营养调控与基因表达讲稿.ppt
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1、关于营养调控与基因表达第一页,讲稿共四十五页哦 随着分子生物学的发展及其在营养学中的应用,从分子水平上弄清养分的代谢过程和规律,准确确定动物群体及个体的营养需要,掌握养分摄入过量及缺乏的后果,预防和治疗营养代谢疾病以及解决其他营养问题将成为可能。营养与基因表达的关系及其作用机制已成为分子生物学的重要研究内容及营养学的新兴研究领域。该领域的研究在过去510 年中取得了较大进展。营养和基因表达的一般关系表现为两个方面:一是养分的摄入量影响基因表达;二是基因表达的结果影响养分的代谢途径和代谢效率,并决定营养需要量。第二页,讲稿共四十五页哦Animal performance(meat,milk,eg
2、g,wool,etc)(growth,development,etc)Genotype(gene on chromosome)Environment(nutrition,ambient,management)Inter-relationships between genotype,environment and animal production 第三页,讲稿共四十五页哦 基因表达:是指编码某种蛋白质的基因从转录、mRNA 的加工与成熟、RNA 的翻译、蛋白质的加工,到活性(功能)蛋白质的形成的过程(Goodridge,1994)。基因表达调控包括转录调控、RNA加工调控、RNA 转运调控、翻
3、译调控、mRNA 稳定性调控及翻译后的调控。每一个调控点都与养分直接或间接有关(Clarke,1992)。第四页,讲稿共四十五页哦 研究表明,营养对基因表达的作用主要发生在转录或翻译前水平上,对翻译后的影响较小(Berdanier,1998)。研究表明,真核细胞的mRNA 的5和3端的碱基不能翻译成蛋白质,称为非编码区(UTR)。UTR 含有控制mRNA 的腺苷聚合、稳定性、在细胞中的分布定位以及翻译的调节信号,对基因表达的调节起着核心作用(Kozak,1992;Choi,1995)。养分对基因表达的调控作用是通过UTR,特别是3UTR 实现的。第五页,讲稿共四十五页哦Nutrient int
4、akeGene expressionDNA RNA proteinNutrient uptake pathway and metabolismNutrient requirementInter-relationships of nutrition and gene expression 第六页,讲稿共四十五页哦Which genes,particularly those involved in control of metabolism,growth and partition are regulated by nutrition?How do nutrients and diet regul
5、ate the expression of specific genes?How is the expression of specific gene products involved in metabolism and channelling of nutrientsFundamental questions第七页,讲稿共四十五页哦Dietary constituentDirect regulationPhysiological modulationSecondary mediatorRegulated transcription mRNAProtein Responsive genesR
6、egulated transcription Direct and indirect effects of nutrition on regulation of gene expression第八页,讲稿共四十五页哦DNARNA3 polyadenylationtranscription5 CapAAA200Splicing AAA200Mature mRNANucleus Nucleus CytoplasCytoplasmmPlasma Plasma membramembraneneExons 1 234Promoter Some micronutrientshormonesSignal t
7、ransduction pathwaysIntracellular receptorsAAAmRNATranslocationPolyribosomes ProteinTranslation 第九页,讲稿共四十五页哦Critical control points1)Transcriptional regulationActivation,transcriptional speed2)Post-transcriptional regulationmRNA processing(splicing)mRNA transportation,localizationmRNA stabilitymRNA
8、translation3)Post-translation regulation第十页,讲稿共四十五页哦Post-transcriptional control of gene expression(3)(1)(2)第十一页,讲稿共四十五页哦Regulatory signals in the untranslated regions and their interactions with nutrition第十二页,讲稿共四十五页哦1.Interaction between nutrition and gene expression2.Nutritional regulation of gen
9、e expression3.Molecular biological approaches to nutrient-gene interactions 4.Effects of environmental factors on nutrient-gene interactions第十三页,讲稿共四十五页哦Principles:isolation&estimation of mRNA1)mRNA is the primary product of a gene and mediates its expression as protein.In many instances,nutrient ef
10、fects on the expression of protein reflect changes in the concentration of their mRNA.It is also frequently easier to determine mRNA concentrations than to estimate the corresponding proteins.第十四页,讲稿共四十五页哦2)mRNA can readily be converted into their equivalent DNA by first synthesizing a complementary
11、 strand of DNA(cDNA)and then a second strand complementary to the first.DNA is much easier to manipulate than RNA in plasmids or by PCR.The cDNA can be sequenced to protein sequence information which can used in structural studies and in development of immunological methods of protein estimation.Pri
12、nciples:isolation&estimation of mRNA第十五页,讲稿共四十五页哦3)The synthesis of individual mRNA is rarely by direct interaction of a nutrient with a gene.Instead,control is generally mediated through one or more proteins referred to as transcription factors.These bind to regulatory regions of the gene and deter
13、mine the efficiency of its transcription.Principles:isolation&estimation of mRNA第十六页,讲稿共四十五页哦Main techniques1)Hybridization 2)Isolation of mRNA3)Probes 4)Estimation of mRNANorthern blottingRibonuclease protection aaasy5)PCR,real time-PCR6)DNA sequencing7)Clone Important understanding how a nutrient
14、influences expression of a particular gene requires a study of the factors which bind to that genes regulatory region第十七页,讲稿共四十五页哦1.Interaction between nutrition and gene expression2.Nutritional regulation of gene expression3.Molecular biological approaches to nutrient-gene interactions 4.Effects of
15、 environmental factors on nutrient-gene interactions第十八页,讲稿共四十五页哦Animal performance(meat,milk,egg,wool,etc)(growth,development,etc)Genotype(gene on chromosome)Environment(nutrition)Inter-relationships between genotype,environment and animal production ambientmanagement第十九页,讲稿共四十五页哦I.Nutrition and ge
16、ne expression第二十页,讲稿共四十五页哦Feed industryAnimal productionEffluentLess slurryLess odourAnimal biotechnologyConsumer products-Milk Meat Egg FishMicrobial biotechnologySilage inoculantsProbiotics Enzymes Amino acidsGrowth enhancersEnvironmental biotechnologyChemical or biotechnology pre-treatmentConserv
17、ationChemical or biotechnology pre-treatmentBetter protein or amino acidsCurrent cropsPlant biotechnologyBy-productsConsumer products-Flour Whisky BeerFood/drink industryChemical industryChemicals Starch Gluten Adhensives OilsBy-products 第二十一页,讲稿共四十五页哦一、能量蛋白质对基因表达的影响一、能量蛋白质对基因表达的影响生长激素(GH)是控制动物出生后生长
18、的主要激素。GH 对生长的控制必须通过GH 受体(GHR)及类胰岛素生长因子-(IGF-)的作用才能实现,IGF-是GH促进生长的最重要的介导物(Cohick,1993)。哺乳动物体内存在另一种IGF,叫IGF-,主要在胚胎和胎儿组织产生,是胚胎和胎儿的主要生长因子。IGF-和IGF-的大多数作用均需要IGF-受体(型受体)参与(St raus,1994)。除GH 外,营养状况是调控IGF-的重要因素。大多数动物试验均表明,营养不良导致的生长受阻往往伴随有血浆GH 水平的升高,而不是下降(Buonomo,1991;Vance,1992)。能量蛋白质对生长调节基因表达的影响可能具有组织特异性。第
19、二十二页,讲稿共四十五页哦二、氨基酸对基因表达的影响二、氨基酸对基因表达的影响氨基酸除参与IGF-和GHR 基因表达的调节外,还与多种其他基因表达的调节有关。Marten(1994)报道,在大鼠肝细胞培养基质中去掉氨基酸后促进了数个基因的表达,提高幅度最大的是CHOP 基因。CHOP 是一分子量很小的核蛋白,为转录因子C/EBP(CCAAT/促进子结合蛋白)的同源蛋白。CHOP 通过与C/EBP 结合成二聚体而参与多种基因表达的调节(Cao,1991;Birkenmeier,1989;Umek,1991)。Bruhat(1997,1999)用人体细胞培养证明,低浓度的亮氨酸明显提高CHOP 基
20、因的表达,其机制是提高了基因的转录率和CHOP mRNA 的稳定性。其他氨基酸,如赖氨酸、蛋氨酸、精氨酸、苯丙氨酸和苏氨酸的限制也可促进CHOP 的表达。Wang(1996)认为,氨基酸缺乏导致基因表达的改变并不是氨基酸本身的作用,而是氨基酸浓度下降导致异常蛋白质合成的结果。但Bruhat(1997,1999)认为,低浓度氨基酸诱导CHOP 的表达不是细胞应激的结果,而是氨基酸本身的直接作用。他们已经找到了CHOP 基因上氨基酸缺乏时促进转录的两种转录因子。氨基酸调控CHOP 基因表达的作用机制还需深入研究。第二十三页,讲稿共四十五页哦三、三、脂肪酸对基因表达的影响脂肪酸对基因表达的影响1 脂
21、肪合成酶系脂肪合成酶系很早以前人们就知道日粮脂肪有抑制肝脏的脂肪合成作用。除了脂肪很早以前人们就知道日粮脂肪有抑制肝脏的脂肪合成作用。除了脂肪对脂肪合成酶系的直接作用对脂肪合成酶系的直接作用(如脂酰辅酶如脂酰辅酶A 是是ACC 的变构抑制剂的变构抑制剂)外外,脂肪可以脂肪可以调节生脂酶的表达是抑制生脂作用的重要原因。调节生脂酶的表达是抑制生脂作用的重要原因。LCFA 是通过肉碱棕榈酰转移酶是通过肉碱棕榈酰转移酶(CPT)系统进入线粒体内进行氧化供能的系统进入线粒体内进行氧化供能的,而而CPT 系统主要由位于线粒体膜外侧的系统主要由位于线粒体膜外侧的CPT 和位于膜中间的肉碱和位于膜中间的肉碱-
22、酰基肉碱酰基肉碱转移酶以及位于膜内侧转移酶以及位于膜内侧CPT 等三部分组成等三部分组成,在这个过程中在这个过程中CPT 是控制是控制LCFA 进入线粒体的主要位点进入线粒体的主要位点(McGarry 等等,1989)。进入线粒体后的。进入线粒体后的LCFA 氧化供氧化供能则受到能则受到3-羟基羟基-3-甲基甲基-戊二酰辅酶戊二酰辅酶A(HMG-CoA)合成酶的限制合成酶的限制,因此这两因此这两种酶是影响种酶是影响LCFA 利用的关键环节利用的关键环节,而它们的基因表达又受到日粮中而它们的基因表达又受到日粮中LCFA 的调控。的调控。第二十四页,讲稿共四十五页哦 一些实验已证明一些实验已证明,
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- 关 键 词:
- 营养 调控 基因 表达 讲稿
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