临床微生物标本的采集方法与运送精选PPT.ppt
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1、关于临床微生物标本的采集方关于临床微生物标本的采集方法与运送法与运送第1页,讲稿共72张,创作于星期一我们应该追求:我们应该追求:“准确的病原学诊断准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送,是准正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提!确的病原学诊断的前提!微生物让人类步步为营,微生物让人类步步为营,第2页,讲稿共72张,创作于星期一基本原则基本原则1.1.及时采集微生物标本作病原学检查及时采集微生物标本作病原学检查2.2.在抗菌药物使用前采集标本在抗菌药物使用前采集标本3.3.采样时严格执行无菌操作采样时严格执行无菌操作4.4.采样后立即送
2、检采样后立即送检5.5.棉拭子标本宜用运送培养基棉拭子标本宜用运送培养基6.6.混有正常菌群污染标本,不可置肉汤培养混有正常菌群污染标本,不可置肉汤培养7.7.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂。标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂。8.8.送检标本应注明来源和检验目的送检标本应注明来源和检验目的第3页,讲稿共72张,创作于星期一如何提高细菌阳性检出率?如何提高细菌阳性检出率?n标本采集时机标本采集时机n标本采集方法标本采集方法n标本的质与量标本的质与量n标本的运送与保存标本的运送与保存n镜检筛选合格标本(退检制度)镜检筛选合格标本(退检制度)n高质量、多种分离培养基高质量、多种分离培养基n
3、培养环境培养环境n合理的收费制度合理的收费制度第4页,讲稿共72张,创作于星期一血培养标本血培养标本采集与运送第5页,讲稿共72张,创作于星期一最新的指导原则最新的指导原则浙江省临床实验室血培养指导原则浙江省临床实验室血培养指导原则和操作指南(试行)和操作指南(试行)n浙江省医学会医学检验分会n浙江省临床检验中心n浙江省医院感染管理质控中心n浙江省临床细菌耐药监控中心n浙江省护理学会第6页,讲稿共72张,创作于星期一血培养的采集时间血培养的采集时间n对怀疑菌血症、真菌血症的患者,在考虑使用抗菌药物之前,应立即采集血培养标本。n必须同时或间隔短时间内采集套以上血培养标本。第7页,讲稿共72张,创
4、作于星期一血培养的采集次数血培养的采集次数n患者:推荐同时采集套(不同部位)血培养标本。(即双瓶双臂同时采集血培养标本。)n婴幼儿患者:推荐同时采集次(不同部位)血培养标本。第8页,讲稿共72张,创作于星期一血培养的采血量血培养的采血量n成年患者:推荐采血量为每套不少于10ml,每瓶不少于5ml。n婴幼儿患者:推荐采血量每瓶不少于2ml。(少于病人总血容量的1%)第9页,讲稿共72张,创作于星期一血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配n常规血培养组合:一个需氧瓶和一个厌氧瓶作为一套血培养。n当被用来做培养的采血量少于推荐值时,血必须首先接种需氧瓶,然后将剩余的血液接种
5、入厌氧瓶。第10页,讲稿共72张,创作于星期一皮肤消毒皮肤消毒n推荐使用碘町、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。n碘町作用1minn碘伏作用1.5-2minn洗必泰作用时间与碘町一样(但不能用于少于2个月婴儿皮肤消毒)第11页,讲稿共72张,创作于星期一采集部位采集部位n推荐从外周静脉采集血液标本。n不推荐动脉血,因其诊断价值没有比静脉血更大。n不推荐静脉留置导管,因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血,也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。第12页,讲稿共72张,创作于星期一采集方法采集方法n在采血之前,血培养瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再进行穿
6、刺部位的皮肤消毒。n严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作,并等待足够的消毒时间。n严格无菌操作,不允许在皮肤消毒后用手接触静脉,除非带有无菌手套。n不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头。第13页,讲稿共72张,创作于星期一血培养标本的运送血培养标本的运送n采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。n血培养瓶在采血接种后在室温不超过数小时。n血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。第14页,讲稿共72张,创作于星期一血培养标本的拒收血培养标本的拒收n瓶子上帖的标签错误或未帖标签。n血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。n血液凝固。第15页,讲稿共72张,创作于星期一培养基的选择培养基的选
7、择n推荐使用商品化的培养基n使用添加抗菌药物吸附剂的血培养瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗患者血培养的检出率,增加细菌的分离率和分离速度,但同时也会增加污染菌的检出率。第16页,讲稿共72张,创作于星期一真菌血培养真菌血培养n真菌血培养采用需氧血培养瓶采集标本。n采用中和/灭活抗菌药物的血培养瓶可提高真菌的检出率。n自动化血培养系统不能用于双相真菌的检测。第17页,讲稿共72张,创作于星期一婴幼儿血培养婴幼儿血培养n推荐同时采集2次(不同部位)血培养标本。n采血量每瓶不少于2ml。(少于病人总血容量的1%)n推荐采用儿童专用血培养瓶。第18页,讲稿共72张,创作于星期一分枝杆菌血培养分枝杆菌血培
8、养n必须采用特殊的商品化分枝杆菌血培养瓶。n所有培养基都必须孵育至少4周。第19页,讲稿共72张,创作于星期一感染性细菌性心内膜炎感染性细菌性心内膜炎n急性:在经验性抗生素用药前30min之内采集血培养。n亚急性:在30分钟至1小时之内连续抽取数套血培养。n最初采集3套血培养。n假如这些血培养在24小时之内结果是阴性的,再采集2套血培养,总共5套。第20页,讲稿共72张,创作于星期一导管相关的血流感染导管相关的血流感染n短期外周导管:通过静脉穿刺获得病人的两套外周血培养。无菌操作拔去导管并半定量培养。n中心静脉导管及静脉留置口:至少两套血培养,其中至少一套采集自外周血静脉,另一套应该从导管口或
9、VAP隔膜无菌采集,两套血培养采集时间应相近。第21页,讲稿共72张,创作于星期一痰培养标本痰培养标本采集与运送第22页,讲稿共72张,创作于星期一病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题使下呼吸道感染病原诊断成为难题n细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌)细菌(包括放线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌)n真菌(包括肺孢子菌)真菌(包括肺孢子菌)n病毒病毒n支原体、衣原体与立克次体支原体、衣原体与立克次体n原虫原虫n寄生虫寄生虫第23页,讲稿共72张,创作于星期一咳痰途经口咽部n唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。n研究显示,国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象
10、。不可避免地受到污染不可避免地受到污染第24页,讲稿共72张,创作于星期一我国痰细菌培养现状我国痰细菌培养现状n标本送检率低n苛养菌检出率极低n结果重复性差n报告速度慢n感染菌与污染菌不易区分n药敏结果与治疗反应存在差距第25页,讲稿共72张,创作于星期一下呼吸道感染病原学诊断注意事项下呼吸道感染病原学诊断注意事项n痰标本的正确采集(包括导痰)n痰标本及时运送和处理的重要性n痰标本的洗涤与匀化n痰涂片:质量评估和细菌、真菌初步报告n接种平板:质量与质控,血、巧克力、麦康凯、沙保弱n培养环境:CO2n培养时间:24h,48hn菌落观察要点n结果报告:所有菌种(群),包括半定量n临床意义判定n其他
11、病原体的检测:结核、真菌、厌氧菌、非典型病原体第26页,讲稿共72张,创作于星期一咳痰标本的采集咳痰标本的采集n标本采集方法标本采集方法n医师或护士直视下采集标本医师或护士直视下采集标本n病人先漱口,去除表面的菌群病人先漱口,去除表面的菌群n教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液教育病人深咳,收集从下呼吸道咳出的痰液n临床上约半数咳痰标本不合格!临床上约半数咳痰标本不合格!第27页,讲稿共72张,创作于星期一关于咳痰标本关于咳痰标本n在抗生素应用前采集痰标本在抗生素应用前采集痰标本;n标本采集后标本采集后12h内必须立即进行实验室处理;内必须立即进行实验室处理;n咳痰标本应用最早且广泛,但也是
12、最受争议的标本咳痰标本应用最早且广泛,但也是最受争议的标本;n取标本前应摘去牙托,清洁口腔如刷牙和漱口取标本前应摘去牙托,清洁口腔如刷牙和漱口;n深咳,采集标本过程中要有专业的医务人员指导深咳,采集标本过程中要有专业的医务人员指导;n无痰可用无痰可用35NaCl 5ml雾吸约雾吸约5min导痰;导痰;n也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰;也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰;第28页,讲稿共72张,创作于星期一5种筛选标准判断种筛选标准判断14001份痰标本合份痰标本合格率比较格率比较合格合格不合格不合格不能归类不能归类标本数标本数率率标本数标本数率率标本数标本数率率标准标准
13、1474033.9925366.1*80.1标准标准2358325.611097.9*930966.5标准标准3483234.5916965.5标准标准4911565.1488634.9标准标准5637845.6762354.4注:标准2:卫生部医政局全国临床检验操作规程第29页,讲稿共72张,创作于星期一咳痰标本不合格,退检吗?咳痰标本不合格,退检吗?n如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于2525个,个,白细胞小于白细胞小于1010个,应不做或仅在特殊要个,应不做或仅在特殊要求时做培养。求时做培养。n如做培养,报告中注明如做培养,报告中注明“镜检结果表明镜检结果表明标
14、本口咽分泌物污染明显标本口咽分泌物污染明显”。第30页,讲稿共72张,创作于星期一几种下呼吸道直接采集的标本几种下呼吸道直接采集的标本n经气管穿刺吸引(经气管穿刺吸引(transtracheal aspiration,TTA)n经胸壁针刺吸引(经胸壁针刺吸引(transthoracic needle aspiration,TNA)n经支气管镜采样经支气管镜采样 n支气管肺泡灌洗(支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage,BAL)n经支气管镜直接吸引经支气管镜直接吸引n防污染样本毛刷(防污染样本毛刷(protective specimen brush,PSB)n开胸肺活检(开
15、胸肺活检(open-lung biopsy,OLB)n经人工气道吸引分泌物(经人工气道吸引分泌物(endotracheal aspirates,ETA)第31页,讲稿共72张,创作于星期一痰培养的送检次数痰培养的送检次数n对于普通细菌性肺炎,对于普通细菌性肺炎,痰标本送检每天痰标本送检每天1次,连续次,连续23天。天。不建议不建议24h内多次采内多次采集,除非痰液外观性状出现改变;集,除非痰液外观性状出现改变;n怀疑分枝杆菌感染者,应连续收集怀疑分枝杆菌感染者,应连续收集3天清天清晨痰液送检;晨痰液送检;n怀疑军团菌或深部真菌感染,痰标本理怀疑军团菌或深部真菌感染,痰标本理想的送检次数尚无定论
16、。想的送检次数尚无定论。第32页,讲稿共72张,创作于星期一痰培养的运送和保存痰培养的运送和保存n尽快(2h)送至实验室。n如不能及时送达,应将标本暂存于4,但放置时间不可超过24h。n厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。n被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。第33页,讲稿共72张,创作于星期一痰培养的拒收痰培养的拒收n光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显。n没有标签或贴错标签。n运送容器选择不当或有渗漏。n标本采集不符合要求。n同一天同一试验重复送检2次。n延时送至实验室的标本。第34页,讲稿共72张,创作于星期一尿培养标本尿培养标本采集与运送第35页,讲稿共72张,
17、创作于星期一你知道吗?你知道吗?n尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物,但是尿道内或尿道周围皮肤的菌尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物,但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本,从而可能导致错误的培养结果。群会污染尿液标本,从而可能导致错误的培养结果。n诊断症状明显的病人(如尿急、尿频、尿痛),一份标本就已足够,治诊断症状明显的病人(如尿急、尿频、尿痛),一份标本就已足够,治疗疗48-7248-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人,需采集小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人,需采集2-32-3份标本。怀疑肾结核时,应连续份标本。怀疑肾结核时,应连续3 3天采集晨尿。天
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