艾滋病实验室检查讲稿.ppt

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1、关于艾滋病实验室检查第一页，讲稿共十九页哦2实实 验验 室室 检检 查查第二页，讲稿共十九页哦3免疫学检测免疫学检测AIDSAIDS患者患者正常正常(10109 9/L)/L)CD4CD40.20.21(0.81(0.81.2)1.2)CD4/CD8CD4/CD8111.21.22.12.1淋巴细胞总淋巴细胞总数数112 23 3流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定流式细胞仪测定第三页，讲稿共十九页哦4血清学检测血清学检测（）（）HIV抗体的初筛试验抗体的初筛试验ELISA（酶联免疫试（酶联免疫试验）验）第四页，讲稿共十九页哦5血清学检测血清学检测（）（）HIVHIV抗体的确证试验抗体的

2、确证试验Western blot（免疫印迹试验）（免疫印迹试验）第五页，讲稿共十九页哦6血清学检测（）血清学检测（）HIV抗原检测抗原检测ELISA夹心法夹心法测定测定p24p24抗原抗原敏感性很高（敏感性很高（7 710 pg/ml10 pg/ml）特异性稍差（可有假阳性特异性稍差（可有假阳性）第六页，讲稿共十九页哦7分子生物学检测分子生物学检测（1）HIV RNA检测检测RT-PCR（逆转录（逆转录-聚合酶链反应）聚合酶链反应）PCRPCR：高温变性：高温变性(94)(94)低温退火低温退火(55)(55)适温延伸适温延伸(72)(72)；经；经25302530个循环，成倍个循环，成倍数扩

3、增数扩增荧光定量荧光定量PCRPCR：比常规：比常规PCRPCR多一个寡聚核苷酸多一个寡聚核苷酸探针（带一个荧光发光分子和一个荧光探针（带一个荧光发光分子和一个荧光淬灭分子）淬灭分子）应用：应用：PCRPCR查查PBMCsPBMCs前病毒前病毒DNADNA；RT-PCRRT-PCR查血查血浆中的病毒浆中的病毒RNARNA第七页，讲稿共十九页哦8分子生物学检测（分子生物学检测（2 2）淋巴细胞淋巴细胞HIV RNA检测检测Northern印迹杂交印迹杂交(Northern blot)原理：原理：RNA RNA片段经电泳分离，片段经电泳分离，从凝胶中转移到硝酸纤维素滤从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜，

4、再用探针杂交膜，再用探针杂交第八页，讲稿共十九页哦9分子生物学检测（分子生物学检测（3）HIV变异株检测变异株检测Sanger测序法测序法 原理：核酸扩增时，核苷酸在某原理：核酸扩增时，核苷酸在某一固定点开始，随机在某一特定一固定点开始，随机在某一特定的碱基处终止，产生的碱基处终止，产生A A、T T、C C、G G四组不同长度的一系列核苷酸，四组不同长度的一系列核苷酸，通过在尿素变性的通过在尿素变性的PAGEPAGE胶上电泳，胶上电泳，获得获得DNADNA序列序列第九页，讲稿共十九页哦10病毒检测病毒检测l血浆、单核细胞、脑脊液可分离出血浆、单核细胞、脑脊液可分离出HIVl操作复杂，主要用于

5、科研操作复杂，主要用于科研第十页，讲稿共十九页哦11诊诊 断断第十一页，讲稿共十九页哦12诊断原则诊断原则流流行行病病学学史史：有有静静脉脉注注射射毒毒品品史史；多多个个性性伴伴和和不不洁洁性性生生活活史史；输输入入未未经经HIV抗抗体体检检测测的的血血液液和和血血制制品品史史；HIV抗抗体体阳阳性性所所生生的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。的子女；其它（如职业暴露或医源性感染史）。临床表现：临床表现：高高危危对对象象出出现现上上感感样样及及单单核核细细胞胞增增多多症症样样表表现现，颈颈、腋腋及及枕枕部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性部淋巴结肿大，肝脾肿大，可考虑急性HIV感染。感染。

6、无症状期、艾滋病期临床表现。无症状期、艾滋病期临床表现。实实验验室室检检查查：HIV抗抗体体阳阳性性，并并经经确确证证试试验验确确认认。CD4+T淋淋巴巴细细胞胞数数明明显显减减少少。HIV RNA和和P24抗抗原原的的检检测测有有助助于于早早期诊断新生儿的期诊断新生儿的HIV感染。感染。第十二页，讲稿共十九页哦13诊断标准诊断标准l急性期急性期 流行病学史、临床表现、流行病学史、临床表现、HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性 仅实验室检查仅实验室检查HIV抗体由阴性转为阳性抗体由阴性转为阳性l无症状期无症状期 流行病学史、流行病学史、HIV抗体阳性抗体阳性 仅实验室检查仅实验室检查HI

7、V抗体阳性抗体阳性 第十三页，讲稿共十九页哦14诊断标准诊断标准l艾滋病期艾滋病期 流流行行病病学学史史，HIV抗抗体体阳阳性性，临临床床表表现现有有下下列列一一项项或或以上以上：1.1.1.1.短短短短期期期期（6 6 6 6个个个个月月月月内内内内）体体体体重重重重下下下下降降降降10101010以以以以上上上上；2.2.2.2.咳咳咳咳嗽嗽嗽嗽或或或或腹腹腹腹泻泻泻泻超超超超过过过过4 4 4 4周周周周；3.3.3.3.持持持持续续续续或或或或间间间间歇歇歇歇发发发发热热热热超超超超过过过过4 4 4 4周周周周；4.4.4.4.全全全全身身身身淋淋淋淋巴巴巴巴结结结结肿肿肿肿大大大大

8、；5.5.5.5.反反反反复复复复带带带带状状状状疱疱疱疱疹疹疹疹或或或或慢慢慢慢性性性性播播播播散散散散性性性性HSVHSVHSVHSV感感感感染染染染；6.6.6.6.口口口口咽咽咽咽念念念念珠珠珠珠菌菌菌菌病病病病；7.7.7.7.全全全全身身身身搔搔搔搔痒痒痒痒性性性性皮皮皮皮炎炎炎炎；8.8.8.8.反反反反复复复复发发发发生生生生的的的的败败败败血血血血症症症症；9.9.9.9.深深深深部部部部真真真真菌菌菌菌感感感感染染染染，马马马马尔尔尔尔尼尼尼尼非非非非青青青青霉霉霉霉菌菌菌菌；10.10.10.10.肺肺肺肺孢孢孢孢子子子子虫虫虫虫肺肺肺肺炎炎炎炎；11.11.11.11.

9、活活活活动动动动性性性性巨巨巨巨细细细细胞胞胞胞病病病病毒毒毒毒感感感感染染染染；12.12.12.12.弓弓弓弓形形形形虫虫虫虫脑脑脑脑病病病病。13.13.13.13.反反复复发发生生、难难治治性性肺肺部部感感染染或或进进展展迅迅速速的的活活动动性性结结核核病病；14.14.中中枢枢神神经经系系统统受受损损、占位性病变或中、青年痴呆症；占位性病变或中、青年痴呆症；15.15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。卡波西肉瘤或淋巴瘤。第十四页，讲稿共十九页哦15诊断标准诊断标准 HIV抗体阳性抗体阳性 CD4+T淋巴细胞数淋巴细胞数200/mm200/mm3 3 无上述表现或症状无上述表现或症状第十五页，讲稿

10、共十九页哦16鉴别诊断鉴别诊断l原发性原发性CD4+淋巴细胞减少症淋巴细胞减少症 无HIV感染流行病学资料，HIV-1和HIV-2病原学检测阴性。l继发性继发性CD4+淋巴细胞减少淋巴细胞减少 肿瘤和自生免疫性疾病（autoimmune disease）化疗或免疫抑制治疗后。第十六页，讲稿共十九页哦17预预 后后第十七页，讲稿共十九页哦18影响预后的因素影响预后的因素感染的感染的HIV型别及亚型：型别及亚型：HIV-1较较HIV-2临床进展快临床进展快并发的机会性感染：并发的机会性感染：同同时时合合并并卡卡波波济济肉肉瘤瘤及及肺肺孢孢菌菌肺肺炎炎者者病病死死率率最最高高；合并丙型肝炎者预后差合并丙型肝炎者预后差抗逆转录病毒治疗：抗逆转录病毒治疗：治疗改变了艾滋病进程治疗改变了艾滋病进程 第十八页，讲稿共十九页哦2022/10/11感谢大家观看第十九页，讲稿共十九页哦