《备战2022年高考生物考点一遍过》5 单元过关检测(十).doc

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1、单元过关检测(十)(时间：90分钟分值：100分)一、单项选择题：本题共14小题，每小题2分，共28分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。1(2020·四川乐山四校联考)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述，正确的是()A实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉B利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数C观察细菌培养的实验时，最好是在另一平板上接种清水作为对照实验D培养基中含有的蛋白胨、淀粉可分别为细菌培养提供氮源和碳源解析：选D。实验用过的带菌培养基要经过高压蒸汽灭菌后才能

2、倒掉，以免污染环境，A错误；应利用稀释涂布平板法对细菌进行分离纯化并计数，B错误；要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验，C错误；培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供氮源和碳源，D正确。2.在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如右图。下列有关叙述错误的是()A接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D甲中a区域为划线的起始位置解析：选D。在分离、纯化大肠杆菌实验中，接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌；连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落；接种过程中，对接种环在接种

3、前要灼烧，每次划线后均需灼烧，因此至少需要灼烧5次；据乙中菌落分布特点可推知甲中d区域为划线的起始位置。3(2020·山东滨州质检)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是()A菜花和哺乳动物成熟的红细胞均可作为提取DNA的材料B向切碎的植物组织中加入适量清水，可获得含大量DNA的溶液C将提取的丝状物溶解后，加入二苯胺试剂沸水浴，冷却后呈蓝色D用玻璃棒快速搅拌滤液会使DNA获得量增加解析：选C。哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和细胞器，不含DNA，A错误；向切碎的植物组织中加入适量的清水，会降低DNA的溶解度，析出DNA分子，B错误；将提取的丝状物溶解后，加入二苯胺试剂沸水

4、浴，冷却后呈蓝色，C正确；用玻璃棒搅拌的目的是让DNA充分溶解，快速搅拌滤液不会使DNA获得量增加，D错误。4某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒发酵过程的研究，下列叙述错误的是()A夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理B乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大C正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压D可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵解析：选B。生产果酒是利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，酒精发酵时一般将温度控制在1825 ，夏季温度高，且发酵过程有热量产生，故夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理，A项正确；在发酵产酒精过程中需保持无氧状态，B项错误；酵母菌

5、的呼吸过程会产生CO2，故正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压，C项正确；可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度决定何时终止发酵，D项正确。5下列有关现代生物技术的叙述，正确的是()A外源DNA需位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达B进行动物细胞培养时定期更换培养液的目的是防止杂菌污染C通常使用显微注射法将目的基因导入微生物细胞D改变脱氧核苷酸的序列就可以合成自然界中不存在的蛋白质解析：选A。启动子和终止子分别是转录开始和结束的DNA序列，外源DNA需位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达，A正确；进行动物细胞培养时定期更换培养液的目的是清除代谢废物，B错误；通常使用Ca2处理法将目的基因

6、导入微生物细胞，C错误；由于密码子的简并性等原因，改变目的基因中的碱基序列不一定能合成自然界中不存在的蛋白质，D错误。6(2020·宁波模拟)基因编辑是指将外源DNA片段导入到细胞染色体特定位点或删除基因内部的片段，定点改造基因，获得预期的生物体基因序列发生遗传改变的技术。如图是对某生物B基因进行编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，下列叙述正确的是()AsgRNA是合成Cas9酶的模板BsgRNA的碱基序列与靶基因碱基序列能够全部互补C核酸内切酶Cas9可在特定切割位点断裂核苷酸之间的磷酸二酯键DB基因被编辑后因不能转录而无法表达相关蛋白质解

7、析：选C。由题意知，sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，A错误；由图可知，靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对，B错误；核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的化学键磷酸二酯键，C正确；被编辑后的B基因仍能进行转录，D错误。7(2020·江苏苏、锡、常、镇模拟)研究发现，经水浴处理后再组织培养获得的草莓幼苗脱毒效果更好。下列叙述错误的是()A病毒在植物体内的分布是不均匀的B40 水浴可能有利于减慢病毒增殖扩散的速度C该过程体现了植物细胞的全能性D脱毒苗具有病毒抗性，不会再感染病毒解析：选D。根据题图可知，利用小叶尚未展开的匍匐茎通过植物组织培

8、养可获得脱毒苗，可推测病毒在植物体内的分布不均匀，A正确；40 水浴4 h有利于减慢病毒增殖扩散的速度，B正确；该过程体现了植物细胞的全能性，C正确；脱毒苗并不会因为脱毒而具有病毒抗性，仍会再感染病毒，D错误。8某种极具观赏价值的兰科珍稀花卉很难获得成熟种子。为尽快推广种植，可应用多种技术获得大量优质苗，下列技术中不能选用的是()A利用茎段扦插诱导生根技术快速育苗B采用花粉粒组织培养获得单倍体苗C采集幼芽嫁接到合适的其他种类植物体上D采用幼叶、茎尖等部位的组织进行组织培养解析：选B。为了使优质苗的生物性状不发生性状分离，可采用茎段扦插诱导生根技术快速育苗，也可采用将幼芽嫁接到合适的其他种类植物

9、体上的方法或用茎尖或幼叶等部位的组织进行植物组织培养获得大量优质苗；花粉粒是减数分裂的产物，利用花粉粒离体培养得到的是单倍体苗，其高度不育，且会发生性状分离，因此B项方案不能选用。9下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是()A连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型B某些癌细胞在合适条件下能逆转为正常细胞C由多个祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆D未经克隆化培养的细胞系细胞具有相同的性状解析：选B。连续细胞系的细胞大多数具有异倍体核型，A错误；癌细胞仍能逆转为正常细胞，如小鼠畸胎癌细胞能分化为各种正常体细胞，B正确；由一个共同的祖细胞培养形成的细胞群为一个克隆，C错误；未经克隆化培养的细胞系具有异质性，

10、D错误。10西瓜花叶病毒(WMV)是危害西瓜与甜瓜等瓜类作物的主要病害之一。为了能快速有效检测出该病毒，研究人员利用WMV的病毒粒子免疫健康小鼠，进而制备出了相应的单克隆抗体。下列有关叙述正确的是()A以WMV病毒粒子免疫健康小鼠，直接分离获得分泌相应抗体的B细胞B从小鼠体内分离获得的B细胞，应继续培养至10代左右C用感染WMV的西瓜汁液，检测经筛选获得的杂交瘤细胞是否呈阳性D分别用未感染和感染WMV的西瓜汁液，检测相应的单克隆抗体的特异性解析：选C。以WMV病毒粒子免疫健康小鼠，可以从小鼠脾脏中获得多种B淋巴细胞，经过筛选后可以获得分泌相应抗体的B细胞，A错误；从小鼠体内分离获得的B细胞实际

11、上是浆细胞，已经高度分化，不能分裂，B错误；用感染WMV的西瓜汁液，检测经筛选获得的杂交瘤细胞是否呈阳性，C正确；应该用两组感染WMV的西瓜汁液，其中一组加入单克隆抗体，另一组不加，检测相应的单克隆抗性的特异性，D错误。11如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图，下列有关叙述正确的是()A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的所有特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析：选D。是从已免疫的小鼠脾脏中获得的浆细胞；胰蛋白酶常用在动物细胞培养过程中，其作用是使组织分散成单个细胞，图示中应使用促融剂如聚乙二醇(PE

12、G)；图示为杂交细胞，但不一定是符合要求的杂交瘤细胞；图示是经筛选获得的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。12(2020·山东临沂模拟)下列关于胚胎移植的叙述，错误的是()A有利于提高良种母畜的繁殖力，加快育种进程B是克隆两栖类动物必需的最后一道“工序”C有利于优良物种在不同国家和地区间的交换D人工辅助生殖的技术之一，为不孕不育夫妇带来福音解析：选B。胚胎移植有利于提高良种母畜的繁殖力，加快育种进程，A正确；胚胎移植是克隆哺乳动物类必需的最后一道“工序”，两栖类动物不需要在母体内发育，B错误；胚胎移植有利于优良物种在不同国家和地区间的交换，C正确；胚胎移植是人工辅助生殖的技术之一，为不孕

13、不育夫妇带来福音，D正确。13iPS细胞是利用病毒将四个基因(Oct4、Sox2、Klf4和c­Myc)导入动物体细胞使其转化为类似胚胎干细胞的一种细胞。在iPS细胞培育过程中()A运用了基因工程、动物细胞培养等现代生物技术B病毒的作用只是通过侵染将基因导入体细胞中C使用的工具酶主要有DNA聚合酶和DNA连接酶D仅有Oct4、Sox2、Klf4和c­Myc能够转录、翻译解析：选A。根据题干信息分析，在iPS细胞培育过程中，先利用基因工程技术获得含有四个基因的动物细胞，再利用动物细胞培养技术获得iPS细胞，A正确；病毒的作用是通过侵染将基因导入体细胞，同时使目的基因在受体细胞

14、中稳定存在并表达，B错误；使用的工具酶是限制酶和DNA连接酶，C错误；除了Oct4、Sox2、Klf4和c­Myc能够表达(转录、翻译)，动物体细胞中原来的许多基因也能够表达，D错误。14下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所做的一系列研究，下列相关叙述不正确的是()A过程用饲养层培养ES细胞时，需要加入动物血清B过程中ES细胞正常发育成图中胎儿，体现了ES细胞的全能性C过程可直接将褐毛基因片段通过显微注射法导入ES细胞中D过程利用免疫缺陷的小鼠的目的是使受体不对移植的组织细胞产生免疫反应解析：选C。过程是动物细胞培养技术，需要加入血清，A正确；ES细胞正常发育成图中胎儿，体现了ES细

15、胞的全能性，B正确；过程将目的基因导入胚胎干细胞前需构建重组DNA分子，再通过显微注射法导入ES细胞中，C错误；免疫缺陷的小鼠不会对移植细胞产生免疫反应，D正确。二、不定项选择题：本题共6小题，每小题3分，共18分。每小题给出的四个选项中，有的只有一个选项正确，有的有多个选项正确，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。15如图一是苹果酒和苹果醋的现代生产装置简图，图二是与生产过程关联的某些物质浓度随时间的变化情况。据图分析，下列相关叙述正确的是()A甲、乙罐中的微生物的代谢类型分别是异养兼性厌氧型、异养需氧型B甲罐顶上管道弯曲及加水的目的是防止空气、杂菌进入，以及排气减压等C乙

16、罐中刨木花既有利于发酵菌的附着，又能为其提供一定的碳源Da、b曲线可分别代表醋酸和酒精的浓度变化规律解析：选AB。甲罐中的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧型，乙罐中的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，A正确；甲罐顶上管道弯曲及加水的目的是防止空气、杂菌进入，以及排气减压等，B正确；乙罐中刨木花有利于发酵菌的附着，但不能为其提供碳源，为其提供碳源的是酒精，C错误；酵母菌无氧呼吸产生酒精先逐渐增多，后来因为酒精过多抑制了酒精发酵，故a、b曲线可分别代表酒精和醋酸的浓度变化规律，D错误。16(原创)下列有关“微生物的分离与培养”实验的叙述，错误的是()A高压蒸汽灭菌锅加盖时应按顺时针方

17、向依次旋紧螺栓B鉴别培养基可以鉴定某种微生物的种类C待培养基冷却至室温时倒平板D统计样品中活菌数量时，接种方法可采用稀释涂布平板法解析：选AC。高压蒸汽灭菌锅加盖时，将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内，再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致；鉴别培养基可以鉴定培养基中某种微生物的种类；待培养基冷却至50 左右时倒平板；稀释涂布平板法可用于活菌数量的计数。17(2020·江苏常州一模)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是()A用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因

18、的全部序列B设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物D第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例的15/16解析：选ABC。PCR是一项在生物体外复制特定的DNA分子片段的技术，进行扩增时，可以不需要知道目的基因的全部序列，A正确；设计引物时需要避免引物之间发生碱基互补配对而造成引物自连，B正确；退火温度过高，引物无法与模板结合，可能导致PCR反应不能进行，因而得不到任何扩增产物，C正确；由图可知，由原来的每条母链为模板合成的两个新DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时，两

19、种引物都含有，第四轮循环共产生16个DNA分子，其中2个DNA分子只含有1种引物，因此同时含有引物A和引物B的DNA分子是14个，占14/16(7/8)，D错误。18如图所示为哺乳动物生殖的过程。其中b为卵细胞，c为体细胞。下列叙述正确的是()A形成动物的过程分别属于有性生殖和无性生殖B产生动物的过程中可发生基因突变、基因重组等C动物的产生表明动物细胞具有全能性Da、b、c细胞的形成过程，仅c细胞为有丝分裂形成解析：选AD。动物通过受精作用形成，属于有性生殖，动物通过细胞核移植技术形成，利用的原理是动物细胞的细胞核具有全能性，形成动物的过程属于无性生殖，A正确，C错误；a、b细胞分别由精原细胞

20、和卵原细胞通过减数分裂形成，c细胞是体细胞，通过有丝分裂形成，D正确；产生动物的过程中没有减数分裂，所以并没有发生基因重组，B错误。19(2020·江苏南京师大附中考前模拟)利用细胞工程的方法，以SARS病毒蛋白外壳为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述错误的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体B体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体C将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与SARS病毒特异性结合的方法可诊断出病毒感染者解析：选ABC。单克隆抗体是由单个的杂交瘤细胞经过增殖而形成的遗传信息

21、相同的大量细胞产生的化学性质单一、特异性强的抗体，所以用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体不属于单克隆抗体，A错误；浆细胞不能增殖，体外培养单个浆细胞不能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；将等量浆细胞和骨髄瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞中，只有浆细胞和骨髄瘤细胞融合后形成的细胞才属于杂交瘤细胞，C错误；利用该单克隆抗体能够与抗原特异性结合的原理，可诊断出SARS病毒的感染者，D正确。20杜泊羊以其生长速度快、肉质好等优点，被称为“钻石级”肉用绵羊。科研工作者通过胚胎工程快速繁殖杜泊羊的流程如图所示，下列相关叙述不正确的是()A为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺

22、激素对雌性杜泊羊进行处理B从卵巢中采集的卵母细胞可直接与获能的精子进行体外受精C为避免代孕绵羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎解析：选BC。为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌羊进行处理，A正确；从卵巢中采集的卵母细胞，都需要在体外经人工培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；代孕绵羊对移入子宫的同种外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，C错误；胚胎分割技术可提高胚胎的利用率，扩大繁殖规模，D正确。三、非选择题：本题包括5小题，共54分。21(10分)据图回答下列问题：(1)生牛奶在饮用前一般要经过_(填具体方法)处理，以保证人

23、体健康。(2)培养微生物时必须进行无菌操作，实验前所需的各种器材，如培养皿等常用_法灭菌。(3)牛奶是微生物生长的良好培养基，为检测消毒前后牛奶中细菌含量的变化情况，依图甲所示操作：用无菌吸管从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液移至盛有9 mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次后，得到的溶液稀释度为_。(4)配制的培养基在接种之前需进行无菌检测，具体做法是_。(5)图乙中统计的菌落数比实际活菌数_，原因是_。(6)从培养基的作用来看，图丙所示的培养基称为_，能起到分离微生物作用的原因是_。解析：(1)牛奶常用巴氏消毒法进行消毒处理。(2)培养微生物过程中，吸管、培养皿等玻璃器皿常用干热灭菌

24、法进行灭菌。(3)由题图可知，从锥形瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液移至盛有9 mL无菌水的试管中，稀释了10倍，又重复了2次，因此得到的溶液稀释度为103。(4)对配制的培养基在接种之前进行无菌检测的常用方法是将未接种的培养基置于适宜条件下一段时间，如果没有形成菌落说明灭菌彻底，反之，有菌落生长则说明灭菌不彻底。(5)图乙是通过稀释涂布平板法接种得到的菌落，由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数比实际活菌数要少。(6)图丙用的是含尿素的培养基，只有能分解尿素的微生物才能生长，其他微生物因不能利用尿素而不能生长，因此含尿素的培养基属于选择培养基。答案：(1)巴氏

25、消毒法(2)干热灭菌(3)103(4)将未接种的培养基置于适宜条件下一段时间，若没有菌落形成，则未被污染(5)少当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(6)选择培养基这种培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长22(11分)塑料袋的自然分解需要20至1 000年不等，由此造成的“白色污染”早已成为地球公害。加拿大一名叫丹尼尔·伯德的高中生从土壤中找到了一类假单胞杆菌，能将聚乙烯塑料的降解过程缩短至3个月，而且分解产物只有水和二氧化碳，伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”。下图是伯德寻找聚乙烯降解菌的大致过程。请回答下列问题：(1)为避免杂菌污染培养

26、物和环境，用于微生物培养的培养基接种前和完成实验后都要进行_；接种时要在_旁操作。(2)图中的“土壤样品”最可能取自_。“”过程表示对土壤悬浮液进行一系列的_，目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在号培养基表面形成单个_。(3)号培养基采用的接种方法为_。号培养基属于_培养基，其作用是使目的菌能“脱颖而出”，为证明号培养基的作用，常用方法是_。(4)使用号培养基的目的是使目的菌数目增多，培养基中必须包含水、无机盐、_等基本营养成分。从物理性质来看，号培养基中不能添加_。解析：(1)为避免杂菌污染培养物和环境，需将培养基在接种前和完成实验后进行高压蒸汽灭菌。接种时，为避免周围空气中的

27、杂菌污染，操作需在酒精灯火焰旁进行。(2)据题可知，要寻找的目的菌是聚乙烯降解菌，聚乙烯塑料袋在垃圾场中较多，因此图中的土壤样品最可能来自垃圾场或其他塑料袋较多的地方。图中“”过程表示对土壤悬浮液进行一系列的浓度梯度稀释，使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，接种到培养基上后能够形成单个的菌落。(3)号培养基上菌落比较分散，因此采用的接种方法是稀释涂布平板法。号培养基是用来筛选聚乙烯降解菌的，属于选择培养基。要证明选择培养基的作用，常用的方法是将同种菌种接种到牛肉膏蛋白胨培养基上进行比较。(4)使用号培养基是为了增加目的菌的数量，培养基中必须含水、无机盐、氮源和碳源等基本营养成分。增加目的菌的数

28、量需用液体培养基，因此该培养基中不能添加凝固剂(琼脂)。答案：(1)(高压蒸汽)灭菌酒精灯火焰(2)垃圾场(答案合理即可)浓度梯度稀释菌落(3)稀释涂布平板法选择把相同菌种接种到牛肉膏蛋白胨培养基中，并在相同且适宜的条件下培养，比较两培养基上的菌落数(4)碳源、氮源凝固剂(或琼脂)23(12分)(2020·福建漳州模拟)请回答下列有关基因工程及其应用的问题：(1)多种_和DNA连接酶，以及逆转录酶的发现，为DNA的切割、连接以及获得目的基因创造了条件。(2)基因工程的核心步骤是_；重组Ti质粒载体结构中T­DNA的作用是_。(3)科学家设法使烟草细胞形成微创伤，受伤部位细胞

29、产生的乙酰丁香酮可吸引农杆菌向受伤部位集中，这时农杆菌携带某种目的基因进入烟草细胞，获得的转基因烟草细胞通过_技术最终获得转基因烟草，检测烟草细胞中该目的基因是否成功表达出蛋白质的方法是_。(4)利用_处理植物体细胞可得到原生质体，将目的基因导入植物细胞的方法中除题(3)所述方法外，还可采用_。解析：(1)切割目的基因需要用限制酶，将目的基因与运载体相连需要用到DNA连接酶，而利用反转录法获得目的基因需要用到逆转录酶。(2)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体；重组Ti质粒载体结构中T­DNA为可转移DNA，可以携带目的基因进入植物细胞并整合到植物细胞中染色体的DNA上。(3)将获得

30、的转基因烟草细胞最终培养成转基因烟草需要用到植物组织培养技术；检测目的基因是否表达出蛋白质可以采用的方法是抗原抗体杂交。(4)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此利用纤维素酶和果胶酶处理植物体细胞可得到原生质体；将目的基因导入原生质体中的方法，除了利用农杆菌转化法，还可以利用基因枪法和花粉管通道法。答案：(1)限制酶(或限制性核酸内切酶)(2)构建基因表达载体携带目的基因进入植物细胞并整合到植物细胞中染色体的DNA上(3)植物组织培养抗原抗体杂交(4)纤维素酶和果胶酶基因枪法和花粉管通道法24(12分)(2020·河南林州一中调研)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制

31、备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示。据图回答下列问题：(1)过程常用的方法是_。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生_免疫。从小鼠体内分离的细胞是_，细胞应具有的特点是_。(3)体外培养细胞，首先应保证其处于_的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱内充入二氧化碳的作用是_。(4)对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和_检测。(5)若要预防H7N9禽流感，可用图中的_作为疫苗。解析：(1)过程将重组DNA导入动物细胞，常用显微注射法。(2)向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生相应的浆细胞，这是体液免疫，从小鼠体内分离的细胞 是B淋巴

32、细胞(浆细胞或已免疫的B淋巴细胞)，将无限增殖的基因导入浆细胞，得到的细胞 应具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。(3)体外培养细胞，首先应保证其处于无菌、无毒的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱内充入二氧化碳的作用是维持培养液的pH。(4)对于转基因成功的细胞还要进行克隆化培养和(专一)抗体检测。(5)疫苗为毒性弱的抗原，因此要预防H7N9禽流感，可以用题图中的抗原蛋白作为疫苗。答案：(1)显微注射法(2)体液(只答特异性不可)B淋巴细胞(浆细胞或已免疫的B淋巴细胞)既能无限增殖，又能产生特异性抗体(3)无菌、无毒(缺一不可)维持培养液的pH(4)(专一)抗体(5)

33、抗原蛋白25(9分)(2020·山东省高三等级考模拟)基因定点整合可替换特定基因，该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由 PKU 基因突变引起的，将正常 PKU 基因定点整合到 PKU 基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体 DNA 上，替换突变基因，可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程：从染色体 DNA 上突变 PKU 基因两侧各选择一段 DNA 序列 HB1 和 HB2，根据其碱基序列分别合成HB1 和 HB2，再将两者分别与基因HSV­tk1、HSV­tk2连接，中间插入正常 PKU 基因和标记基因 neo，构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色

34、体 DNA 中的 HB1 和 HB2 序列发生交换，导致两者之间区域发生互换，如图所示。(1)构建重组载体时，常用的工具酶有_。该实验用小鼠胚胎干细胞作为 PKU 基因的受体细胞以培育出转基因小鼠，除了胚胎干细胞能大量增殖外，还因为胚胎干细胞_。(2)为获得小鼠的胚胎干细胞，可将小鼠囊胚中的_取出，并用_处理使其分散成单个细胞进行培养，培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为_。(3)用图中重组载体转化胚胎干细胞时，会出现 PKU 基因错误整合。错误整合时，载体的两个HSV­tk中至少会有一个与 neo 一起整合到染色体DNA 上。已知含有 neo的细胞具有 G41

35、8 的抗性，HSV­tk1、HSV­tk2 的产物都能把 DHPG 转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有 G418 及同时含有 G418 和 DHPG 的培养液中进行培养，在双重选择下存活下来的是_的胚胎干细胞，理由是_。(4)将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠，从个体生物学水平检测，若小鼠_， 说明 PKU 基因成功表达。解析：(1)构建重组载体时，常用的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶；胚胎干细胞具有发育的全能性，可以发育成小鼠。(2)内细胞团细胞具有全能性。培养动物细胞需要先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，使其分散成单个细胞再进行培养，培养过程中细

36、胞会贴附在培养瓶的表面生长，这种现象称为贴壁生长。(3)细胞需要具有neo才能在G418培养液中存活，细胞需要不含HSV­tk才能在DHPG培养液中存活。正确整合的细胞具有neo基因，且不含HSV­tk，因此具有G418的抗性且不会使DHPG转化为有毒物质，能在同时含有G418和DHPG的培养液中存活。故只有正确整合的细胞可以存活。(4)个体生物学水平的检测需要检测的是小鼠的性状表现，若小鼠不出现苯丙酮尿症，说明PKU基因成功表达。答案：(1)限制酶和DNA连接酶具有发育的全能性(2)内细胞团细胞胰蛋白酶或胶原蛋白酶贴壁生长(3)正确互换整合不含neo的胚胎干细胞，在G418的培养液中培养时，没有G418抗性而死亡；HSV­tk的产物能把DHPG转化为有毒物质使胚胎干细胞死亡，含有HSV­tk的胚胎干细胞，在含有G418和DHPG的培养液中培养时会死亡(4)没有表现出苯丙酮尿症