2022年知识点+练习-微生物的实验室培养.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 名师总结 优秀学问点微生物的试验室培育 5 年 15 考 2022 新课标全国 卷、四川理综、江苏卷,北京卷、浙江、山东,天津 一、培育基1 概念 ：依据微生物对养分物质的不同需求,配制出的供其生长繁衍的养分基质2养分构成1 一般都含有水、无机盐、碳源、氮源O2的要求2 仍需满意不同微生物对pH、特殊养分物质以及3培育基的种类及用途划分培育基特点用途工业生产观看微生物的运动、鉴定 微生物的分别与鉴定、活菌计数、菌种保藏 工业生产分类、鉴定标准的种类液体培育基不加凝固剂物理半固体培育基性质固体培育基加凝固剂,如琼脂化学自然培育基成分不明确的自然物

2、质成分合成培育基培育基成分明确培育基中加入某种化学物培育、分别出特定微生物如在培育酵母菌和霉菌时,可在培育基中加 入青霉素；在培育金黄色葡萄球菌 时,可在培育基中加入高浓度的食 盐等 鉴别不同种类的微生物,如可用伊 红 美蓝培育基检测饮用水或乳制挑选培育基质,以抑制不需要的微生物 的生长, 促进所需要的微生用途物的生长依据微生物的代谢特点,在鉴别培育基培育基中加入某种指示剂品中是否有大肠杆菌如有,菌落呈或化学药品深紫色,并带有金属光泽 特殊提示自养微生物与异养微生物所需的养分物质不同：自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物,而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物,因此可依

3、据培育基中养分物质判定微生物的代谢类型；含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源,也能作为能源物质,供应能量,如 NH 3 既作为硝化细菌的氮源也作为能源；二、无菌技术特点：使用较为温顺的物理或化学方法仅杀死1消毒物体表面或内部的部分微生物不包括芽孢和孢子常用方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法特点：指使用剧烈的理化因素杀死物体内外2灭菌全部微生物包括芽孢和孢子常用方法：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 6 页精选学习资料 - - - - - - - - - 名师总结 优秀学问点3消毒和灭菌比较比较理化因素的作用强度毁灭微生物的数量芽孢

4、和孢子能否被毁灭消毒较为温顺部分生活状态的微生物不能灭菌剧烈全部微生物能三、微生物的纯化培育及菌种的保藏1 原理 :在培育基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个菌落, 这个菌落就是一个纯化的细菌菌落；2制备固体培育基的流程 运算 称量 溶化 灭菌 倒平板3纯化大肠杆菌的方法常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；1 平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作,将集合的菌种逐步稀释分散到培养基的表面； 如下图示 2 稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培育； 如下图所示 涂布平板操作如下图所示 系

5、列稀释操作如下图所示 3 两种纯化细菌的方法的比较项目优点缺点适用范畴平板划可以观看菌落特点,对混不能计数适用于好氧菌线法合菌进行分别稀释涂可以计数,可以观看菌落吸取量较少,较麻烦,平适用于厌氧菌和兼性厌氧布平板板不干燥成效不好,简单特点菌法扩散4.培育： 接种后的培育皿放入恒温箱内培育5菌种保藏1暂时保藏4 冰箱中保藏,以后每36个月,操作：采纳固体斜面培育基,菌落长成后,放入转移一次新的培育基 缺点：储存时间不长,菌种易被污染或 产生变异名师归纳总结 2长期储存法：甘油管藏法,放在20_下储存第 2 页,共 6 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - -

6、名师总结 优秀学问点特殊提示 1配制牛肉膏蛋白胨固体培育基的留意事项倒平板的相宜温度是 50 左右,温度过高会烫手,过低培育基又会凝固；平板需倒置, 这样既可使培育基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培育基,造成污染；2平板划线操作的留意事项第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环；灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种；划线时最终一区不要与第一区相连；划线用力大小要适当,防止用力过大将培育基划破；微生物培育与分别的考查1 江苏 某讨论小组从有机废水中分别微生物用于废水处理；以下表达正确选项；A培育基分装到培育皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接

7、种后的培育皿须放在光照培育箱中培育D培育过程中每隔一周观看一次解析 此题考查微生物的分别和培育过程中的操作要求和培育条件等相关学问,意在考查考生的学问运用才能和试验处理才能；培育微生物的过程中应先灭菌再倒平板,A 错误；每一次划线前都要进行接种环的灼烧灭菌, B 正确；接种后的培育皿应在恒温培育箱中进行培育,光照会影响温度等条件；培育过程中观 察间隔的时间一般不超过 24 h；答案 B 微生物试验室培育的拓展应用 2 新课标全国 理综 临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药试验；试验时,第一要从病人身上猎取 少量样本,然后依据肯定的试验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏锐性；回答以下问题：

8、1为了从样本中猎取致病菌单菌落,可用 面,经过挑选培育、鉴别等步骤获得；_法或 _法将样本接种于固体培育基表2取该单菌落适当稀释,用_法接种于固体培育基表面,在37 培育箱中培育24 h ,使其匀称生长,布满平板；3为了检测该致病菌对于抗生素的敏锐性,将分别含有A 、B、 C、D 四种抗生素的滤纸片匀称置于该平板上的不同位置, 培育一段时间后, 含 A 的滤纸片四周显现透亮圈,说明该致病菌对抗生素 A_ ；含 B 的滤纸片四周没有显现透亮圈,说明该致病菌对抗生素 B_；含 C 的滤纸片四周的透亮圈比含 A 的小,说明 _ ；含 D 的滤纸片四周的透亮圈也比含 A 的小,且透亮圈中显现了一个菌落

9、,在排除杂菌污染的情形下,此菌落很可能是抗生素 D 的_ ；名师归纳总结 4依据上述试验结果,为达到抗菌目的,最好选用抗生素_；第 3 页,共 6 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师总结 优秀学问点解析 1在微生物的培育过程中,常用来分别微生物的方法是稀释涂布平板法或平板划线法；2为了使微生物在培育基上能够匀称分布,一般用稀释涂布平板法将微生物接种在培育基上；3在抗药性检验过程中,假如在菌落四周显现透亮圈,说明此种抗生素可抑制该细菌；透亮圈的大小表示此种抗生素抗菌成效的强弱；据此可判定抗菌成效强弱依次是 具有耐药性；A 、C、B；D 的透亮圈中显

10、现了一个菌落,说明该菌落对此种抗生素答案1平板划线稀释涂布 或涂布 平板2稀释涂布平板 涂布 3敏锐不敏锐该致病菌对C 的敏锐性比对A 的弱耐药菌4A 归纳比较1培育基的配制原就 1目的要明确：配制时应依据微生物的种类、培育目的等确定配制的培育基种类；2养分要和谐：留意各种养分物质的浓度和比例；3pH 要相宜：细菌为6.5 7.5,放线菌为7.5 8.5,真菌为5.0 6.0,培育不同微生物所需pH 不同；2培育基的养分构成 1各种培育基的详细配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；2不同培育基仍要满意不同微生物对 3微生物和动植物养分要素的比较pH、特殊养分物质以及氧气的要求；项目异

11、养 型碳源氮源能源无机盐、水动物糖类、脂肪等蛋白质或其降解物同碳源都需要,种糖类、脂肪、醇、蛋白质或其降解物、铵同碳源有机酸等盐、硝酸盐、 N2 等类及功能微 生自 养 型CO 2、碳酸盐等NH 3、铵盐、硝酸盐等氧化无机物或利用光能基本相同物铵盐、硝酸盐光能绿色植物32. 8 分农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解,长期使用会污染土壤；为修复被污染的土壤,可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌；已知该除草剂 定量该除草剂的培育基不透亮；含氮有机物 在水中溶解度低,含一名师归纳总结 ABCD 1 微生物接种是微生物学讨论中最常用的基本操作技术,该技术的核心是_,应当在 _旁完成；

12、图中B、C 所示操作的目的是将集合的菌种逐步_；第 4 页,共 6 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师总结 优秀学问点2 在选育过程中,应将土壤浸出液接种于以_为唯独氮源的固体培育基上；为了挑选出高效的目的菌,可比较单菌落四周透亮圈的大小；试验结果如右图显示的 AE 五种菌株中, _是最理想菌株；3 如想对初步挑选得到的目的菌进行纯化并计数,可采纳的接种方法是 _；对分别的细菌数目统计时,统计的菌落数目往往比活菌的实际数目 _；4 操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌：培育细菌用的培育基与培育皿；操作者的双手；玻棒、试管、烧瓶和吸管；其中需要

13、灭菌的是 _；填序号 32. 8 分 1 无菌操作酒精灯火焰稀释获得单个菌落4 2 该除草剂E3 稀释涂布平板法少【微生物培育】35（ 15 分）I下表所示为某微生物培育基的配方,请回答：（1）依物理性质划分,该培育基属于_培育基；依用途划分,就属于_培育基；（ 2）依培育基的成分,所培育微生物的同化作用类型是 _；（ 3）如要鉴定自来水中的大肠杆茵是否超标,至少要加入 _；_、_和 _,除去I （1）液体挑选（ 2）异养（分）（3）琼脂伊红和美蓝青霉素（分）【微生物培育】33（8 分）土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中挑选出能够 酸盐转化为植物能吸取的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其

14、添加到有将难溶性磷 机肥中,改善植物磷元素供应；科研人员进行如下试验：试验原理： 固体培育基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会d）的在菌落四周形成透亮圈（如右图）,透亮圈直径（D）与菌落直径（比值（ D/d ）代表微生物溶解磷的才能大小；试验步骤：名师归纳总结 步骤 1取某地区土样 5g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1mL接种到基础培育基A上,在相宜温度下培第 5 页,共 6 页步骤 2 养72h；菌株透亮圈直径菌落直径D/d 在基础培育基 A上用接种环挑取代表性菌落再次（ D）（d）接种,培育 3 4d后观看菌落特点和透亮圈的大M-3-01 18.8 12.3 1.5 小,初步挑选出三种优

15、良解磷菌株（如右表） ；B3-5-6 20.7 8.0 2.6 分析回答：T1-4-01 9.1 6.5 1.4 （1）从物理形状看,培育基A 属于培育基；培育基中磷源应当是；（2）步骤 1中接种方法是,步骤 2中接种环的灭菌方法是；- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 名师总结优秀学问点；力,讨论人员（3）依据试验结果可以确定溶解磷才能最强的菌株是（4）为进一步测定初步挑选的三种菌株实际溶解磷的能将它们接种到基础培育基B中,并在 37、200 r min-1 摇床培育, 定期取上清液, 测定溶液中可溶性磷含量,得到右图所示曲线；用摇床进行培育的好处是；结

16、果说明最优良的解磷菌株是；33. （ 8 分,除特殊注明外,每空 1 分）（1）固体 难溶性磷酸盐（2）稀释涂布平板法 灼烧（3）B3-5-6 （4）增加培育液中的溶氧量；使菌株与培育液充分接触,有利于物质的交换（2分）M-3-01 【微生物培育】高考及模拟题31.8 分人工瘤胃仿照了牛羊等反刍动物的胃 ,可用来发酵处理秸秆 ,提高秸秆的养分价值；为了增强发酵成效 ,讨论人员从牛胃中挑选纤维素酶高产菌株 ,并对其降解纤维素才能进行了讨论；请回答以下问题 : 1在样品稀释和涂布平板步骤中 ,以下选项不需要的是 _ 填序号 ；酒精灯 于培育皿 显微镜 无菌水2在涂布平板时 ,滴加到培育基表面的菌悬

17、液量不宜过多的缘由是 _ ；3向试管内分装含琼脂的培育基时 ,如试管口粘附有培育基,需要用酒精棉球擦净的缘由是 _ ；4刚果红可以与纤维素形成红色复合物 ,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应；讨论人员在刚果红培育基平板上,筛到了几株有透亮降解圈的菌落见, , 右图 ； 图中降解圈大小与纤维素酶的_ 有关；图中降解纤维素才能最强的菌株是_ 填图中序号 ；5讨论人员用挑选到的纤维素酶高产菌株J1和 J4,在不同温度和pH 条件下进行发酵测得发酵液中酶活性的结果见下图,估计菌株_ 更适合用于人工瘤胃发酵理由是_ ；31.8 分 12培育基表面的菌悬液会显现积液,导致菌体积累 ,影响分别成效3防止培育基污染棉塞4量与活性5J4 发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 6 页