基因工程及其应用 优秀PPT.ppt
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1、基因工程及其应用 第1页,本讲稿共51页能发能发荧光荧光的热的热带斑带斑马鱼马鱼普通热带斑马鱼是不发荧光的普通热带斑马鱼是不发荧光的第2页,本讲稿共51页转鱼抗寒基转鱼抗寒基因的番茄因的番茄转基因鲑转基因鲑鱼鱼同时具有高同时具有高产、稳产和产、稳产和抗逆性等优抗逆性等优良品质的农良品质的农作物新品种作物新品种.抗虫害的玉米抗虫害的玉米第3页,本讲稿共51页问题探讨问题探讨讨论:讨论:讨论:讨论:1 1 1 1、为什么把人的胰岛素、为什么把人的胰岛素、为什么把人的胰岛素、为什么把人的胰岛素基因转入到细菌中基因转入到细菌中基因转入到细菌中基因转入到细菌中能表达产生胰岛素?能表达产生胰岛素?能表达产
2、生胰岛素?能表达产生胰岛素?2 2 2 2、你猜猜怎样才能把人胰、你猜猜怎样才能把人胰、你猜猜怎样才能把人胰、你猜猜怎样才能把人胰岛素基因转入到大肠杆菌岛素基因转入到大肠杆菌岛素基因转入到大肠杆菌岛素基因转入到大肠杆菌中去?中去?中去?中去?转入人胰岛素基因的大肠杆菌转入人胰岛素基因的大肠杆菌转入人胰岛素基因的大肠杆菌转入人胰岛素基因的大肠杆菌所有的生物共用一所有的生物共用一套遗传密码。套遗传密码。套遗传密码。套遗传密码。第4页,本讲稿共51页基因工程:基因工程:又叫做又叫做基因拼接技术基因拼接技术或或DNADNA重组技术重组技术。通俗。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取的
3、说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定定向向地改造生物的地改造生物的遗传性状遗传性状。目的基因目的基因供体细胞供体细胞受体细胞受体细胞获得新性状获得新性状(人的细胞)(人的细胞)(大肠杆菌)(大肠杆菌)第5页,本讲稿共51页人的细胞人的细胞DNA基因基因基因基因A A A A人胰岛人胰岛人胰岛人胰岛素基因素基因素基因素基因基因基因基因基因B B B BT TGGC CT TC CT TGGGGT TGGA AA AT TT TC CGGA AC CGGA AA AT TGGC CA AC
4、 CA AC CT TT TA AA AGGC CGGC CT TT TA AA AGGC C人的胰岛素基因怎样提取?人的胰岛素基因怎样提取?第6页,本讲稿共51页一、基因工程的基本工具一、基因工程的基本工具(1 1)基因的)基因的“剪刀剪刀”:限制性核酸内切酶(限制酶):限制性核酸内切酶(限制酶)G A A T T C C T T A A G 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割并在特定的切点上切割DNADNA分子。分子。如如:EcoRI限制酶限制酶大肠杆菌的一种大肠杆菌的一种ECORIECORI限制酶限制酶识别识别GAATTC
5、GAATTC序列序列,并在并在G G和和A A之间切开之间切开)。)。第7页,本讲稿共51页一、基因工程的基本工具一、基因工程的基本工具(1 1)基因的)基因的“剪刀剪刀”:限制性核酸内切酶:限制性核酸内切酶C T T A AGG A A T T C C T T A A G A A T T C G黏性末端黏性末端产生黏性未端(碱基互补配对)。产生黏性未端(碱基互补配对)。特异性,即识别特定核苷酸序列,特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点。切割特定切点。黏性末端黏性末端1 1、作用特点:、作用特点:2 2、结果:、结果:第8页,本讲稿共51页如果几个如果几个DNADNA分之被同一种限制酶切
6、断的分之被同一种限制酶切断的是否具有相同的黏性末端?是否具有相同的黏性末端?思考思考:是是第9页,本讲稿共51页GAATTCCGTAGAATTCGGATT GAATTCCGTAGAATTCGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA CATCTCATCTATCATC尝试写出下列序列受尝试写出下列序列受EcoRIEcoRI限制酶作用后的黏性末端限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT GTAGAGTAGATAGTAGCTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT
7、GGCATCTTAAAATTCCGTAG 如果把两种来源不同的如果把两种来源不同的DNADNA用同一种限制酶来切割,会用同一种限制酶来切割,会怎样呢?怎样呢?第10页,本讲稿共51页CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 如果把两种来源不同的如果把两种来源不同的DNADNA用同一种限制酶来切割,会用同一种限制酶来切割,会怎样呢?怎样呢?会产生相同的黏性末端,末端可以相互黏合,这会产生相同的黏性末端,末端可以相互黏合,这种黏合只能使互补的碱基连接起来。种黏合只能使互补的碱基连接起来。脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的脱氧核
8、糖和磷酸交替连接而构成的DNA骨架缺口并未缝合?骨架缺口并未缝合?第11页,本讲稿共51页、基因的针线、基因的针线DNADNA连接酶连接酶DNADNA连接酶的作用是连接酶的作用是:脱氧核糖和磷酸交替脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的连接而构成的DNA骨架缺口骨架缺口缝合缝合。这样得到的这样得到的DNA分子是一个重组分子是一个重组DNA分子!分子!DNADNA连接酶连接酶DNADNA连接酶连接酶第12页,本讲稿共51页人的细胞人的细胞DNAA A2 2、要得到人胰岛素基因必须要用限制、要得到人胰岛素基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端酶切几个切口?可产生几个黏性末端?T TGGC CT
9、TC CT TGGGGT TGGA AA AT TT TC CGGA AC CGGA AA AT TGGC CT TA AC CA AC CT TT TA AA AGGC CGGC CT TT TA AA AGGC C要切两个切口,产生四个黏性末端。要切两个切口,产生四个黏性末端。第13页,本讲稿共51页人的细胞人的细胞DNA3、如何将目的基因导入受体细胞?、如何将目的基因导入受体细胞?这需要专门的运输工具,这就是运载体!这需要专门的运输工具,这就是运载体!第14页,本讲稿共51页你知道哪些可以当作运载体吗?你知道哪些可以当作运载体吗?常用的运载体有常用的运载体有质粒、噬菌体质粒、噬菌体和和动
10、植物病毒动植物病毒等。等。你知道质粒存在于哪些生物中吗?你知道质粒存在于哪些生物中吗?细菌细菌、以及、以及酵母菌酵母菌等生物中等生物中第15页,本讲稿共51页人的细胞人的细胞DNA质粒质粒质粒质粒是存在于是存在于细菌细菌细菌细菌细细胞质中独立于染色体胞质中独立于染色体而自主复制的环状双而自主复制的环状双链链DNADNA分子分子。A AT TC CA AT TGGA AGGT TC CA AC CT TA AGGT T标记基因标记基因标记基因标记基因如何将目的基因和运载体结合?如何将目的基因和运载体结合?首先将运载体取出。首先将运载体取出。第16页,本讲稿共51页人的细胞人的细胞DNAA AT
11、TC CA AT TGGA AGGT TC CA AC CT TA AGGT T1 1、用什么限制酶切?、用什么限制酶切?、用什么限制酶切?、用什么限制酶切?2 2、为什么要用同一种限制酶切?、为什么要用同一种限制酶切?、为什么要用同一种限制酶切?、为什么要用同一种限制酶切?将运载体取出将运载体取出切出相同的黏性末端,切出相同的黏性末端,切出相同的黏性末端,切出相同的黏性末端,刚好能碱基互补配对。刚好能碱基互补配对。用同种限制酶切。用同种限制酶切。第17页,本讲稿共51页这样得到的这样得到的DNADNA分子称为分子称为分子称为分子称为 。人胰岛素基因人胰岛素基因人胰岛素基因人胰岛素基因DNAD
12、NA连接酶连接酶连接酶连接酶(重组质粒重组质粒重组质粒重组质粒)重组重组重组重组DNADNA分子分子分子分子把目的基因插入运载体需把目的基因插入运载体需把目的基因插入运载体需把目的基因插入运载体需要什么工具酶?连接什么部位?要什么工具酶?连接什么部位?要什么工具酶?连接什么部位?要什么工具酶?连接什么部位?DNADNADNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶连接脱氧核糖和磷酸交替连连接脱氧核糖和磷酸交替连连接脱氧核糖和磷酸交替连连接脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的接而构成的接而构成的接而构成的DNADNA骨架上的缺口。骨架上的缺口。骨架上的缺口。骨架上的缺口。第18页,本讲稿共51页抗生素抗性基因抗
13、生素抗性基因抗生素抗性基因抗生素抗性基因人胰岛素基因人胰岛素基因人胰岛素基因人胰岛素基因将重组将重组将重组将重组DNADNA导入受体细胞导入受体细胞导入受体细胞导入受体细胞4 4、如何检测目的基因是否导入受体细胞中?、如何检测目的基因是否导入受体细胞中?、如何检测目的基因是否导入受体细胞中?、如何检测目的基因是否导入受体细胞中?根据受体细胞中是否具有标记基因表现出的性状,根据受体细胞中是否具有标记基因表现出的性状,来判断目的基因是否导入。来判断目的基因是否导入。来判断目的基因是否导入。来判断目的基因是否导入。用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重
14、组质粒重组质粒第19页,本讲稿共51页5、如果导入了目的基因,目的基因一定会表达吗?、如果导入了目的基因,目的基因一定会表达吗?不一定。不一定。第20页,本讲稿共51页基因工程的基本操作步骤:基因工程的基本操作步骤:四步曲:四步曲:1 1、提取目的基因、提取目的基因、提取目的基因、提取目的基因2、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合、目的基因与运载体结合3 3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞4 4、目的基因的检测和表达、目的基因的检测和表达第21页,本讲稿共51页基因工程基因工程基因拼接技术或基因拼接技
15、术或DNADNA重组技术重组技术生物体外生物体外基因基因DNADNA分子水平分子水平剪切剪切拼接拼接导入导入表达表达人类需要的基因产物人类需要的基因产物基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果原理原理基因重组基因重组第22页,本讲稿共51页基因工程的概念是什麽?基因工程的概念是什麽?基因操作的工具酶有几种?分别是什麽?基因操作的工具酶有几种?分别是什麽?基因的剪刀是什麽?结果?基因的剪刀是什麽?结果?基因的针线是什麽?基因的针线是什麽?基因的运输工具是什麽?基因的运输工具是什麽?最常用的运载体是什麽?最常用的运载体是什麽?质粒的结构是
16、什麽?质粒的结构是什麽?复习复习第23页,本讲稿共51页我国生产的部分基因我国生产的部分基因工程疫苗和药物工程疫苗和药物1 1、基因工程与药物研制、基因工程与药物研制许多药品的生产是从许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。价格往往十分昂贵。微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。微生物生长迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生们产生相应的药物,不但
17、能解决产量问题,还能大大降低生产成本。产成本。二、基因工程的应用二、基因工程的应用第24页,本讲稿共51页胰岛素从猪、牛等动物的胰胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,腺中提取,100Kg100Kg胰腺只能提取胰腺只能提取4-5g4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。高可想而知。将合成的胰岛素将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,基因导入大肠杆菌,每每2000L2000L培养液就能产培养液就能产生生100g100g胰岛素!使其胰岛素!使其价格降低了价格降低了30%-50%!30%-50%!第25页,本讲稿共51页从人血中提取干扰素,从人血中提取干扰素,300L300
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