药物分析第三章杂质检查精选PPT.ppt

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1、关于药物分析第三章杂质检查第1页，讲稿共130张，创作于星期三一、药物的杂质与纯度一、药物的杂质与纯度1 1药物纯度的概念：药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯洁程度。药物的纯度是指药物的纯洁程度。药药物物中中的的杂杂质质是是影影响响药药物物纯纯度度的的主主要要因因素素，杂杂质质检检查查也也称称纯纯度度检检查。查。药药物物中中所所含含杂杂质质超超过过质质量量标标准准规规定定的的纯纯度度要要求求，有有可可能能使使药药物物的的外外观观性性状状、物物理理常常数数发发生生变变化化，甚甚至至会会影影响响药药物物的的稳稳定定性性，使使活活性性降降低低、毒副作用增加。毒副作用增加。第一节第一节 药物杂质与

2、限量药物杂质与限量第2页，讲稿共130张，创作于星期三例：青霉素在生产过程中可能引入过敏性例：青霉素在生产过程中可能引入过敏性杂质，可导致过敏性休克，甚至造成杂质，可导致过敏性休克，甚至造成心衰死亡。心衰死亡。例：阿司匹林中引入水分能促进其水解失效例：阿司匹林中引入水分能促进其水解失效例：乙醚在麻醉中的过氧化物及醛对呼吸道例：乙醚在麻醉中的过氧化物及醛对呼吸道有刺激性，引起肺水肿及肺炎等，严有刺激性，引起肺水肿及肺炎等，严重时甚至引起死亡。重时甚至引起死亡。第3页，讲稿共130张，创作于星期三 2、药物纯度的要求是不断提高的：、药物纯度的要求是不断提高的：例如：度冷丁例如：度冷丁1948年收入

3、年收入BP，1970年经年经GC分离鉴定出两种无效异构体（分离鉴定出两种无效异构体（）和）和（），有时高达），有时高达20%30%。再如：再如：ASA(阿司匹林阿司匹林)中除了中除了SA(水杨酸水杨酸)外，外，还存在乙酰水酸酐、乙酰水杨酰、乙酰还存在乙酰水酸酐、乙酰水杨酰、乙酰水杨酸等水杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用。的衍生物，具有致敏作用。第4页，讲稿共130张，创作于星期三3、药物纯度的评价：、药物纯度的评价：应把药物的外观性状、理化常数、杂质检查、应把药物的外观性状、理化常数、杂质检查、含量测定等方面作为一个有联系的整体来综合评含量测定等方面作为一个有联系的整体来综合评价。价。药品中的

4、杂质能否得到合理、有效地控制，直药品中的杂质能否得到合理、有效地控制，直接关系到药品质量可控性和安全性，在药物研究接关系到药品质量可控性和安全性，在药物研究与开发过程中，对杂质的研究备受重视。与开发过程中，对杂质的研究备受重视。第5页，讲稿共130张，创作于星期三4、化学试剂的纯度与临床用药的纯度不能相互、化学试剂的纯度与临床用药的纯度不能相互混淆，药用规格与试剂规格是不一样的。混淆，药用规格与试剂规格是不一样的。化学试剂化学试剂不考虑杂质的生理作用，其杂质限量只不考虑杂质的生理作用，其杂质限量只是从可能引起的化学变化对使用的影响是从可能引起的化学变化对使用的影响来限定的，对试剂的使用范围和使

5、用目来限定的，对试剂的使用范围和使用目的加以规定，不考虑杂质对生物体的生的加以规定，不考虑杂质对生物体的生理作用及毒副作用；理作用及毒副作用；第6页，讲稿共130张，创作于星期三药物纯度主要从用药安全、有效和对药物稳定性 等方面考虑。例：BaSO4 化学试剂规格对可溶性钡盐不做检查，药 用规格的硫酸钡要做酸溶性钡盐、重金属、砷盐等检查，如果存在可溶性钡盐会导致 医疗事故。化学试剂是不能代替药品来使用的第7页，讲稿共130张，创作于星期三二、药物杂质的来源二、药物杂质的来源 了解药物中的杂质的来源，可有针对性的制定出检查的项目和方法。药物了解药物中的杂质的来源，可有针对性的制定出检查的项目和方法

6、。药物中杂质主要来源有两个：中杂质主要来源有两个：一、由生产中引入；一、由生产中引入；二、在储藏过程中受外界条件的影响，引起药物理化性质发二、在储藏过程中受外界条件的影响，引起药物理化性质发 生变化而产生。生变化而产生。第8页，讲稿共130张，创作于星期三 （一）（一）生产过程中引入的杂质生产过程中引入的杂质主要指药物（主要指药物（1 1）所用原料不纯而引入其他物质；）所用原料不纯而引入其他物质；（2 2）在合成过程中，未反应的原料、中间体）在合成过程中，未反应的原料、中间体 和副产物；和副产物；（3 3）在制作过程中加入一些试剂、溶剂等而）在制作过程中加入一些试剂、溶剂等而 在精制时未完全除

7、净。在精制时未完全除净。例如：药用例如：药用NaClNaCl的的BrBr-、I I-、SOSO4 42-2-、K K+、CaCa2+2+、MgMg2+2+、FeFe3+3+ASA ASA中的中的SASA；地西泮中的去甲安定；吗啡中的罂粟碱地西泮中的去甲安定；吗啡中的罂粟碱第9页，讲稿共130张，创作于星期三如：制剂中生成的杂质：如：制剂中生成的杂质：ASAASA片、栓剂中片、栓剂中SASA的检查；盐酸普鲁的检查；盐酸普鲁 卡因注射液中对氨基苯甲酸和二乙氨卡因注射液中对氨基苯甲酸和二乙氨 基乙醇的检查。基乙醇的检查。生产过程中残留有机溶剂、酸性或碱性杂质的检查。生产过程中残留有机溶剂、酸性或碱性

8、杂质的检查。药物中无效、低效异构体或晶型的检查药物中无效、低效异构体或晶型的检查 例如：无味氯霉素存在例如：无味氯霉素存在A A、B B晶型，其中晶型，其中B B为有效，为有效，A A为低效。为低效。苯甲咪唑有苯甲咪唑有A A，B B，C C三种晶型；三种晶型；20%20%；40%40%60%60%；90%90%第10页，讲稿共130张，创作于星期三 （二）贮藏过程引入的杂质（二）贮藏过程引入的杂质 主要指外界条件的变化或微生物的作用可能发生的水解、氧化、主要指外界条件的变化或微生物的作用可能发生的水解、氧化、异构化、晶型转化、聚合等变化，而产生的有关杂质。异构化、晶型转化、聚合等变化，而产生

9、的有关杂质。如：如：ASAASA水解生成水解生成SASA和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸和醋酸；阿托品水解生成莨菪醇和莨菪酸 麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。麻醉乙醚氧化为醛和有毒的过氧化物。第11页，讲稿共130张，创作于星期三易发生水解反应的结构：苷类、酯、内酯、酰胺、卤代烃等易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键第12页，讲稿共130张，创作于星期三三、药物杂质的分类三、药物杂质的分类 按杂质的来源分为一般杂质和特殊杂质；1 1、一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮、一般杂质是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮 藏过程中容易引入的杂质，

10、它们含量高低与生产工艺水平密切藏过程中容易引入的杂质，它们含量高低与生产工艺水平密切 相关，所以也称信号杂质；相关，所以也称信号杂质；ChP ChP附录中规定了一般杂质的检查项目的检查方法附录中规定了一般杂质的检查项目的检查方法第13页，讲稿共130张，创作于星期三2、特殊杂质、特殊杂质是指在个别药物的生产和贮藏过程是指在个别药物的生产和贮藏过程引入的杂质。又称为有关物质，引入的杂质。又称为有关物质，这类杂质这类杂质随药物的不同而不同。随药物的不同而不同。例：乙酰水杨酸引入水杨酸例：乙酰水杨酸引入水杨酸甲硝唑引入甲硝唑引入2-甲基甲基-5-硝基咪唑硝基咪唑第14页，讲稿共130张，创作于星期三

11、 按照来源的不同还可将杂质分为：1、工艺杂质：合成未反应完全的反应物 试剂 中间体 副产物等2、降解产物：从反应物及试剂中混入的其 他外来杂质等。第15页，讲稿共130张，创作于星期三按照其毒性分类：杂质分为毒性杂质（重金属、砷盐）信号杂质一般无毒，但其含量的多少可反 映出药物的纯度情况。如果药 物中信号杂质含量过多，提示 该药的生产工艺或生产控制有 问题。如氯化物、硫酸盐等）第16页，讲稿共130张，创作于星期三按化学类别和特性分为：无机杂质、有机杂质、残留溶剂。无机杂质 可能来源于生产过程，一般是已知和 确定的。由于许多无机杂质直接影响 药品的稳定性，并可反映生产工艺本 身的情况，了解药品

12、中无机杂质的情 况对评价药品生产工艺的状况有重要 意义。有机杂质 主要包括合成中未反应的原料、中 间体、副产品、降解产物等。有机杂质分 特定杂质 非特定杂质第17页，讲稿共130张，创作于星期三特定杂质指在质量标准中分别规定了明确的限 度，并单独进行控制的杂质；特定杂质包括结构已知和结构未知的杂质非特定杂质指在质量标准中未单独列出，而仅 采用一个通用的限度进行控制的一 系列杂质，其在药品中出现的种类 与概率并不固定。如重金属都以铅 限度来控制第18页，讲稿共130张，创作于星期三四、杂质的限量四、杂质的限量 1 1杂质限量的概念杂质限量的概念 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。药物中所

13、含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。通常用百分之几或百万分之几（通常用百分之几或百万分之几（ppmppm）来表示。来表示。药物中杂质限量的控制方法有两种药物中杂质限量的控制方法有两种（1 1）一种是限量检查一种是限量检查 （2 2）一种是对杂质定量测定）一种是对杂质定量测定第19页，讲稿共130张，创作于星期三 限量检查法：通常不要求测定其准确含量，只需检查 是否超过限量。具体操作方法：对照法（多数采用）比较法 灵敏法对照法：取一定量供试品和一定量被检杂质标准溶液，-同条件下处理，比较反应结果 采用该法须注意平行原则，结果才有可比性（条件一致）第20页，讲稿共130张，创作于星期三注意：该法检查

14、结果，只能判定药物所含杂 质是否符合限量规定，一般不能测定 杂质的准确含量。第21页，讲稿共130张，创作于星期三灵敏度法：供试品溶液中进入一定量试剂，在一定反应条件下，不得有正反 应出现，从而判断供试品中所含 杂质是否符合杂质限量。例：乳酸中草酸、酒石酸等杂质检查，在检 查条件下不得出现浑浊。P100第22页，讲稿共130张，创作于星期三比较法：取供试品一定量，测定待检杂质 的参数（如吸光度等）与规定限 量比较，不得更大。例：维生素B2中感光黄素（此杂质溶于三 氯甲烷），维生素B2在三氯甲烷中不 溶，在400nm下测定A,不得超过0.016.第23页，讲稿共130张，创作于星期三 药物的杂质

15、根据性质及危害性不同，限量要求也不一样。对危害人体健康、影响药物稳定性的杂质，必须严格控制其限量如砷、铅等；有些杂质本身一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，如一些信号杂质则只要其不超过规定含量即可。第24页，讲稿共130张，创作于星期三 2 2杂质限量的计算杂质限量的计算 杂质限量的计算公式：杂质限量的计算公式：杂质限量杂质限量=杂质的最大允许量杂质的最大允许量供试品的量供试品的量100%100%=标准液浓度标准液浓度体积体积供试品的量供试品的量100%100%L L（%）=CV/S100%=CV/S100%第25页，讲稿共130张，创作于星期三例例1对乙酰基酚中的氯化物的检查：

16、对乙酰基酚中的氯化物的检查：已知：已知：S=2.0g25/100；C=10g/ml；V=5.0ml求：求：L=？解：解：L=CV/S100%=105.0/2.010625/100100%=0.01%第26页，讲稿共130张，创作于星期三 例例2 2葡萄糖中重金属的检查：葡萄糖中重金属的检查：已知：已知：S=4.0gS=4.0g；C=10g/mlC=10g/ml；L=510L=510-6-6 求：求：V=V=？解：解：V=LS/C V=LS/C =510 =510-6-64.0/10104.0/1010-6-6=2.0(ml)=2.0(ml)第27页，讲稿共130张，创作于星期三例例3葡萄糖中砷

17、盐的检查：葡萄糖中砷盐的检查：已知：已知：V=2.0ml；C=1g/ml；L=0.0004%求：求：S=？解：解：S=CV/L=110-62.0/410-6=0.5(g)第28页，讲稿共130张，创作于星期三 例例4 4磷酸可待因中吗啡的检查：磷酸可待因中吗啡的检查：已知：已知：V=5.0mlV=5.0ml；C=0.02 mg/mlC=0.02 mg/ml；S=0.1gS=0.1g 求：求：L=L=？解：解：L=CV/S=5.00.02/0.11000 100%L=CV/S=5.00.02/0.11000 100%=0.1%=0.1%注意点注意点 单位一致单位一致 稀释倍数稀释倍数 表示方法（

18、表示方法（%，PPPPM M）第29页，讲稿共130张，创作于星期三第二节 杂质的检查方法 检查药物中存在的微量杂质，首要的问题就是选择一个专属性强的方法，使药物对其所含微量杂质的检测不产生干扰 药物中杂质的检查主要是依据药物与杂质在物理性质或化学性质上的差异来进行。物理性质差异：指药物与杂质在外观性状、分配或吸附以 及对光的吸收等性质差别；化学性质差异：指药物与杂质对某一化学反应的差别，一 般是杂质与试剂反应，而药物不反应。第30页，讲稿共130张，创作于星期三一、杂质的研究规范 制药企业应该按照经国家药品监督管理部门依法审查批准的规定工艺和规定原辅料进行药品的生产，如果变更生产工艺或原辅料

19、，并因此而带进新的杂质，则需对原质量标准进行修订，并依法向有关药品监督管理部门申报批准。在新药的研发中，应该对新药中的杂质进行化学和安全性研究。杂质控制要合理地确定杂质检查项目与限度，合理地选择杂质检查方法。第31页，讲稿共130张，创作于星期三（一）有机杂质在药品质量标准中的项目名称 1、以杂质的化学名称作为项目名称 当被检查的杂质是已知化合物时(特定杂质)，就以该化合物的化学名称作为质量标准的项目名称；2、以某类杂质的总称作为项目名称 当杂质不能明确为单一物质而又为某一类物质时，则以这类物质总称作为项目名称。3、以检测方法作为项目名称 当被检查杂质的结构未知，亦不属于具体的类别时，可用“吸

20、光度”等，与检查方法相应的名称作为项目名称。第32页，讲稿共130张，创作于星期三（二）杂质检查项目的确定 杂质检查项目的确定要有针对性。药品标准中杂质检查项目应包括药物在质量研究和稳定性考察中检出的，并在批量生产中出现的杂质和降解产物。第33页，讲稿共130张，创作于星期三（三）杂质限度的确定P103 杂质限量的确定要合理，在确保用药安全有效的前提下，应考虑到：生产的可行性及比与比之间的正常波动；药品本身的稳定性可根据原料每日剂量来制订质控限度 第34页，讲稿共130张，创作于星期三 杂质限度制定时考虑的因素：杂质及含一定量杂质的药品的毒理学研究结果给药途径每日剂量治疗周期给药人群杂质药理学

21、可能的研究结果原料药的来源在保证安全有效的前提下，药品生产企业对生产高质量药品所需成本和消费者对药品价格的承受力，等第35页，讲稿共130张，创作于星期三 对于创新药物，杂质限度确定的依据主要是已进行的临床前安全性研究中获得的结果，通常是要求用于临床试验的样品杂质不得超过用于临床前安全性研究的样品；对于仿制药物，可根据已有的标准制订相应的杂质限度；对于其他新药，可参照创新药物或仿制药物的要求进行。第36页，讲稿共130张，创作于星期三（四）杂质检查方法的选择与验证检测方法包括：化学法 光谱法 色谱法等 因药物结构及杂质的不同采用不同的检测方法。有机杂质的检测方法多采用色谱法，特别是HPLC法、

22、TLC法。对检测方法的要求：专属、灵敏。二、杂质的常用检查方法 P104 第37页，讲稿共130张，创作于星期三（一）化学方法 当药物中杂质与药物的化学性质相差较大时，可选择合适的试剂，使之与杂质发生化学反应，产生颜色、气体、沉淀，从而检查杂质的限量。采用化学方法检查法可以对杂质进行：1、半定量检查2、可采用滴定法或重量法进行定量测定第38页，讲稿共130张，创作于星期三具体方法：P1041、显色反应检查法2、沉淀反应检查法3、生成气体检查法4、滴定法第39页，讲稿共130张，创作于星期三（二）色谱法 药物中的有机杂质，可能是已知的或未知的、挥发性或不挥发性的，其结构和性质往往和药物相近。如果

23、药物和杂质与某些试剂的反应相同或相似，或者它们的光谱特征相似，就难以用化学法或光谱法对杂质进行检查。色谱法可以利用药物与杂质的色谱性质的差异，能有效地将杂质与药物进行分离和检测，因而色谱法广泛应用于药物杂质的检查。一般是首选方法。第40页，讲稿共130张，创作于星期三1、TLC法优点：设备简单、操作简便、分离速度快 灵敏度和分辨率较高应用：药物中杂质的检查方法：（1）杂质对照品法 （2）供试品溶液自身稀释对照法 （3）杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法 （4）对照药物法注意：质量标准中应规定杂质的个数和限量第41页，讲稿共130张，创作于星期三（1）杂质对照品法适用范围：已知杂质并能制备

24、杂质对照品方法：根据杂质限量要求，取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液，分别点样于同一 薄层板，展开、斑点定位。供试品溶液除主斑点（有效成分）外的其他斑点（杂质斑点）与相应的杂质对照品溶液的相应主斑点进行比较。判断：根据中国药典要求，判断杂质限量例：P106第42页，讲稿共130张，创作于星期三（2）供试品溶液自身稀释对照法适用范围：杂质的结构不明确；虽然杂质的结构明确，但没有杂质对照品。要求：该方法仅限于杂质斑点颜色与主成分 斑点颜色相同或相近的情况下使用。方法：配制一定浓度的供试品溶液，取一定量，将其按 限量要求稀释至一定浓度作为对照溶液；将供试品溶液和对照溶液分别点于同一薄层板上，展开

25、、斑点定位。判断：供试品溶液所显杂质斑点与自身稀释对照溶液的相应 主斑点比较，不得更深。（该斑点是何物？）例：P106 第43页，讲稿共130张，创作于星期三（3）杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照 并用法 当药物中存在多个杂质时，如果有已知杂质的对照品，则采用杂质对照品法检查；共存的未知杂质或没有对照品的杂质，则同时采用供试品溶液自身稀释对照法检查P107 第44页，讲稿共130张，创作于星期三（4）对照药物法 无合适的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可采用与供试品相同的药物作为对照。对照药物中所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好。（间接法

26、）第45页，讲稿共130张，创作于星期三2、HPLC法优点：分离效能高、专属性强、检测灵敏 性好，可以准确测定各组分的峰面积 （定量）方法：（1）外标法 （2）加校正因子的主成分自身对照测定法 （3）不加校正因子的主成分自身对照法 （4）面积归一化法例：P108第46页，讲稿共130张，创作于星期三3、GC法 适用：测定药物中挥发性特殊杂质，特别 是药物中残留溶剂的检查第47页，讲稿共130张，创作于星期三（三）光谱方法依据：药物与药物中杂质对光选择吸收性 质差异进行。1、UV-VIS法2、IR法3、AAS法第48页，讲稿共130张，创作于星期三（四）其他方法1、热分析法P113（1）热重分析

27、 （2）差热分析（3）差示扫描热分析2、酸碱度检查法P1163、物理性状检查法P117第49页，讲稿共130张，创作于星期三第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 在原料药及其制剂的生产过程中，常用到酸、碱、在原料药及其制剂的生产过程中，常用到酸、碱、反应试剂、催化剂等，引入无机杂质。这些杂质的产生反应试剂、催化剂等，引入无机杂质。这些杂质的产生重要与生产工艺过程有关，可反映生产工艺情况，并直重要与生产工艺过程有关，可反映生产工艺情况，并直接影响药品的稳定性。接影响药品的稳定性。检查无机杂质对评价药品生产工艺的状况有重要检查无机杂质对评价药品生产工艺的状况有重要意义。意义。第50页

28、，讲稿共130张，创作于星期三一般杂质检查规则规定：（1）遵循平行操作原则 1)仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2 mm；砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致。砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致。2）对照品与供试品要同步操作）对照品与供试品要同步操作第51页，讲稿共130张，创作于星期三（2）依照中国药典，正确取样、供试 品的称量范围（3）依照中国药典，正确比色、比浊（4）检查结果不符合规定或在限度边缘时 应对供试管和对照管各复查两份第52页，讲稿共130张，创作于星期三一、氯化物的检查一、氯化物的检查1原理：是利用氯化物在硝酸性溶液中与硝酸银试液原理：是利用氯化物在硝

29、酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊液比较，以判断混浊液比较，以判断供试品中氯化物是否超供试品中氯化物是否超过限量。过限量。Cl-+Ag+AgCl（白）（白）第53页，讲稿共130张，创作于星期三 2 2条件：条件：ClCl-0.05mg 0.05mg0.08mg/50ml,0.08mg/50ml,即相当于标准即相当于标准 氯化钠溶液氯化钠溶液5 5mlml8ml8ml。酸度酸度 稀硝酸稀硝酸1010ml/50mlml/50ml。温度温度 30 3040

30、40 第54页，讲稿共130张，创作于星期三 3 3干扰的排除干扰的排除 （1 1）供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中）供试品液混浊：可用含硝酸的蒸馏水洗净氯纸中 氯化物后过滤来消除混浊对氯化氯化物后过滤来消除混浊对氯化 物检查的干扰。物检查的干扰。第55页，讲稿共130张，创作于星期三 （2 2）供试品有色：）供试品有色：可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。供供试试品品+AgNO3放置放置1010minmin澄澄清清溶溶液液+标准标准NaClNaCl+水水对对照照溶溶液液供供试试品品+AgNO3+水水供供试试品品溶溶液液暗处放置

31、暗处放置5 5minmin后比后比较较第56页，讲稿共130张，创作于星期三二、硫酸盐检查法二、硫酸盐检查法 1 1原理原理 是利用是利用SOSO4 42-2-在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用，在盐酸酸性溶液中与氯化钡试液作用，生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液 在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供试在相同条件下生成的硫酸钡浑浊液比较，以判断供试 品中硫酸盐是否超过限量品中硫酸盐是否超过限量。第57页，讲稿共130张，创作于星期三 2 2条件：条件：SOSO4 42-2-0.1mg 0.1mg0.5mg/50ml,0.5mg/5

32、0ml,即相当于标准即相当于标准 硫酸钾溶液硫酸钾溶液1 15 5mlml。酸酸 度度 稀盐酸稀盐酸2 2ml/50mlml/50ml。3 3干扰的排除干扰的排除 供试品有色：可采用内消色法。供试品有色：可采用内消色法。第58页，讲稿共130张，创作于星期三 三、铁盐检查法三、铁盐检查法 （一）硫氰酸盐法（一）硫氰酸盐法 1 1原理原理 FeFe3+3+6SCN+6SCN-Fe(SCN)Fe(SCN)6-6-3-3-红色红色 2 2条件：条件：FeFe3+3+0.01mg 0.01mg0.05mg/50ml,0.05mg/50ml,即相当于标准铁即相当于标准铁 溶液溶液1 15 5mlml。酸

33、酸 度度 稀盐酸稀盐酸4 4ml/50mlml/50ml。HCl第59页，讲稿共130张，创作于星期三 3 3干扰的排除干扰的排除 （1 1）当有当有FeFe2+2+存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化存在时，加氧化剂过硫酸铵氧化FeFe2+2+成成FeFe3+3+。（2 2）当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的当供试液管与对照溶液管色调不一致，或所呈硫氰酸铁的 颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇颜色较浅不便比较时，可分别移入分液漏斗中，加正丁醇 或异戊醇提取，分别取提取液比色。因或异戊醇提取，分别取提取液比色。因硫氰酸铁离子在正丁醇等溶剂硫氰酸铁离子在正丁醇等溶剂中中溶

34、解度大，故能增加颜色深度，且能排除某些干扰物质的影响。溶解度大，故能增加颜色深度，且能排除某些干扰物质的影响。第60页，讲稿共130张，创作于星期三 (二）巯基醋酸法二）巯基醋酸法 1.原理原理 巯基醋酸还原巯基醋酸还原Fe3+为为Fe2+，在氨碱性试液中与在氨碱性试液中与Fe 2+作用生成红色配位离子。作用生成红色配位离子。2Fe3+2HSCH2COOH 2Fe2+SCH2COOH+2H+SCH2COOH Fe2+2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 +H+Fe(SCH2COOH)2 Fe(SCH2COOH)2 2-+2H2O 2OH-第61页，讲稿共130张，创作于星期三 2.

35、2.说明说明 在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液，使其与铁离在加巯基醋酸溶液前，先加枸橼酸溶液，使其与铁离 形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉形成配位离子，以免在氨碱性溶液中产生氢氧化铁沉 淀。（此法灵敏度比较高，但试剂较贵）淀。（此法灵敏度比较高，但试剂较贵）第62页，讲稿共130张，创作于星期三四、重金属检查法四、重金属检查法 重金属影响药物稳定性和安全性重金属影响药物稳定性和安全性 重金属是指在实验室条件下与硫代乙酰胺或重金属是指在实验室条件下与硫代乙酰胺或S S2-2-作用显色的金作用显色的金属杂质属杂质.如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的如银、

36、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内容易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表机会比较多，铅在体内容易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表,以铅的限以铅的限量表示重金属限度量表示重金属限度.（实验条件主要指溶液的（实验条件主要指溶液的P PH H，因为，因为溶液的溶液的PH直接影响重金属与显色剂反应直接影响重金属与显色剂反应是否完全，从而影响测定的准确度）是否完全，从而影响测定的准确度）第63页，讲稿共130张，创作于星期三中国药典（中国药典（20201010年版）重金属的检查法规定了三种方法年版）重金属的检查法规定了三种方法 第一法为硫代乙酰胺法；第一法为硫代乙酰胺

37、法；第二法是将供试品在第二法是将供试品在500600炽灼破坏后，再按第一法检查；炽灼破坏后，再按第一法检查；第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条第三法是检查能溶入碱溶液，而不溶于酸溶液的药物，在碱性条 件下用硫化钠作显色剂；件下用硫化钠作显色剂；第64页，讲稿共130张，创作于星期三 第一法硫代乙酰胺法第一法硫代乙酰胺法1 1、原理、原理 CHCH3 3CSNHCSNH2 2+H+H2 2O CHO CH3 3CONHCONH2 2+H+H2 2S S 合格合格 H H2 2S +PbS +Pb2+2+PbS PbS +2H+2H+2 2条件条件：PbPb2+2+10g10

38、g20g/27ml,20g/27ml,相当于标准铅溶液相当于标准铅溶液1 12 2mlml。酸酸 度度 pH 3.0pH 3.03.5.3.5.合格合格 第65页，讲稿共130张，创作于星期三3 3干扰的排除干扰的排除 (1)(1)供试品有色：可采用外消色法消除干扰。供试品有色：可采用外消色法消除干扰。(2)(2)供试品有微量供试品有微量FeFe3+3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氢析在弱酸性溶液中氧化硫化氢析 出硫，产生混浊影响比色，可出硫，产生混浊影响比色，可 加加VcVc或盐酸羟胺使或盐酸羟胺使FeFe3+3+氧化成氧化成 Fe Fe2+2+离子再检查。离子再检查。其他两种方法见其他两种方法

39、见P P122122 第66页，讲稿共130张，创作于星期三五、砷盐检查法五、砷盐检查法 中国药典采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银中国药典采用古蔡法和二乙基二硫代氨基甲酸银法（法（Ag-DDCAg-DDC）检查药物中的微量的砷盐。检查药物中的微量的砷盐。（一）古蔡法一）古蔡法Gutzeit)Gutzeit)(BP也采用此法）也采用此法）1.原理原理 As3+3Zn+3H+3Zn2+AsH3 AsO33-+3Zn+9H+3Zn2+3H2O+AsH3 AsO43-+4Zn+11H+4Zn2+4H2O+AsH3 AsH3 +3HgBr2 3HBr+As(HgBr)3(棕色棕色)2As(HgBr)3

40、 +AsH3 3 AsH(HgBr)2 (黄色黄色)As(HgBr)3 +AsH3 3HBr+As2Hg3 (棕黑色棕黑色)第67页，讲稿共130张，创作于星期三 2.装置与试剂作用装置与试剂作用 (1)(1)验砷仪验砷仪 砷化氢发生瓶砷化氢发生瓶;中空磨口塞中空磨口塞;导气管导气管 (2)(2)试剂的作用试剂的作用 合格合格 KI-SnClKI-SnCl2 2的作用：交替还原作用；首先将的作用：交替还原作用；首先将AsO43-还还 原成原成AsO33-，生成的碘再被还原成碘离子。即生成的碘再被还原成碘离子。即:将将五价砷还原成三价砷五价砷还原成三价砷(五价砷与氢反应较慢五价砷与氢反应较慢)第

41、68页，讲稿共130张，创作于星期三 AsO43-+2I-+2H+AsO33-+I2 +H2O AsO43-+Sn2+2H+AsO33-+Sn4+H2O I2 +Sn2+2I-+Sn4+4I-+Zn2+ZnI42-由于碘离子的存在由于碘离子的存在,与锌离子形成配合物与锌离子形成配合物,有利于有利于 AsH3 气体生成气体生成.第69页，讲稿共130张，创作于星期三 ZnZn粒与氯化亚锡作用，在其面上形成粒与氯化亚锡作用，在其面上形成Zn-SnZn-Sn齐，起极化作齐，起极化作用用,从而使氢气均匀而连续地发生从而使氢气均匀而连续地发生.极化极化:当电流通过电解池或电池时当电流通过电解池或电池时,

42、使电极电位改变并产生一使电极电位改变并产生一反电动势的现象反电动势的现象.第70页，讲稿共130张，创作于星期三1、Pb(AC)Pb(AC)2 2棉太紧影响砷化氢气体通过；太松，硫化氢也通过棉太紧影响砷化氢气体通过；太松，硫化氢也通过起不到作用。起不到作用。2 2、硫化氢来源：锌及供试品中可能含有少量硫化物，在酸性、硫化氢来源：锌及供试品中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中产生硫化氢气体溶液中产生硫化氢气体 Pb(AC)Pb(AC)2 2棉的作用：棉的作用：是消除供试品可能含有的少量的硫化物。是消除供试品可能含有的少量的硫化物。S S2-2-+2H+2H+H H2 2S S H H2 2S+Hg

43、BrS+HgBr2 2 2HBr +HgS 2HBr +HgS（汞斑）汞斑）H H2 2S +Pb(AC)S +Pb(AC)2 2 PbS +2HAC PbS +2HAC第71页，讲稿共130张，创作于星期三 3.干扰的排除干扰的排除 （1）供试品为）供试品为S2-,SO32-,S2O32-等等:因在酸中生成因在酸中生成H2S,SO2,与与 HgBr HgBr作用生成作用生成HgSHgS或或HgHg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫 酸盐可消除。酸盐可消除。（2）供试品为）供试品为Fe3+能消耗能消耗KI，SnCl2 应测定条件，先可加足应测定条件，先可加足 量量KI。

44、第72页，讲稿共130张，创作于星期三 （3）含锑药物）含锑药物 锑盐被还原为锑盐被还原为SbH3与与HgBr2试纸作用，产生灰色试纸作用，产生灰色 锑斑，干扰砷斑的检查，可改用锑斑，干扰砷斑的检查，可改用Betterdorff法。法。白田道夫法原理：白田道夫法原理：As3SnCl2HClAsSnCl4H棕褐色的胶态砷棕褐色的胶态砷第73页，讲稿共130张，创作于星期三（二）二）Ag-DDCAg-DDC法法(二乙基二硫代氨基甲酸银，二乙基二硫代氨基甲酸银，USPUSP采用此法采用此法)1.1.原理：是利用砷化氢与原理：是利用砷化氢与Ag-DDCAg-DDC吡啶溶液作用，使吡啶溶液作用，使Ag-

45、DDCAg-DDC中的中的 银还原为红色胶态银，以银还原为红色胶态银，以Ag-DDCAg-DDC溶液为空白，于溶液为空白，于510510nmnm 的波长处，测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大的波长处，测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大 于标准砷溶液的吸收度。于标准砷溶液的吸收度。2.2.试剂的作用：同古蔡法。试剂的作用：同古蔡法。第74页，讲稿共130张，创作于星期三六、溶液颜色检查法六、溶液颜色检查法 溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典溶液颜色检查法是控制药物中有色杂质量的方法。中国药典 （20201010年版）收载有三种方法：年版）收载有三种方法：K K2 2CrCr

46、2 2O O7 7 黄、绿黄、绿 1.1.标准比色液进行比较的方法标准比色液进行比较的方法 标准比色液标准比色液 CoClCoCl2 2 橙黄橙黄,橙红橙红 2.2.分光光度法分光光度法 CuSOCuSO4 4 蓝色蓝色 3.3.色差计法色差计法 通过测定供试品与标准比色液或水之间的色差值通过测定供试品与标准比色液或水之间的色差值第75页，讲稿共130张，创作于星期三用分光光度法注意事项用分光光度法注意事项1 1、药品溶液有色时，杂质检查测定波、药品溶液有色时，杂质检查测定波长的选择长的选择2 2、溶剂的选择、溶剂的选择第76页，讲稿共130张，创作于星期三七、易炭化物检查法七、易炭化物检查法

47、 是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，用硫酸呈色的方法简单控制其含量质。这类杂质多数结构未知，用硫酸呈色的方法简单控制其含量.常采用与标准常采用与标准 比色液比色的方法进行检查。比色液比色的方法进行检查。标准比色液为标准比色液为CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4第77页，讲稿共130张，创作于星期三注意事项：注意事项：1、供试品为固体，应先研成细粉。如需加热才、供试品为固体，应先研成细粉。如需加热才能溶解时，可将供试品与硫酸混合均匀，加能溶解时，可将供试品与硫酸混合均匀，加热溶解后，放冷至室温，再转移

48、置比色管中。热溶解后，放冷至室温，再转移置比色管中。2、操作时，应严格控制硫酸浓度、反应温度及、操作时，应严格控制硫酸浓度、反应温度及时间。因易炭化合物与硫酸呈现的颜色与上时间。因易炭化合物与硫酸呈现的颜色与上述因素有关。述因素有关。第78页，讲稿共130张，创作于星期三 是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊是检查药物中的微量不溶性杂质。常采用与浊 度标度标准液比浊的方法进行检查。浊准液比浊的方法进行检查。浊 度标准液制备原理：度标准液制备原理：(CH2)6N4 +6H2O 6HCHO +4NH3 HCHO +H2N-NH2 H2C=N-NH2 +H2O 甲醛腙白色混浊甲醛腙白色混浊 不同

49、级号浊度标准液不同级号浊度标准液 级 号 0.5 1 2 3 4浊度标准原液（ml）2.5 5.0 10.0 30.0 50.0水 （ml）97.5 95.0 90.0 70.0 50.0八、溶液澄清度检查法八、溶液澄清度检查法第79页，讲稿共130张，创作于星期三1 1、标准浊度溶液的影响因素、标准浊度溶液的影响因素温度：在低温（温度：在低温（11）反应不能进行，不产生沉淀；高）反应不能进行，不产生沉淀；高 温形成的浊温形成的浊度稍低。因此，药典规定反应温度为度稍低。因此，药典规定反应温度为251251放置时间：硫酸肼溶液配制后，应放置放置时间：硫酸肼溶液配制后，应放置4-64-6小时，然后

50、再与乌小时，然后再与乌洛托品反应。溶液不放置，制得的标准浊度溶液浑浊不稳定。洛托品反应。溶液不放置，制得的标准浊度溶液浑浊不稳定。湿度：各地的相对湿度不同，而试剂的含水量可直接影响溶液的浓度。湿度：各地的相对湿度不同，而试剂的含水量可直接影响溶液的浓度。因此，试剂应先经硅胶干燥剂干燥因此，试剂应先经硅胶干燥剂干燥24h24h后使用为佳。后使用为佳。储存期：应置凉处避光储存。按规定储存期使用，浊度无明储存期：应置凉处避光储存。按规定储存期使用，浊度无明显变化。显变化。2 2、对于带乳浊色供试液的澄清度检查，不能用本法。应该用氯化钠与硝、对于带乳浊色供试液的澄清度检查，不能用本法。应该用氯化钠与硝