运动生物化学教案实验五血乳酸的测定.pdf

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1、教教案案日期：2009.6.2225 课节：7、8教室：生化实验室1教学对象：运动训练第 5 次课教学主题：血乳酸的测定教学目标：掌握血乳酸的测定方法，了解运动时解运动时血乳酸水平的影响因素及该指标在运动实践中的应用和意义。教学重点：血乳酸的测定方法教学难点：血乳酸测定方法的实验原理教学过程设计时间（90分）教学内容第一：引导（10 分钟左右）点名，讲解上节实验报告完成情况。然后复习理论课所讲的关于血乳酸在运动实践中的应用和意义。第二：实验过程（75 分钟左右）一 实验原理乳酸与浓硫酸共热生成乙醛，在铜离子存在时乙醛与对羟基联苯作用生成紫色化合物，其颜色的深浅与乳酸浓度成正比，通过比色测定其含

2、量。二 实验器材与试剂10%三氯乙酸，1%氰化钠溶液，浓硫酸，对羟基联苯试剂，4%硫酸铜溶液，乳酸空白夜，乳酸标准储存液，乳酸标准应用液，水浴锅，721 分光光度计，离心机，移液管等。三 实验指导（一）、实验步骤1、运动方式和取血方式受试者进行 1 分钟原地高抬腿跑，在运动前、运动后3 分钟分别取耳垂血 20微升，吹人预先存有 0.48 毫升 lNaF 溶液的离心试管中，立即摇匀。再加入1.5 毫升的 10%三氯乙酸溶液，混匀，以3500 转的速度离心 5 分钟，取上清液，弃沉淀。2。无蛋白血滤液制备教师演示示范操作，并提示操作过程中可能出现的错误。（单位：毫升）步骤lNaF耳垂血10%三氯乙

3、酸测定管 1（运动前）0.480.021.5测定管 2（运动后）0.480.021.5混均匀，离心（3500 转5 分钟），取上清液分别倒入做好标记的两个离心管中，备用。2、测定血乳酸步骤（单位：毫升）样品或试剂空白液标准应用液（0.01 毫克/毫升）上清液4%硫酸铜溶液浓硫酸对羟基联二苯空白管测管 1测管 2测管 30.51 滴3.02 滴0.50.50.51 滴1 滴1 滴3.03.03.0沸水浴 5 分，在冰水中冷却2 滴2 滴2 滴混匀，37水浴保温 15 分钟，每 5 分钟振摇一次；100沸水浴 90 秒，用冷水冷却至室温；倒入 1 厘米光径比色皿，空白管调零，560 纳米波长比色。(二)、实验结果计算血乳酸浓度（毫克%）=OD/OD*100 毫克%=血乳酸浓度（毫摩尔/升）=血乳酸浓度（毫克%）9=四、注意事项1、水浴保温时温度和时间一定要准确。2、滴加对羟基联苯时防止其附着于试管壁上，并充分摇匀。3、滴加浓硫酸时，要边加边振荡，滴加速度要慢，防止产生的乙醛挥发。七、思考题1、测定血乳住时应如何控制来血样的时间？2、如何运用血乳酸指标监控运动强度？3、如何运用血乳酸指标评定运动员有氧、无氧运动能力？第三、实验结果记录与分析(5 分钟左右)总结实验、分析实验数据、如何写实验报告第 次课课后小结：