刺激stimulationstimulation：指细胞所处环境因素：指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就的变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就必须达到一定的刺激量。必须达到一定的刺激量。刺激刺激强度强度刺激持刺激持续时间续时间刺激强度刺激强度/时时间变化率间变化率刺激量刺激量【实验原理实验原理】现在学习的是第2页，共26页刺激和兴奋刺激刺激stimulationstimulation：指细胞所处环境因素的：指细胞所处环境因素的变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就必须变化。刺激要能使细胞发生兴奋，就必须达到一定的刺

2、激量。达到一定的刺激量。刺激刺激强度强度刺激持刺激持续时间续时间刺激强度刺激强度/时时间变化率间变化率刺激量刺激量现在学习的是第3页，共26页n n阈强度能引起组织发生反应的最小刺激强阈强度能引起组织发生反应的最小刺激强度，又称为阈值。具有阈强度的刺激称为度，又称为阈值。具有阈强度的刺激称为阈刺激（阈刺激（threshold stimulusthreshold stimulus）。）。阈刺激阈刺激阈下刺激阈下刺激阈上刺激阈上刺激有效刺激有效刺激1.刺激强度与肌肉收缩反应现在学习的是第4页，共26页一条骨骼肌纤维一条骨骼肌纤维“全或无全或无”(all-or-none)达到阈值达到阈值肌纤维收缩肌

3、纤维收缩超过阈值超过阈值收缩力不增加收缩力不增加一块骨骼肌一块骨骼肌一定范围内，肌肉收缩力一定范围内，肌肉收缩力的大小与刺激强度成正比的大小与刺激强度成正比阈下刺激阈下刺激无兴奋收缩无兴奋收缩阈刺激阈刺激少数兴奋性最高的肌少数兴奋性最高的肌纤维产生收缩纤维产生收缩刺激强度刺激强度 肌纤维被兴奋肌纤维被兴奋数量数量，肌肉收缩力，肌肉收缩力最适强度最适强度所有的肌纤维均所有的肌纤维均兴奋，肌肉收缩最大兴奋，肌肉收缩最大最适强度最适强度 收缩力不增加收缩力不增加现在学习的是第5页，共26页n n单收缩单收缩twitchtwitch：骨骼肌受到：骨骼肌受到一次短促有效一次短促有效刺激时刺激时,可发生可

4、发生一次动作电位一次动作电位,随后出现一次随后出现一次收缩和舒张。收缩和舒张。2.刺激频率与肌肉收缩反应现在学习的是第6页，共26页动作电位时动作电位时程程(相当于绝相当于绝对不应期对不应期)仅仅12毫秒毫秒骨骼肌可在机械收缩过程中接骨骼肌可在机械收缩过程中接受新刺激发生新的兴奋和收缩受新刺激发生新的兴奋和收缩收缩过收缩过程可达程可达几十几百几十几百毫秒毫秒现在学习的是第7页，共26页n两个阈上刺激，相继作用于神经两个阈上刺激，相继作用于神经-肌肉标本，如果刺激间隔大于单肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；离的单收缩；现在学习的是第8

5、页，共26页n n较高频率连续刺激作用于标本时，出现较高频率连续刺激作用于标本时，出现多个收缩反应的融合，新收缩过程与上多个收缩反应的融合，新收缩过程与上次尚未结束的收缩过程发生总和，称为次尚未结束的收缩过程发生总和，称为强直收缩强直收缩tetanus（复合收缩）。（复合收缩）。n n后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩称为不完全强直收缩incomplete tetanus。n n后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉处于持续的各自的收缩完全融合，肌肉处于持续的收缩状态，称为完全强直收缩收缩

6、状态，称为完全强直收缩complete tetanus。现在学习的是第9页，共26页现在学习的是第10页，共26页现在学习的是第11页，共26页在生理条件下，支配骨骼肌的传出神经总在生理条件下，支配骨骼肌的传出神经总是发出连续的冲动，所以骨骼肌的收缩是发出连续的冲动，所以骨骼肌的收缩都是强直收缩；都是强直收缩；静息状态下，中枢神经也经常发放低频率静息状态下，中枢神经也经常发放低频率神经冲动至骨骼肌，产生一定程度的强神经冲动至骨骼肌，产生一定程度的强直收缩，称为直收缩，称为肌紧张肌紧张(muscle tone)。现在学习的是第12页，共26页实验药品与器材实验药品与器材：蛙手术器械，电刺激器，生

7、物医学信号采集系统，张力换能器，任氏液等。实验对象（subject）：蟾蜍蟾蜍现在学习的是第13页，共26页眼科剪：仅用于血管、神经仅用于血管、神经组织剪：软组织软组织粗剪刀：骨骼、肌肉：骨骼、肌肉现在学习的是第14页，共26页实验步骤实验步骤：.破坏脑和脊髓 持蛙持蛙现在学习的是第15页，共26页 (2)枕骨大孔的判断(3)破坏完全的标准枕骨大孔（Occipital foramen)现在学习的是第16页，共26页2.剪除躯干上部和内脏(1)(2)(3)现在学习的是第17页，共26页3.剥去皮肤将标本放在盛有任氏液的培养皿中 现在学习的是第18页，共26页4.洗净双手和用过的手术器械,再进行下

8、列操作5.分离两腿将标本放在盛有任氏液的培养皿中 现在学习的是第19页，共26页7.用玻璃分针游离坐骨神经6.将标本固定在蛙板上 腹面腹面向上向上现在学习的是第20页，共26页8.剪断股骨,膝关节处所有的肌腱(1)(2)现在学习的是第21页，共26页9.检查标本的兴奋性Tested tissueZnCu+Ringers solution现在学习的是第22页，共26页RM-6240采集和处理系统采集和处理系统（data acquisition and analysis system）计算机计算机（computer）张力换能器张力换能器（transducer）屏蔽盒屏蔽盒（Faraday box）

9、坐骨神经腓肠肌标本坐骨神经腓肠肌标本（preparation）10、线路连接（cable connection）现在学习的是第23页，共26页10.实验装置连接实验装置连接n n将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与桌面垂直）。桌面垂直）。桌面垂直）。桌面垂直）。n n把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激电极把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激

10、电极把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激电极把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激电极接触良好。接触良好。接触良好。接触良好。n n换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。n n启动生物信号采集系统软件，启动生物信号采集系统软件，启动生物信号采集系统软件，启动生物信号采集系统软件，选择好通道和采样参数设置，选择好通道和采样参数设置，选择好通道和采样参数设置，选择好通道和采样参数设置，启动

11、记录按钮，开始记录。启动记录按钮，开始记录。启动记录按钮，开始记录。启动记录按钮，开始记录。现在学习的是第24页，共26页11.实验观察实验观察n n（1）刺激强度对骨骼肌收缩的影响）刺激强度对骨骼肌收缩的影响n n使用单刺激或自动强度调节方式，波宽为使用单刺激或自动强度调节方式，波宽为1ms，刺激强度从零开始逐渐增大，找出刚，刺激强度从零开始逐渐增大，找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度（阈强阈强度度）。）。n n继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否也相应增大。也相应增大。n n继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线不能继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大继续升高为止。找出刚能引起肌肉出现最大收缩的最小的刺激强度，即收缩的最小的刺激强度，即最大刺激强度最大刺激强度。现在学习的是第25页，共26页n n（2）刺激频率对骨骼肌收缩的影响）刺激频率对骨骼肌收缩的影响n n 用最大刺激强度的连续刺激，选择经典用最大刺激强度的连续刺激，选择经典方式逐渐增加刺激频率，分别记录不同方式逐渐增加刺激频率，分别记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率时的肌肉收缩变化。时的肌肉收缩变化。现在学习的是第26页，共26页