微生物和食品发酵.ppt
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1、关于微生物与食品发酵17.10.20221第一张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.20222l应用于发酵工业的微生物种类,主要有:细菌,放线菌,酵母菌,霉菌等。l人类对微生物的应用可概括为两大方面:利用微生物的酶及其代谢产物;利用微生的菌体及其内含物。第二张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.20223主要内容主要内容一、微一、微 生生 物物 的的 酶酶 及及 微微 生生 物物 代代 谢谢 产产 物物 的的 应应 用用二、微二、微 生生 物物 的的 菌菌 体体 及及 其其 内内 含含 物物 的的 应应 用用第三张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月1
2、7.10.20224第第 一一 节节微微 生生 物物 的的 酶酶及及 微微 生生 物物 代代 谢谢 产产 物物的的 应应 用用第四张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.20225一、微生物酶一、微生物酶 1.1 1.1 概况:概况:酶酶(enzyme)是活细胞产生的一种生物催化剂。酶酶是一类具有催化功能的蛋白质,能够使生物体内发生各种各样的生物化学变化,无论是动物、植物或微生物本身,它们的生长、发育、繁衍后代等,新陈代谢时所进行的一切生化变化,几乎都是在酶的催化下发生的,可以说没有酶就没有生命。酶的催化作用很早就为人们的生活所利用。第五张,PPT共一百零三页,创作于2022年
3、6月17.10.202261897年Buchner发发现现酶酶的的细细胞胞外外作作用用现现象象,从而导致了酶的商品化生产。最初的商品酶制剂主要以动植物为原料提取,如从牛胃中提取凝乳酶、从胰脏中提取胰酶、从血液中提取凝血酶及从植物材料中提取淀粉酶等。之后,Takamine利利用用霉霉菌菌来来生生产产淀淀粉粉酶酶使得酶制剂工业取得突破。其方法甚至在今天仍被采用。20世纪90年代以后,随着基因工程的广泛介入,经过酶基因重组,“基基因因工工程程+发发酵酵工工艺艺+先先进进发发酵酵设设备备”可以算是酶酶工工业业的的第第三三次次飞飞跃跃。微生物作为酶制剂来源的地位得到了进一步的加强,显示出了动植物无法与其
4、比拟的巨大优越性。第六张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.20227用微生物微生物来生产酶产品,具有生产酶产品,具有微生物生长繁殖快,生活周期短,生产能力几乎可以不受限制地扩大,能满足迅速扩张的市场需求;此外,微生物种类繁多,微生物酶品种齐全.多样性。近几十年来,微生物酶已经发展成为大规模的工业生产,成了各种酶制剂的主要来源,特别是当基因工程介入时,动植物细胞中存在的酶,几乎都能够利用微生物细胞获得。因此,有计划和仔细地筛选微生物菌株,通常可以获得能够生产几乎任何一种酶的适当菌株。第七张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202281.2 微生物酶的微生物
5、酶的种类种类:酶的组成与分类酶的组成与分类酶的组成与分类酶的组成与分类单聚体蛋白单聚体蛋白 酶蛋白酶蛋白 寡聚体蛋白寡聚体蛋白:谷酰胺合成酶谷酰胺合成酶 多聚体蛋白多聚体蛋白:丙酮酸脱氢酶丙酮酸脱氢酶 酶酶 辅基辅基:血红素血红素 辅因子辅因子 辅酶辅酶:NAD,FAD,生物素等生物素等 激活剂激活剂:金属离子金属离子 胞内酶胞内酶 酶酶 胞外酶胞外酶第八张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.20229胞内酶胞内酶的分布:酶种类种类 部位参与物质运输的酶 细胞膜参与糖代谢的酶 细胞质呼吸酶 内膜或线粒体蛋白质合成酶 核糖体光合作用酶 色素体第九张,PPT共一百零三页,创作于2
6、022年6月17.10.202210 目前巳发现的微生物的酶巳有2500多种,使用价值高而大量规模化生产的仅20多种。主要有,淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖异构酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶等10余种。广泛应用于,食品、发酵、纺织、制革、医药、造纸、日用化工、水产加工、畜禽饲料、三废处理、化学分析等,其中60用于食品工业。第十张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202211菌种分离纯化初筛复筛摇瓶试验最佳产酶条件研究酶的制备微生物育种收集发酵液胞外酶收集菌体破碎胞内酶酶学研究产品扩大工业生产物理诱变化学诱变分子改造遗传工程基因工程保藏菌种1.3 微生物酶开发的一般程序微生物酶开
7、发的一般程序第十一张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202212二、微生物酶在食品工业中的应用:二、微生物酶在食品工业中的应用:利用胞外酶将原料中大分子蛋白质、淀粉等分解为可被细菌和酵母菌利用的小分子物质,如氨基酸、葡萄糖等;利用胞内酶,通过代谢调节和人工控制发酵条件,利用糖类等某些营养物质在发酵过程中积累大量的代谢产物,如酒精、氨基酸、柠檬酸、乳酸、乙酸等发酵产品;此外,还可利用某些微生物在人工培养过程中产生大量的酶的特性,从发酵液(物)中提取酶来生产酶制剂(淀粉酶、蛋白酶、纤维素分解酶等),广泛用于食品发酵、制药、制糖、制革和饲料工业中。第十二张,PPT共一百零三页,
8、创作于2022年6月17.10.2022132.1 1 用于酒用于酒精发酵:精发酵:淀粉质原料 十 曲(含“糖化酶”)糖化 葡萄糖 发酵为酒精。制曲方法不同,酒精发酵方法也随之不同,常用的有:液体曲糖化法、根霉糖化法(Amylo法)、麸曲糖化法(固体曲)、加酶糖化法和麦芽糖化法等。目前国内以液体曲糖化法为主,以黑曲霉培养的液体曲作为淀粉质原料的糖化剂。酵母菌酵母菌(“(“酒化酶酒化酶”)第十三张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202214发酵机理淀粉质原料黑曲霉糖化酶葡萄糖酵母菌途径(行厌氧发酵)酒精十CO2 目前,常用糖化酶产生菌是:黑曲霉As3.4309(俗称UV11
9、号),该菌产糖化酶系纯、糖化力较高、耐高温、耐低pH、糖化时最适温度600 最适 pH4.04.6。第十四张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202215酒精酵母酶系较复杂,主要有:蔗糖转化酶:将蔗糖 葡萄糖 十 果糖;麦芽糖酶:将麦芽糖 2个葡萄糖;酒化酶系(类):参与催化葡萄糖 酒 精 十 CO2 的各种酶的总称。酒精发酵不需游离氧参加,否则酵母菌将糖彻底分解为水和CO2,同时获得大量菌体和能量。第十五张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022162.2 2 用于用于饮料酒的酿造饮料酒的酿造:供人饮用的、乙醇含量在0.565(体积分数,V/V)的饮
10、品,包括各种发酵酒、蒸馏酒、配制酒。发酵酒是以谷物、水果、乳类等为原料,主要经“谷物糖化酶糖化酵母酒化”或“无需将原料糖化而直接经酵母发酵”等工艺而制得。酒精含量小于24(V/V)的饮料酒,主要是啤酒、果酒、黄酒、乳酒和低度白酒等5类。第十六张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022172.2.1 用于啤酒用于啤酒酿造酿造:主发酵阶段,啤酒酵母在充02冷却麦芽汁中行有氧呼吸,可发酵糖类进入TCA循环彻底分解为H2O和CO2并放大量热量,菌体细胞大量增殖;后发酵阶段,当酵母增殖到一定程度,即进行厌氧发酵,可发酵糖类经EMP途径被发酵产生乙醇、CO2和少量热量。啤酒发酵是多种
11、酶参与的复杂生化反应过程,只有9596可发酵性糖生成乙醇与CO2;其余的2.02.5用于合成酵母新细胞;另有1.52.5糖类转化成高级醇、有机酸、酯类、双乙酰、醛类、含硫化合物等副产物,给啤酒带来生涩与不成熟的风味。第十七张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022182.2.2 用于葡萄酒用于葡萄酒酿造酿造:葡萄汁中的果糖和蔗糖被葡萄酒酵母酒化酶系经 EMP 途径发酵生成乙醇和CO2,其中蔗糖先被葡萄酒酵母的蔗糖转化酶分解为葡萄糖和果糖,再进入 EMP 途径发酵。葡萄酒酵母的氧化酶可促进葡萄酒的氧化作用(老熟陈化和色素沉淀等)。第十八张,PPT共一百零三页,创作于2022
12、年6月17.10.2022192.2.3 2.2.3 用于用于黄酒酿造:黄酒酿造:以糯米(或籼米、粳米、黍米、玉米)为主要原料,利用麦曲麦曲(或米曲、红曲)为糖化剂,酒药酒药为糖化发酵剂,进行多菌种混合自然发酵酿造而成的酒精含量为1218(V/V)的饮料酒。它包括淋饭酒、摊饭酒和喂饭酒。新工艺黄酒,则是在上述传统工艺的础上利用纯种麦曲(黄曲霉或米曲霉)为糖化剂,纯种酒母为发酵剂,以纯种发酵取代自然发酵。麦曲麦曲:以破碎的全小麦为原料,主要培殖曲霉(黄曲霉或米曲霉为主,少量黑曲霉、灰绿曲霉、青霉),其次含有根霉和毛霉,还有少量酵母等微生物,作为酿造黄酒的糖化剂。第十九张,PPT共一百零三页,创作
13、于2022年6月17.10.202220 黄曲霉产生液化型淀粉酶(分解淀粉产生糊精、麦芽糖和葡萄糖)和蛋白酶(分解蛋白质产生多肽、低肽和氨基酸),由这些代谢产物相互作用产生的色泽、香味等赋予黄酒独特风味并为酵母提供营养物质。传统麦曲采用自然培养,现代用人工接种黄曲霉,如As3.800和苏16号。黑曲霉主要产生糖化型淀粉酶,可将淀粉水解为葡萄糖,常用的黑曲霉有As3.4390(俗称UV11)和 As3.758。实际生产中,在黄曲霉制作的麦曲中添加少量纯种黑曲霉麸曲或商品黑曲霉糖化酶,以减少麦曲用量,提高糖化效果。第二十张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202221 酒药酒药
14、:为小曲中的一个种类,又称药曲。是以籼米粉、米糠为原料,加入少量中草药(辣蓼草粉末)主要培殖根霉、毛霉和酵母菌,少量细菌根霉、毛霉和酵母菌,少量细菌,作为制备淋饭酒母或以淋饭法酿造甜黄酒的糖化发酵剂。根霉产生糖化型淀粉酶,可将淀粉水解为葡萄糖,还产生乳酸、琥珀酸、延胡索酸等有机酸酶系,降低基质pH抑杂菌生长,并使酒体醇厚、口味丰满。传统小曲用自然培菌法,现在用纯种根霉,常用的有303、As3.851、3.852、3.866、3.867和3.868等。第二十一张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202222常用的黄酒酵母有:732号、501号、醇2号、As2.1392、82、
15、等,尤以前3种从淋饭酒醅中分离:含有酒化酶系,赋予黄酒酒香和酯香,并具繁殖快、发酵力强、产酸低、耐酸、耐高浓度酒精、对杂菌污染抵抗力强等。酒药中的毛霉产生液化型淀粉酶和蛋白酶,分解淀粉和蛋白质产生葡萄糖和氨基酸,为酵母菌生长提供营养物。第二十二张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202223乌衣红曲:是以籼米为原料,主要培殖红曲霉、黑曲霉、酵母菌,作为酿造黄酒的糖化发酵剂。红曲霉分泌红色素或黄色素,产生糖化型淀粉酶和蛋白酶,并产生柠檬酸、琥珀酸、乙醇。耐酸,最适pH3.55.0,耐受最低pH2.5,耐10酒精。常用的红曲霉有:As3.555、As3.920、As3.972、
16、As3.976、As3.986等(2008.3.24止)第二十三张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022242.2.4 2.2.4 用于用于白酒酿造:白酒酿造:是以含淀粉或可发酵糖等的物质为原料,利用大曲、小曲、麸曲和纯种酒母大曲、小曲、麸曲和纯种酒母作为糖化发酵剂,经糖化、发酵、蒸馏酿制而成的蒸馏酒蒸馏酒。酒体呈无色或微黄,澄清透明,具有独特的芳香和风味,含酒精度4165(体积分)为高度白酒,40(体积分)以下为低度白酒。第二十四张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202225大曲、小曲、麸曲大曲、小曲、麸曲的主要微生菌群及其作用:大曲大曲 是以全
17、小麦为原料,或以小麦大麦豌豆721或541制成混合原料,经自然接种培养而制成的大砖块形的酒曲。大曲中的微生物主要是曲霉,其次是根霉、毛霉和酵母菌,及少量细菌,为大曲酒的糖化发酵剂。曲霉和根霉是主要的糖化菌种,其中黑曲霉的糖化力较高;米曲霉和黄曲霉的糖化力较低,但液化力和蛋白分解力较强;根霉和红曲霉产生糖化酶和有机酸;毛霉产生淀粉酶和蛋白酶。第二十五张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202226大曲中含有产酒精力高的啤酒酵母和产酯生香能力高的产酯酵母菌。大曲中的细菌主要有:乳酸杆菌、醋酸杆菌、嗜热芽孢杆菌(如高温枯草芽孢杆菌)等,前两种存在于清香(汾香)型和浓香(窖香)型白
18、酒大曲中,后一种存在于酱香(茅香)型白酒大曲中。大曲具有的液化力、糖化力、蛋白质分解力、发酵力和产酯力对成品大曲酒的香型、风格具重要作用。第二十六张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202227 小曲:小曲:是以大米粉为原料,以曲种接种,主要繁殖根霉、毛霉和酵母菌,少量细菌,作为半固态法生产小曲酒的糖化发酵剂。其糖化菌主要是根霉,其次是毛霉和梨头霉。酵母菌有啤酒酵母和产酯酵母。还有乳酸菌和醋酸菌。第二十七张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202228 麸曲麸曲:是以麸皮为主要原料,2030鲜酒糟和稻壳为辅料,经接种纯曲霉菌种扩大培养而成,作为固态发酵法
19、生产麸曲白生产麸曲白酒的糖化剂酒的糖化剂。麸曲白酒生产中先后采用了黄曲霉和黑曲霉黄曲霉和黑曲霉As3.4309作糖化菌种,或在黑曲基础上配入少量的黄曲(30)。近年来,利用黑曲霉、根霉、红曲霉和拟内孢霉为糖化剂,配以啤酒酵母、产酯酵母和己酸菌等酿制白酒,使麸曲白酒和大曲白酒的风味接近。麸曲也可用于酒精和黄酒的生产。第二十八张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022292.3 2.3 用于用于谷氨酸发酵(味精生产):谷氨酸发酵(味精生产):葡萄糖经EMP途径(为主)和HMP途径(为辅)生成丙酮酸,丙酮酸进一步生成乙酰辅酶,而后进入TCA循环生成-酮戊二酸,后者在谷氨酸脱氢酶
20、作用下,在NH4+存在时,被还原氨基化生成谷氨酸。谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶异柠檬酸脱氢酶活力强,有利于-酮戊二酸还原氨基化生成谷氨酸;而-酮戊二酸脱氢酶酮戊二酸脱氢酶活力微弱或丧失,使-酮戊二酸不能继续氧化;脲酶脲酶活性强,能将发酵时流加的尿素分解为NH3和CO2,产生的NH3或流加的氨水可作为合成菌体蛋白质的氮源与合成谷氨酸的原料。第二十九张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202230目前我国谷氨酸生产常用菌株有:北京棒杆菌(C.pekinenesisn)As.299、钝齿捧杆菌(C.crenatum)As1.542、天津棒杆菌613、黄色短杆菌As1.
21、582(No617)和As1.631等。谷氨酸是菌体异常代谢产物,只有菌体正常代谢失调时才积累谷氨酸,并在生物素限量时,因细胞膜的渗透性改变而使谷氨酸容易漏出。理论上,由葡萄糖生成谷氨酸的转化率为81.7,但实际为4050。因部分葡萄糖为菌体生长提供碳源和能源,以及产生的微量副产物而被消耗掉。第三十张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022312.4 2.4 用于用于乳制品的发酵:乳制品的发酵:2.4.1 常用菌种常用菌种:乳酸细菌:乳酸乳球菌、乳酸乳球菌丁二酮乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种、嗜热链球菌;德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜酸乳杆菌、瑞氏乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌
22、乳酸亚种;两歧双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌等。酵母菌:乳酒假丝酵母菌、脆壁酵母、脆壁克鲁维酵母、类热带假丝酵母、乳酸酵母、乳酸克鲁维酵母等。霉菌:娄地青霉、沙门柏干酪青霉、酪生青霉等。其他细菌:扩展短杆菌、费氏丙酸菌等。第三十一张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022322.4.2 发酵乳品种:酸奶(凝固型、搅拌型);开菲尔(Kefir);奶酪(干酪);酸奶油;等等。第三十二张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022332.5 用于用于调味品的发酵调味品的发酵2.5.1 酱油酱油酱油生产中应用的菌种及其作用:米曲霉米
23、曲霉(Aspergillus oryzae)与其他曲霉:a、米曲霉(沪酿3.042):产生具较强的蛋白质分解力和淀粉液化力的酶系。米曲霉的酶系主要有:蛋白酶蛋白酶和外肽酶外肽酶能将蛋白质水解成氨基酸,谷氨酰胺酶谷氨酰胺酶使大豆蛋白质游离的谷氨酰胺分解为谷氨酸,增强酱油的鲜味。液化型液化型淀粉酶淀粉酶分解淀粉生成糊精和葡萄糖,决定着原料利用率、酱醪发酵成熟的时间与产品鲜味、色泽。米曲霉还具有生长速度快、抗杂菌能力强、不产生真菌毒素、对原料利用率高,发酵后产品具有酱油固有的香气(酱色浓)等特点。第三十三张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202234b、黑曲霉(As3.350)
24、:具多种酶,如淀粉糖化酶、果胶酶、纤维素酶、高产酸性蛋白酶。c、甘薯曲霉(As3.324):产生较强的淀粉酶和单宁酶系等,对甘薯及野生植物原料糖化效果好。d、酱油曲霉(.soyae):产生有较高活性的多聚半乳糖醛酸酶,而米曲霉的-淀粉酶活性高。酵母菌酵母菌:鲁氏酵母(S.rouxii)发酵葡萄糖生成乙醇、甘油,进一步生成酯类和糠醇(高级醇),它们构成酱油香气成分的主体。第三十四张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.202235乳酸菌:与酱油风味密切相关的乳酸菌有:嗜盐四联球菌(旧称嗜盐片球菌)、酱油四联球菌(又名盐水四联球菌)、植物乳杆菌。乳酸菌利用乳糖生成乳酸,与乙醇作用生
25、成乳酸乙酯,同时降低了酱醪pH在5左右,又促进鲁氏酵母的繁殖。乳酸菌和酵母菌的联合作用(101)能赋予酱油特殊香气。第三十五张,PPT共一百零三页,创作于2022年6月17.10.2022362.5.2 2.5.2 用于用于食醋酿造食醋酿造:食醋生产中应用的菌种及其作用食醋生产中应用的菌种及其作用 :参与米醋米醋酿造的微生物主要有曲霉、酵母菌和醋酸菌。参与酿醋的微生物产生各种酶使原料中蛋白质分解,淀粉糖化,淀粉糖化,酒精发酵,醋酸发酵酒精发酵,醋酸发酵;同时产生氨基酸、糖分、乙醇、有机酸、乙酸乙酯等,与食盐混合赋予食醋鲜味、甜味、酸味、香气、咸味、色泽。酿造糖醋糖醋的微生物有酵母菌和醋酸菌酵母
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