酵母菌的形态观察大小测定和直接计数.ppt
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1、关于酵母菌的形态观察大小测定和直接计数现在学习的是第1页,共26页 目的要求:目的要求:1、观察酵母菌的形态及出芽生殖,学习区分酵母菌、观察酵母菌的形态及出芽生殖,学习区分酵母菌 死活细胞的实验方法。死活细胞的实验方法。2、学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法。3、掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。、掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。现在学习的是第2页,共26页1、基本原理:、基本原理:酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,大多数酵母菌以出芽方式酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,大多数酵母菌以出芽方式进行无性繁殖,有性繁殖通过接合产生子囊孢子。
2、进行无性繁殖,有性繁殖通过接合产生子囊孢子。美蓝是一种无毒性的染料。它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝是一种无毒性的染料。它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此酵母活细胞是无色的,而死细胞或衰老细胞则呈蓝还原型。因此酵母活细胞是无色的,而死细胞或衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,以此进行鉴别。色或淡蓝色,以此进行鉴别。现在学习的是第3页,共26页美蓝浸片的观察:美蓝浸片的观
3、察:(1)在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液,用滴管取1滴酵母菌菌液于染液中,混合均匀。(2)加盖玻片。注:不要产生气泡注:不要产生气泡。(3)将制片放置约3min后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况,并根据颜色区别死、活细胞。现在学习的是第4页,共26页(4)染色约0.5h后再次进行观察,注意死细胞数量是否增加。(5)绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征,并计算0.5h后酵母菌的死亡率。现在学习的是第5页,共26页酵母菌现在学习的是第6页,共26页v1、基本原理、基本原理v 微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。微生物大小的测定需借助
4、测微尺-目镜测微尺和镜台测微尺。现在学习的是第7页,共26页现在学习的是第8页,共26页现在学习的是第9页,共26页镜台测微尺:镜台测微尺:是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将1mm等分为100小格,每格长0.01mm。用于校正目镜测微尺每格的相对长度。目镜测微尺:目镜测微尺:是一块可放入接目镜内的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,测量时,需要将其放在接目镜中的隔板上,用以测量经显微镜放大后的细胞物象。现在学习的是第10页,共26页v 由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同,目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。因此,用目镜测微尺测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正校
5、正,以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度,然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数,计算出细胞的实际大小。v 球菌用直径来表示其大小;杆菌则用宽和长的范 围来表示。现在学习的是第11页,共26页v(1)装目镜测微尺)装目镜测微尺(换目镜换目镜)v把目镜上的透镜旋下,将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上,然后旋上目镜透镜,再将目镜插入镜筒内。v(2)校正目镜测微尺:)校正目镜测微尺:v1)放镜台测微尺:将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。现在学习的是第12页,共26页v2)校正:先用低倍镜观察,将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央,调节焦距,当
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