课题血红蛋白的提取和分离讲稿.ppt

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1、关于课题血红蛋白的提取和分离第一页，讲稿共四十八页哦提问提问研究研究“TRIM5”TRIM5”蛋白质蛋白质的第一步是什么？的第一步是什么？分离和提纯分离和提纯TRIM5TRIM5蛋白质。蛋白质。回答回答第二页，讲稿共四十八页哦 根据蛋白质各种特性的差异，如根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形分子的形状和大小状和大小、所带电荷的性质和多少所带电荷的性质和多少、溶解度溶解度、吸附的性质吸附的性质、对其他分子的亲和力对其他分子的亲和力等等，可以等等，可以用来分离不同蛋白质。用来分离不同蛋白质。如何分离和提纯蛋白质？如何分离和提纯蛋白质？第三页，讲稿共四十八页哦专题五专题五 DNA和蛋白质技术和蛋白质

2、技术第四页，讲稿共四十八页哦教学目标教学目标知识目标知识目标 1.了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。本原理。2.掌握蛋白质提取的基本概念。掌握蛋白质提取的基本概念。能力目标能力目标 1.学习对血液中蛋白质提取和分离的方学习对血液中蛋白质提取和分离的方法。法。2.掌握从复杂提取中提取生物大分子的基本掌握从复杂提取中提取生物大分子的基本过程和方法。过程和方法。第五页，讲稿共四十八页哦过程与方法过程与方法情感态度与价值观情感态度与价值观 本实验采取实验与课本相结合的方法，本实验采取实验与课本相结合的方法，在实验中掌握分离大分子物质的基本方法。在实验中

3、掌握分离大分子物质的基本方法。1.发挥学生主观能动性。发挥学生主观能动性。2.激发学生学习兴趣，培养学会僧创激发学生学习兴趣，培养学会僧创新能力。新能力。第六页，讲稿共四十八页哦教学重难点教学重难点课题重点课题重点凝胶色谱法的原理和方法。凝胶色谱法的原理和方法。课题难点课题难点1.样品的预处理。样品的预处理。2.色谱柱填料的处理。色谱柱填料的处理。3.色谱柱的装填。色谱柱的装填。第七页，讲稿共四十八页哦内容解析内容解析概念：概念：概念：概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫发生明显变

4、化的作用叫做做缓冲作用缓冲作用缓冲作用缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液缓冲溶液缓冲溶液缓冲溶液。缓冲溶液缓冲溶液基础知识基础知识第八页，讲稿共四十八页哦思考：思考：说出说出说出几种常见的缓冲对说出几种常见的缓冲对NaH2PO4/Na2HPO4H2CO3/NaHCO3 缓冲溶液缓冲溶液由共轭酸碱对组成。这一共轭酸碱通由共轭酸碱对组成。这一共轭酸碱通常称为常称为缓冲对、缓冲剂或缓冲系缓冲对、缓冲剂或缓冲系。常见的缓冲对主。常见的缓冲对主要有三种类型。要有三种类型。第九页，讲稿共四十八页哦弱酸及其对应的盐：弱酸及其对应的盐：弱酸及其对应的盐：弱酸及其对应的盐：弱碱及其

5、对应的盐：弱碱及其对应的盐：弱碱及其对应的盐：弱碱及其对应的盐：多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐:H2CO3NaHCO3；CH3COOHCH3COONaNH3H2ONH4CL;NH4OHNH4CLNaHCO3Na2CO3；NaH2PO4Na2HPO4第十页，讲稿共四十八页哦 缓冲溶液通常由缓冲溶液通常由12121212种种缓冲缓冲缓冲缓冲剂剂剂剂溶解于水中配制而成。溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用比例调节缓冲剂的使用比例调节缓冲剂的使用比例调节缓冲剂的使用比例就就可以制得在不同可以制得在不同PH

6、PH范围内使用范围内使用的缓冲液。的缓冲液。缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制 利用利用缓冲液缓冲液缓冲液缓冲液模拟细胞内的模拟细胞内的PHPH环境，保证环境，保证血红蛋白血红蛋白血红蛋白血红蛋白的正常的正常结构和功能，便于观察和科结构和功能，便于观察和科学研究。学研究。第十一页，讲稿共四十八页哦凝胶色谱法凝胶色谱法什么是什么是什么是什么是凝胶凝胶凝胶凝胶？凝胶凝胶凝胶凝胶是一些多糖类构成的内是一些多糖类构成的内含许多贯穿的通道的微小多孔的含许多贯穿的通道的微小多孔的球体。球体。第十二页，讲稿共四十八页哦凝胶色谱法的原理凝胶色谱法的原理 相对分子量较相对分子量较相对分子量

7、较相对分子量较小的蛋白质容易进入小的蛋白质容易进入小的蛋白质容易进入小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，在凝胶内部的通道，在凝胶内部的通道，在凝胶内部的通道，在凝胶的外部移动，路凝胶的外部移动，路凝胶的外部移动，路凝胶的外部移动，路程较长，移动速度较程较长，移动速度较程较长，移动速度较程较长，移动速度较慢。慢。慢。慢。相对分子量较相对分子量较相对分子量较相对分子量较大的蛋白质无法进大的蛋白质无法进大的蛋白质无法进大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，入凝胶内部的通道，入凝胶内部的通道，入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移只能在凝胶外部移只能在凝胶外部移只能在凝胶外部移动，路程较短，移动，路程较短，移动

8、，路程较短，移动，路程较短，移动速度较快。动速度较快。动速度较快。动速度较快。第十三页，讲稿共四十八页哦电泳电泳带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳概念概念概念概念分类分类分类分类聚丙稀酰胺凝胶电泳聚丙稀酰胺凝胶电泳第十四页，讲稿共四十八页哦视频：视频：电泳的原理电泳的原理第十五页，讲稿共四十八页哦试验设计试验设计实验材料实验材料动物血液动物血液缓冲溶液缓冲溶液凝胶色谱柱凝胶色谱柱电泳装置电泳装置离心机离心机化学试剂化学试剂第十六页，讲稿共四十八页哦1.样品处理样品处理血液的组成血液的组成血液的组成血液的组成实验操作实验操作第十七

9、页，讲稿共四十八页哦1.1 1.1 红细胞的洗涤：红细胞的洗涤：红细胞的洗涤：红细胞的洗涤：离心将血液分层离心将血液分层 用胶头吸管吸出用胶头吸管吸出黄色血浆黄色血浆 用生理盐水洗涤。用生理盐水洗涤。洗涤前洗涤前洗涤前洗涤前洗涤后洗涤后洗涤后洗涤后第十八页，讲稿共四十八页哦1.31.3 分离血红蛋白溶液：分离血红蛋白溶液：分离血红蛋白溶液：分离血红蛋白溶液：离心分层；滤纸过滤去除脂溶性沉淀层；分离心分层；滤纸过滤去除脂溶性沉淀层；分液漏斗分出红色透明液体。液漏斗分出红色透明液体。1.2 1.2 血红蛋白的释放：血红蛋白的释放：血红蛋白的释放：血红蛋白的释放：在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放

10、。在蒸馏水和甲苯作用下，红细胞破裂释放。第十九页，讲稿共四十八页哦1.4 1.4 透析：透析：透析：透析：装入透装入透析袋并置析袋并置于磷酸缓于磷酸缓冲液中冲液中（PH为为7.0）透析。）透析。第二十页，讲稿共四十八页哦2.凝胶色谱操作凝胶色谱操作2.1 2.1 凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的制作取胶皮盖取胶皮盖打孔打孔安装玻璃管安装玻璃管安装尼龙网安装尼龙网安装安装100目尼龙纱目尼龙纱组装组装完成！完成！第二十一页，讲稿共四十八页哦2.2 2.2 凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填材料：材料：材料：材料：交联葡聚糖凝胶（交联葡聚糖

11、凝胶（G-75）A、固定固定：将色谱柱装置固定在支架上将色谱柱装置固定在支架上B、装填装填：将凝胶悬浮液一次性的装：将凝胶悬浮液一次性的装填入色谱柱内填入色谱柱内装填方法：装填方法：装填方法：装填方法：C、洗涤平衡洗涤平衡：装填完毕后，用磷酸缓冲液：装填完毕后，用磷酸缓冲液缓冲液充分洗涤平衡缓冲液充分洗涤平衡12小时小时第二十二页，讲稿共四十八页哦2.3 2.3 样品的加样和洗脱样品的加样和洗脱样品的加样和洗脱样品的加样和洗脱A A、调节缓冲液面、调节缓冲液面、调节缓冲液面、调节缓冲液面B、滴加透析样品滴加透析样品滴加透析样品滴加透析样品C C、样品渗入凝胶床、样品渗入凝胶床、样品渗入凝胶床、

12、样品渗入凝胶床D D、洗脱、洗脱、洗脱、洗脱第二十三页，讲稿共四十八页哦E E、收集、收集、收集、收集 待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每试管收集流出液，每5ml收集一试管，连续收收集一试管，连续收集。集。实验结果实验结果实验结果实验结果第二十四页，讲稿共四十八页哦1.样品的处理样品的处理血液离心后分层血液离心后分层实验结果与分析实验结果与分析成功成功！第二十五页，讲稿共四十八页哦1.洗涤次数过少，未能除去血浆蛋白。洗涤次数过少，未能除去血浆蛋白。2.离心速度过高和时间过长，白离心速度过高和时间过长，白细胞和淋巴细胞一同沉淀。细胞和淋巴细胞一

13、同沉淀。失败原因：失败原因：第二十六页，讲稿共四十八页哦2.凝胶色谱柱装填凝胶色谱柱装填加入有色物质，观察色带移动情况。加入有色物质，观察色带移动情况。加入有色物质，观察色带移动情况。加入有色物质，观察色带移动情况。方法：方法：方法：方法：血红蛋白色带狭窄、均匀、平整血红蛋白色带狭窄、均匀、平整血红蛋白色带狭窄、均匀、平整血红蛋白色带狭窄、均匀、平整血红蛋白色带歪曲、散乱、变宽血红蛋白色带歪曲、散乱、变宽血红蛋白色带歪曲、散乱、变宽血红蛋白色带歪曲、散乱、变宽第二十七页，讲稿共四十八页哦相关链接相关链接为什么有的血管是蓝色的？为什么有的血管是蓝色的？为什么有的血管是蓝色的？为什么有的血管是蓝色

14、的？携氧携氧携氧携氧的血是的血是的血是的血是鲜红色鲜红色鲜红色鲜红色的，当你被划伤的，当你被划伤的，当你被划伤的，当你被划伤时，你看到的是鲜红的携氧血时，你看到的是鲜红的携氧血时，你看到的是鲜红的携氧血时，你看到的是鲜红的携氧血。不携氧不携氧不携氧不携氧的血是的血是的血是的血是深紫色深紫色深紫色深紫色的，当你献血的，当你献血的，当你献血的，当你献血时，血被抽到没有氧气的试管里，你看到时，血被抽到没有氧气的试管里，你看到时，血被抽到没有氧气的试管里，你看到时，血被抽到没有氧气的试管里，你看到的血是深紫色的。的血是深紫色的。的血是深紫色的。的血是深紫色的。深紫色的无氧血流经我们的静脉时却深紫色的无

15、氧血流经我们的静脉时却深紫色的无氧血流经我们的静脉时却深紫色的无氧血流经我们的静脉时却呈呈呈呈蓝色蓝色蓝色蓝色为什么为什么为什么为什么第二十八页，讲稿共四十八页哦 不同的光线透过皮肤的方式不同：不同的光线透过皮肤的方式不同：不同的光线透过皮肤的方式不同：不同的光线透过皮肤的方式不同：蓝光蓝光蓝光蓝光在皮在皮在皮在皮肤表面被反射回来；肤表面被反射回来；肤表面被反射回来；肤表面被反射回来；红光红光红光红光透射得比较深；静脉中深透射得比较深；静脉中深透射得比较深；静脉中深透射得比较深；静脉中深色的血吸收大部分红光。所以我们看到的是皮肤表色的血吸收大部分红光。所以我们看到的是皮肤表色的血吸收大部分红光

16、。所以我们看到的是皮肤表色的血吸收大部分红光。所以我们看到的是皮肤表面反射的蓝光面反射的蓝光面反射的蓝光面反射的蓝光 。另外一些生物，如另外一些生物，如另外一些生物，如另外一些生物，如蛇类和蟹类蛇类和蟹类蛇类和蟹类蛇类和蟹类，用铜来运，用铜来运，用铜来运，用铜来运输氧气，所以他们有真正的蓝血。输氧气，所以他们有真正的蓝血。输氧气，所以他们有真正的蓝血。输氧气，所以他们有真正的蓝血。第二十九页，讲稿共四十八页哦课堂小结课堂小结缓冲溶液：缓冲溶液：缓冲溶液：缓冲溶液：在一定的范围内，能够抵制外加少量在一定的范围内，能够抵制外加少量强强酸或强碱酸或强碱，使原来溶液，使原来溶液PH值值基本保持基本保持

17、不变不变的混合溶液。的混合溶液。凝胶色谱法：凝胶色谱法：凝胶色谱法：凝胶色谱法：根据被分离的根据被分离的蛋白质相对分子质量蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶的大小，利用具有网状结构的凝胶的的分子筛作用分子筛作用，来进行分离的方法。，来进行分离的方法。第三十页，讲稿共四十八页哦带电粒子带电粒子在电场作用下发生迁移的过在电场作用下发生迁移的过程。程。电泳：电泳：电泳：电泳：实验过程实验过程1.1.样品处理样品处理样品处理样品处理红细胞的洗涤红细胞的洗涤血红蛋白的释放血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液分离血红蛋白溶液透析透析第三十一页，讲稿共四十八页哦2.2.凝胶色谱操作凝胶色谱操作凝胶色

18、谱操作凝胶色谱操作凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的制作凝胶色谱柱的装填凝胶色谱柱的装填样品的加入和洗脱样品的加入和洗脱3.SDS3.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳第三十二页，讲稿共四十八页哦高考链接高考链接1.2009.山东山东 细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果。下列属于细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果。下列属于奢侈基因的是（奢侈基因的是（）A.血红蛋白基因血红蛋白基因 B.ATP合成酶基因合成酶基因 C.DNA解旋酶基因解旋酶基因 D.核糖体蛋白基因核糖体蛋白基因A第三十三页，讲稿共四十八页哦解析：解析：题干中给予题干中给予“细胞分化是奢侈基因

19、选择性表细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果达的结果”，根据题干可知，找出分化的细胞中，根据题干可知，找出分化的细胞中特殊成分的基因即可，四个选项中特殊成分的基因即可，四个选项中BCD是所有是所有活细胞中都具体的基因，而活细胞中都具体的基因，而A.血红蛋白基血红蛋白基因是分化后的红细胞才表达的基因因是分化后的红细胞才表达的基因。第三十四页，讲稿共四十八页哦 2.2003全国卷全国卷理综理综 能与人体血液中血红蛋白结合的一种有毒气体是能与人体血液中血红蛋白结合的一种有毒气体是()A.氯气氯气 B.氮气氮气 C.一氧化碳一氧化碳 D.甲烷甲烷C解析：解析：CO与血红蛋白结合，造成与血红蛋白结合，造成

20、CO中毒，即煤气中中毒，即煤气中毒。毒。第三十五页，讲稿共四十八页哦课堂练习课堂练习填空题填空题1.样品处理中的血红蛋白溶液离心后分层顺序自上而下样品处理中的血红蛋白溶液离心后分层顺序自上而下是（是（）-（）-（）-（)。有机溶剂有机溶剂脂类物质脂类物质红细胞破碎物沉淀红细胞破碎物沉淀血红蛋白溶液血红蛋白溶液2.一分子血红蛋白最多可携带一分子血红蛋白最多可携带()O2分子数和（分子数和（）CO2分子数。分子数。个个个个第三十六页，讲稿共四十八页哦选择题选择题1.随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质的研究和应随着人类跨入蛋白质组时代，对蛋白质的研究和应用越来越深入，首先要做的一步是（）用越来越深入

21、，首先要做的一步是（）A.弄清各种蛋白质的空间结构弄清各种蛋白质的空间结构B.弄清各种蛋白质的功能弄清各种蛋白质的功能C.弄清各种蛋白质的合成过程弄清各种蛋白质的合成过程D.获得高纯度的蛋白质获得高纯度的蛋白质第三十七页，讲稿共四十八页哦2.用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是（的叙述，正确的是（）A.相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质较大的蛋白质B.相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质量较大的蛋白质C.

22、相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质大的蛋白质D.二者根本无法比较二者根本无法比较A第三十八页，讲稿共四十八页哦简答题简答题 1.人们用鸡的红细胞提取人们用鸡的红细胞提取DNA，用人，用人(猪、牛、羊）猪、牛、羊）的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？答：答：鸡的红细胞具有细胞核，含有鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于，便于进行进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。第三十九页，讲稿

23、共四十八页哦2.蛋白质的分离和提取的原理是什么？蛋白质的分离和提取的原理是什么？答：答：根据蛋白质各种特性的差异，如分根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。等等，可以用来分离不同蛋白质。3.高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用，作用结果是什么被破坏？的何种作用，作用结果是什么被破坏？答：答：两者都利用了蛋白质的变性作用，破两者都利用了蛋白质的变性作用，破坏了其空间结构。坏了其空间结构。

24、第四十页，讲稿共四十八页哦教材习题答案教材习题答案1.凝胶色谱法分离蛋白质的原理是怎样的？凝胶色谱法分离蛋白质的原理是怎样的？答：凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据答：凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一。分子量的大小分离蛋白质的方法之一。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体内部有许多贯穿的通道，当一个含有各种分子体内部有许多贯穿的通道，当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱柱内进行的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱柱内进

25、行两种不同的运动，即垂直向下的运动和无规则的两种不同的运动，即垂直向下的运动和无规则的扩散运动。扩散运动。第四十一页，讲稿共四十八页哦 相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量

26、中等的分子后流出，相对分子质出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，这种现象又叫分子筛现象。量最小的分子最后流出，这种现象又叫分子筛现象。第四十二页，讲稿共四十八页哦 此外，凝胶本身具有三维网状结构，相对分子质量大此外，凝胶本身具有三维网状结构，相对分子质量大的分子通过这种网状结构，相对分子质量大的分子通过这的分子通过这种网状结构，相对分子质量大的分子通过这种网状结构上的空隙时阻力大，而相对分子质量小的分子种网状结构上的空隙时阻力大，而相对分子质量小的分子通过时阻力小，因此不同分子量的蛋白质分子可以获得分通过时阻力小，因此不同分子量的蛋白质分子可以获得分离。离。2.什

27、么是缓冲溶液？它的作用是什么？什么是缓冲溶液？它的作用是什么？答：答：在一定范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或在一定范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液稍加稀释不引起溶液pHpH发生明显变化的作用叫缓冲作发生明显变化的作用叫缓冲作用。用。第四十三页，讲稿共四十八页哦缓冲溶液的作用是维持反应体系的缓冲溶液的作用是维持反应体系的pHpH不变。在生不变。在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的pH pH 下进行的受到氢离子浓度的严格调控。下进行的受到氢离子浓度的严格调控。为了在实验室条件下精确的模拟生物体内的天然为了在实验室条件下精确的模拟

28、生物体内的天然环境，就必须保持体外生物化学反应过程有与体内过环境，就必须保持体外生物化学反应过程有与体内过程完全相同的程完全相同的PHPH。具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。缓冲溶液通常具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。缓冲溶液通常是由一或两种化合物（缓冲剂）溶解于水中制得的，调是由一或两种化合物（缓冲剂）溶解于水中制得的，调节缓冲剂的配比就可制得不同节缓冲剂的配比就可制得不同pHpH范围的缓冲液。范围的缓冲液。第四十四页，讲稿共四十八页哦3.电泳及其原理是什么？电泳及其原理是什么？答：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。答：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物大

29、分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、许多重要的生物大分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团，它们在某个特定的核苷酸、核酸等都具有可解离基团，它们在某个特定的pHpH下会带上正电或负电；下会带上正电或负电；在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在电场的作用下，荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速

30、度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。第四十五页，讲稿共四十八页哦4.你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？答：血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，答：血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离

31、；分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。第四十六页，讲稿共四十八页哦 5.与其它真核细胞相比，红细胞有什么特点？这与其它真核细胞相比，红细胞有什么特点？这一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义？一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义？答：血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱答：血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液。这使血红蛋白的分离过程非常直观，集洗脱液。这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。大大简化了实验操作。第四十七页，讲稿共四十八页哦感感谢谢大大家家观观看看第四十八页，讲稿共四十八页哦