血清总胆固醇的测定讲稿.ppt
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1、关于血清总胆固醇的测定第一页,讲稿共二十六页哦WHAT血清中的胆固醇包括与脂肪酸结合的胆固醇酯(CE)和游离胆固醇(FC),前者约占总胆固醇的70%.人体内含胆固醇约140g,主要在体内合成,也可从食物中吸收。其中25%分布在脑和神经组织,10%20%分布在血液中。第二页,讲稿共二十六页哦WHY胆固醇是脂类化合物的一种,是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及构成细胞膜的重要成分。正常人血清胆固醇含量围:3.05.20mmol/L 危险阈值:5.206.20mmol/L 高胆固醇血症:6.20mmol/L 第三页,讲稿共二十六页哦如果其在血液中浓度过高,也可造成心脑血管的严重损害。肝功能障碍时C
2、E会减低。临床检测TCH浓度,主要用于原发性和继发性脂代谢异常症的诊断、动脉粥样硬化疾病的危险性预测、重症肝病及营养学评价。第四页,讲稿共二十六页哦HOW总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。本实验采用后一方法。化学比色法:胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质,此物质在550nm波长处有最大吸收。因此,可用比色法作总胆固醇的定量测定。第五页,讲稿共二十六页哦胆固醇氧化酶法胆固醇氧化酶法 第六页,讲稿共二十六页哦实验目的掌握血清总胆固醇测定的方法(胆固醇氧化酶法)与临床意义第七页,讲稿共二十六页哦实验原理第一步:血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸 。第二步:
3、胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和H2O2。第三步:H2O2在4-氨基安替比林和酚存在时,经过氧化物酶催化,反应生成苯醌亚胺非那腙的红色醌类化合物,其颜色深浅与标本中TC含量成正比。第八页,讲稿共二十六页哦试剂基础液:100ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液(pH=6.7)(含胆酸钠129mg),4-氨基安替比林16mg,苯酚132mg,TritionX-100 0.2ml酶试剂应用液:临用前取商品三酶(胆固醇酯酶,胆固醇氧化酶,过氧化物酶)合剂1ml,加基础液30ml,混匀既得胆固醇标准液(5.17mmol/L):精准称取胆固醇200mg,用纯无水乙醇溶解,用乙醇定容至100
4、ml,分装4C保存,临用时取出第九页,讲稿共二十六页哦操作第十页,讲稿共二十六页哦 混合后置于37C水浴中保温15分钟,用空白管调零,在500nm波长处测吸光度。公式:第十一页,讲稿共二十六页哦 氧化酶法测定血清总胆固醇,此方法特异性好和灵敏度高,既可用于手工操作,也可自动化分析第十二页,讲稿共二十六页哦临床意义胆固醇增高:常见于动脉粥样硬化,原发性高脂血症,(如家族性高胆固醇血症,家族性apoB缺陷症,多源性高胆固醇血症,混合性高脂蛋白血症等),糖尿病,肾病综合症,总胆管阻塞,甲状腺功能减退,肥大性骨关节炎,老年性白内障和牛皮癣等。总胆固醇降低:常见于低脂蛋白血症,贫血,败血症,甲状腺功能亢
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