实验三血清中总胆固醇测定.ppt
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1、关于实验三血清中总胆固醇的测定第一张,PPT共九页,创作于2022年6月一一、实验、实验目的目的学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。第二张,PPT共九页,创作于2022年6月 (1)(3)H2O2+4-氨基安替吡啉氨基安替吡啉(4-AAP)苯酚苯酚游离胆固醇游离胆固醇FAA胆固醇酯酶胆固醇酯酶胆固醇酯酶胆固醇酯酶H2O 红色醌红色醌类类物质物质过氧化物酶过氧化物酶过氧化物酶过氧化物酶(PODPOD)510nm光吸收法测定光吸收法测定光吸收法测定光吸收法测定相对相对相对相对
2、血清总胆固醇血清总胆固醇血清总胆固醇血清总胆固醇浓度浓度浓度浓度二、实验原理二、实验原理血清总胆固醇血清总胆固醇游离胆固醇游离胆固醇胆固醇酯胆固醇酯胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶胆甾烯酮胆甾烯酮+H2O2(2)游离胆固醇游离胆固醇第三张,PPT共九页,创作于2022年6月三、实验器材三、实验器材材料:人血清试剂:总胆固醇测定试剂盒用具:分光光度计,微量移液枪,试管,试管架,恒温水浴锅第四张,PPT共九页,创作于2022年6月(1)取取3支试管,按下表加入试剂支试管,按下表加入试剂:四、四、实验步骤实验步骤充分混匀,充分混匀,37 水浴中保温水浴中保温15min;冷却至室温后冷
3、却至室温后,510nm处比色处比色比色方法:以空白管调零,读取标准管及比色方法:以空白管调零,读取标准管及样品样品管光密度值。管光密度值。第五张,PPT共九页,创作于2022年6月(2)计算计算:依据依据朗伯朗伯-比尔定律比尔定律:A=KLC 标准管标准管胆固醇胆固醇浓度:浓度:5.17mmol/L 样品样品管管胆固醇浓度胆固醇浓度(mmol/L)样品样品管光密度管光密度值值 标准管光密度标准管光密度值值5.17C样=A样A标 C标第六张,PPT共九页,创作于2022年6月参考值胆固醇胆固醇 血清参考值:血清参考值:3.0 5.20mmol/L 危险阈值:危险阈值:5.20 6.20mmol/L 高胆固醇血症:高胆固醇血症:6.20mmol/L 第七张,PPT共九页,创作于2022年6月正确使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色正确使用比色器皿:手拿比色皿的毛面;比色液应占比色皿的液应占比色皿的2/3。测定胆固醇所用的试剂应防止被葡萄糖和甘油三测定胆固醇所用的试剂应防止被葡萄糖和甘油三酯污染酯污染。微量移液枪的正确使用微量移液枪的正确使用注意事项注意事项第八张,PPT共九页,创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看第九张,PPT共九页,创作于2022年6月
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