菊花的组织培养 (5).ppt
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1、萧县郝集中学关于菊花的组织培养(5)现在学习的是第1页,共50页扦插扦插嫁接嫁接压条压条 现在学习的是第2页,共50页营养繁殖营养繁殖扦插扦插嫁接嫁接压条压条 通过必修课的学习,我们已经了解到大通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养组织培养现在学习的是第3页,共50页专题专题3 3植物组织培养技术植物组织培养技术现在学习的是第4页,共50页课题一课题一 菊花的组织培养菊花的组织培养现在学习的是第5页,共50页一、课题背景一、课题背景二、基础知识
2、二、基础知识(一)植物组织培养的基本过程(一)植物组织培养的基本过程 在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过构和生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程叫做细胞分化。程叫做细胞分化。离体的植物组织或细胞,在培养了一段时间以离体的植物组织或细胞,在培养了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成排列疏松而无规则的高度液泡化后,会通过细胞分裂,形成排列疏松而无规则的高度液泡化的呈无定形状态的一群薄壁细胞。的呈无定形状态的一群薄壁细胞。1.1.细胞分化:细胞分化:2.2.愈伤组织:愈伤组织:3.3.脱分化:脱
3、分化:4.4.再分化:再分化:现在学习的是第6页,共50页人参的愈伤组织人参的愈伤组织人参的愈伤组织人参的愈伤组织现在学习的是第7页,共50页菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织菠萝的愈伤组织现在学习的是第8页,共50页一、课题背景一、课题背景二、基础知识二、基础知识(一)植物组织培养的基本过程(一)植物组织培养的基本过程 在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程叫做细生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程叫做细胞分化。胞分化。离体的植物组织或细胞,在培养了一段时间以离体的植物组织或
4、细胞,在培养了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成排列疏松而无规则的高度液泡后,会通过细胞分裂,形成排列疏松而无规则的高度液泡化的呈无定形状态的一群薄壁细胞。化的呈无定形状态的一群薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。称为植物细胞的脱分化。1.1.细胞分化:细胞分化:2.2.愈伤组织:愈伤组织:3.3.脱分化:脱分化:4.4.再分化:再分化:现在学习的是第9页,共50页现在学习的是第10页,共50页一、课题背景一、课题背景二、基础知识二、基础知识(一)植物组织培养的基本过程(一)植物组织培养的基本过程 在植物的
5、个体发育过程中,细胞在形态、结在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过构和生理功能上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程叫做细胞分化。程叫做细胞分化。离体的植物组织或细胞,在培养了一段时间以离体的植物组织或细胞,在培养了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成排列疏松而无规则的高度液泡化后,会通过细胞分裂,形成排列疏松而无规则的高度液泡化的呈无定形状态的一群薄壁细胞。的呈无定形状态的一群薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。程,称为植物细胞的脱分化。由脱分化产生的愈
6、伤组织继续进行培养,又可由脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。1.1.细胞分化:细胞分化:2.2.愈伤组织:愈伤组织:3.3.脱分化:脱分化:4.4.再分化:再分化:现在学习的是第11页,共50页现在学习的是第12页,共50页5.5.植物组织培养过程:植物组织培养过程:现在学习的是第13页,共50页离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化 根根芽芽植植物物体体植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程:脱分化和再分脱分化和再分化过程是组织化过程是组
7、织培养中的关键。培养中的关键。现在学习的是第14页,共50页 指植物的离体部分(包括任何器官、组指植物的离体部分(包括任何器官、组织、细胞或原生质体),在人工控制的培养织、细胞或原生质体),在人工控制的培养基及环境条件(温度及光照)下,得以生长基及环境条件(温度及光照)下,得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。和分化成完整植株的一种无菌培养技术。又称:又称:植物离植物离体培养体培养6.6.植物组织培养:植物组织培养:现在学习的是第15页,共50页 细胞的全能性是指已分化的细胞细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。具有发育成完整个体的潜能。是生物体的每一个细胞都含有该是生物
8、体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质。物种所特有的全套遗传物质。7.7.植物组织培养原理:植物组织培养原理:植物细胞的全能性植物细胞的全能性(1)概念:)概念:(2)原因:)原因:现在学习的是第16页,共50页(二)影响植物组织培养的因素:(二)影响植物组织培养的因素:1 1、外植体的选取、外植体的选取 a a不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同 b b对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。也会影响实验结果。2 2、培养基的配制、培养基的配制(MS(MS培养基培养基)大量元素:大量元素:C C
9、、H H、O O、N N、P P、K K、CaCa、MgMg、S S 微量元素:微量元素:B B、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、I I、CoCo 有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素:生长素、细胞分裂素等植物激素:生长素、细胞分裂素等未开花植株的茎上部新未开花植株的茎上部新萌生的侧枝萌生的侧枝现在学习的是第17页,共50页MSMS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例现在学习的是第18页,共50页微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,不同,MSMS培养基则需提供大
10、量无机营养,无机盐培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。两大类。思考以下问题思考以下问题:1.1.同微生物培养基相比,同微生物培养基相比,MSMS培养基的配方有哪些明显培养基的配方有哪些明显的不同?的不同?2 2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么?这些步骤的适宜条件是什么?组织的脱分化及愈伤组织的再分化。组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是
11、植物激素,细胞分裂素与生再分化的最重要因素是植物激素,细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。的形成。现在学习的是第19页,共50页3 3、不同植物激素使用顺序、不同植物激素使用顺序使用顺序使用顺序 实验结果实验结果 先生长素,先生长素,后细胞分裂素后细胞分裂素 先细胞分裂素,先细胞分裂素,后生长素后生长素 同时使用同时使用 有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化分化频率提高分化频率提高 现在学习的是第20页,共50页4 4、不同植物激素使用量、不同植物激素使用量生长素生长素/细胞分裂素
12、比值细胞分裂素比值结果结果 比值高时比值高时 比值低时比值低时 比值适中比值适中 促根分化,抑芽形成促根分化,抑芽形成 促芽分化,抑根形成促芽分化,抑根形成促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长现在学习的是第21页,共50页5 5、pHpH、温度、光照、温度、光照(菊花组培)(菊花组培)pH=5.8 pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 1822 每日光照每日光照12h12h6 6、消毒、消毒在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境现在学习的是第22页,共50页1 1、实验操作流程、实验操作流程制备制备MSMS固体固体培养基培养基外植体消外植体消毒毒接接
13、 种种培培 养养栽栽 培培移移 栽栽三、实验操作三、实验操作现在学习的是第23页,共50页2 2、实验具体操作、实验具体操作(1 1)制备)制备MSMS固体培养基固体培养基实验室一般使用实验室一般使用_保存的配制好的培养基母液来保存的配制好的培养基母液来制备制备配制各种母液配制各种母液配制母液时,大量元素浓缩配制母液时,大量元素浓缩_ _,微量元素浓,微量元素浓缩缩_ _。常温保存。激素类、维生素类以及用量。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照比较小的有机物可以按照_的质量浓度单独配制的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍母液。用母液配制培养基
14、时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量。数,计算用量。1mg/ml1mg/ml4 41010倍倍100100倍倍三、实验操作三、实验操作现在学习的是第24页,共50页配制培养基。配制培养基。按配方称取琼脂、按配方称取琼脂、蔗糖蔗糖以及各种母液,配制以及各种母液,配制MSMS培养基。培养基。2 2、实验具体操作、实验具体操作(1 1)制备)制备MSMS固体培养基固体培养基实验室一般使用实验室一般使用_保存的配制好的培养基母液来制备保存的配制好的培养基母液来制备4 4植物激素植物激素在菊花组织培养中,可以不添加在菊花组织培养中,可以不添加_,原因是菊,原因是菊花茎段组织培养花茎段组织培养_。比较
15、容易比较容易三、实验操作三、实验操作现在学习的是第25页,共50页灭菌灭菌将分装好的培养基连同其他器械一起进行将分装好的培养基连同其他器械一起进行_。2 2、实验具体操作、实验具体操作(1 1).制备制备MSMS固体培养基固体培养基实验室一般使用实验室一般使用_保存的配制好的培养基母液来保存的配制好的培养基母液来制备制备4 4高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌三、实验操作三、实验操作现在学习的是第26页,共50页 此时的组织或细胞为离体的,即细胞此时的组织或细胞为离体的,即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境,而所生活的环境为液体有机物营养环境,而不是能体现其整个植物体的光能自养。不是能体现其整个植物体
16、的光能自养。高等植物是光能自养型生物,为什么高等植物是光能自养型生物,为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基?培养基?思思 考考现在学习的是第27页,共50页2 2、实验具体操作、实验具体操作(2 2)外植体消毒)外植体消毒 选取菊花茎段时,要取选取菊花茎段时,要取 _。流水流水冲洗冲洗酒精酒精无菌水无菌水氯化汞氯化汞无菌水无菌水消毒流程:消毒流程:浓度浓度_摇动摇动_次次时间时间_s_s浓度浓度_时间时间_min_min至少清洗至少清洗_次次漂净漂净_生长旺盛的嫩枝生长旺盛的嫩枝70%70%2 23 36 67 70.1%0.1%1 12 23
17、3消毒水消毒水三、实验操作三、实验操作现在学习的是第28页,共50页 不是。对外植体进行表面消毒时,既不是。对外植体进行表面消毒时,既要考虑到消毒效果,又要考虑到植物的要考虑到消毒效果,又要考虑到植物的耐受能力。耐受能力。在外植体消毒过程中,是不是强度在外植体消毒过程中,是不是强度越大越好,为什么?越大越好,为什么?思思 考考现在学习的是第29页,共50页旁栏思考:旁栏思考:你打算做几组重复?你打算你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗?设置对照实验吗?答:每种材料或配方答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复至少要做一组以上的重复。设置设置对照对照实验可以取用一个经过灭菌的实验可以取用一个经
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