DeltaTox急性毒性检测系统用户使用手册演示教学.doc
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1、Good is good, but better carries it.精益求精,善益求善。DeltaTox急性毒性检测系统用户使用手册-急性毒性检测仪用户指南-目录1.基本介绍11.1.描述11.2.操作背景12.系统组件23.操作34.测试样本和测试材料54.1.样本类型54.2.样本收集54.3.样本的存储54.4.样本准备55.试剂与耗品75.1.特有试剂75.2.MicroTox稀释液75.3.MicroTox渗透调节液(OAS)75.4.专用试管75.5.试管架76.测试考虑86.1.时间与温度86.2.空白试剂(控制)86.3.干扰87.测试模式和分析过程97.1.毒性检测模式9
2、2%B-Tox高毒性样本测试过程945%B-Tox中毒性样本测试过程1181.9%B-Tox低毒性样本测试过程137.2.ATP模式的检测158.下载数据过程188.1.下载到Windows95上的一个文本文件188.2.下载到Windows3.1或3.11上的一个文本文件199.DELTATOX分析仪的数据下载209.1.下载数据的例子209.2.下载数据的解释20记录头行(RecordHeaderLine)20测试结果行(TestResultLine)2010.故障诊断2211.附件2311.1.Q-Tox模式和B-Tox模式测量结果的计算2311.2.Q-Tox和B-Tox测量结果解释与
3、精度2411.3.准备硫代硫酸钠备用液(1%W/V)2411.4.用硫代硫酸钠去氯2511.5.调整样本的PH值2511.6.基本操作2511.7.试剂水合271. 基本介绍1.1. 描述DeltaTox毒性检测系统提供一种简单、快速的对环境采样毒性进行监测的方法,它便于携带,适合现场检测。系统包括一个高敏感度的分析仪(光度计)、干冻的细菌试剂、实验控制液和补充液。内嵌的分析仪软件是菜单式的,容易操作。系统设计的操作环境温度是很宽的常温范围(100C-280C)。非常适合变化的现场环境。分析仪读取并记录测试试剂发出的很广的动态光强度范围。操作背景DeltaTox毒性检测系统可以进行毒性和ATP
4、两种检测。在两种检测过程中都会检测光强,但是针对不同的生物过程。在测毒性的时候,仪器检测发光细菌与测试样本混合后的发光强度,并与控制实验(空白实验)的光强比较。光强度的损失(标志对测试细菌新陈代谢的抑制作用)反映出测试样本的相对毒性。在进行ATP测试时,仪器检测被测样本中的ATP(三磷酸腺甙)与虫萤光素/荧光素酶反应发出的光强度。通过MODE键,可以使仪器切换到三个不同的功能模式。在任何一个模式下,按下START键,仪器自动新建一个数据文件准备保存将产生的一批数据。数据在仪器内自动保存,并且不需要电池也能长期保留。可以通过“CYCLE”功能在仪器显示屏上看到数据,也可以通过标准的数据通信或数据
5、传输软件将数据下栽到文本文件中。设备设计上考虑到野外使用,一组新的电池可以使设备连续工作10到12小时。设备内存可以存储600个测试数据。2. DeltaTox毒性检测系统能检测到很广范围的光强(0到大约120,000,000个光子)。在整个测量范围,仪器自动选择检测精度并校准,以便得到高精度的读数。当出现环境温度过高或过低、马达或光开关故障、读数溢出或电池电量低时,系统会出现故障报警信息提示用户。系统组件DeltaTox毒性检测系统包括以下组件:l DeltaTox毒性检测系统携带包l DeltaTox毒性检测仪(带交流电源转换器)l MicroTox特有试剂(发光细菌)l MicroTox
6、稀释液l MicroTox渗透压调节液l 一次性小玻璃试管l 吸移器:10微升吸移器和吸移器头,100-1000微升吸移器和吸移器头l 试管支架DeltaTox用户手册请打开包装,检查组件是否齐全并无损坏。如有缺项或组件损坏,请与SDI或当地分销商联系。注意:一旦收到设备,立即将特有试剂(SOLOReagent)放入-200C到-250C的冰柜中保存。要使用交流电,将交流电转换器连接到设备的交流接口上。要在野外现场使用,在DeltaTox的电池箱中安装6节二号(C)电池。操作式样说明:1、 键盘一个标准的9键膜键盘,用于所有的操作命令2、 LCD显示屏2行共40个字符的LCD显示屏(每行20个
7、字符)3、 电池箱3号电池夹,每夹放两个电池,拧开电池夹端头的螺丝可以更换电池。4、 报警指示灯5、 在给定的时间倒记时时间到时,指示等亮(伴有报警声)提示操作员读数。该指示灯也提示马达开关故障或不适宜的操作条件报警。RS-232串行口这个位于仪器右边靠近后面的I/O口用来连接计算机下载存储的数据记录。6、 交流电转换器接口该交流到直流的电源接口位于仪器右边靠近后面。7、 读数系统读数系统包括以下组件:a. 光电倍增管(PMT)PMT是光感应器件,它对放在其输入窗前的光源发出的光子进行计数。b. 滤光控制系统该系统自动插入中性滤光镜,是分析仪的可检测范围扩大。c. 温度感应器温度感应器安装在读
8、数系统靠近测试试管井的位置,它检测环境温度。当前的温度在仪器上显示并记录下来。设备只在100C-280C工作。d. 安全快门当样本室的盖子或插销打开时,安全快门会自动关闭,以保护光电倍增管受到环境光的损坏。e. 样本室在读取控制样本或测试样本的光强时,放置小试管的试管井。f. 盖子和插销3. 盖子在测光时用来盖样本室,插销用来锁紧盖子。测试样本和测试材料3.1. 样本类型3.2. DeltaTox可以检测各种各样的样本,包括源水、饮用水、污水、工业废弃物、流入流出水、溢出水以及从土壤或沉淀物中取出液。样本收集3.3. 最理想的是用一个新的干净的硼硅酸盐玻璃的带旋盖的容器(30到50ml),容器
9、上有刻度线(聚碳酸酯或聚丙烯容器也可)。使容器中充满样本液,不要留任何可遗留空气的空间。使样本液充满容器,可以保证易挥发性物质保留在样本溶液中。样本的存储收集到样本后尽可能快进行测试以免发生不可预知的变化,如果不得不推迟测试,将样本冷藏到普通冰箱中(2C到8C)。样本的毒性会因时间变化而发生变化,尽量在收集到样本的2-4小时内进行检测。如果不能做到,应该在采集到样本后72小时内进行检测。3.4. 样本准备在分析前,大部分样本不需要做特殊准备,但对一些特定的检测需要对一些特别的样本进行测试前的准备,几种情况列出如下:1、浑浊样本浑浊的或含有不沉淀颗粒物的样本,需要用一些通常的处理办法去除浊度。例
10、如可以以适当的速度离心甩一定时间,达到去除浊度或颗粒物的目的。应当注意的是,样本的浑浊可能引起不明确的发光增强或减弱,只有当不考虑浑浊带来的毒性时,才使用以上的去浊度过程。2、有色样本如果有明显的颜色(特别是红、棕或黑色),可能会吸收光而影响测试精度。这样的样本应该在测试前用蒸馏水或去离子水稀释(25%或50%)。3、含氯样本由于氯消毒过程而是样本中含有氯,这些氯会影响细菌试剂的活性,从而影响测试结果。这种样本首先要用硫代硫酸钠溶液去氯。参见附件中的“准备硫代硫酸钠备用液”和“用硫代硫酸钠去氯”。4、样本的PH值4. 样本的PH值可能以一种不可预测的方式影响测试结果。理想地讲,采样应该带着其本
11、有的PH值进行检测(不作任何调整),但是当PH值在6.0-8.0之间时测试试剂表现出良好的发光性,当样本的PH值超出这个范围,会影响毒性检测。因而,样本的PH值应该按照规定调节到6与8之间。调整过程请参见附件中的描述(见“调整样本的PH值”)。样本PH值的调整会影响到测试准确性和样本完整性。试剂与耗品4.1. 特有试剂特有的干冻试剂在零下20C到零下25C的环境下储存,以保证其活性。4.2. 当在4C环境存储时,干冻试剂在4周内保持稳定。如果要运输试剂,建议采用绝热容器,并带上冻冰包。干冻试剂在22C环境下能保持24小时稳定。但是,只要可能,干冻试剂应该在使用前一直保持在零下20C到零下4C的
12、环境。一旦试剂重新水合,建议在30分钟内使用。建议的水合时间为15分钟。当水合时间超过30分钟时,试剂对某些样本的敏感性会改变。MicroTox稀释液4.3. MicroTox稀释液用来水合干冻试剂、稀释样本以及用做无毒控制样本,在室温下其搁置生命周期为一年。MicroTox渗透调节液(OAS)4.4. 渗透调节液是特别制备的无毒22%氯化钠溶液。用于按1:10的比例添加到样本使样本的盐度达到2%。在室温下其搁置生命周期为一年。专用试管4.5. 专用试管是在测试过程中用来装样本、控制试液和试剂的。不要重复使用这些试管。试管架试管架是设计用来在实验过程中放小试管的。该架最多可以放50个试管,分为
13、5行,在架的左边从上到下分别将5行标记为A、B直到F。每行包括10个试管位,从左到右分别标记1到10。5. 测试考虑5.1. 时间与温度5.2. 不同的化学药品对活生物的影响程度不同,反映了不同的作用机理。对某些类化学药品,对发光的影响作用在5分钟内完成。而对另外一些化学药品来讲,15分钟的实验数据更为可靠。DeltaTox的省缺设置为5分钟。本系统能在比较宽的温度范围(100C-280C)满意地工作,这使它能在不同的环境中测试样本。没有操作温度控制和相关的测试试剂发光矫正,可以发现在不同的温度下测试数据和结果有变化。空白试剂(控制)在任何一次测试中,控制实验(空白实验)是必须的,而且与测试同
14、时进行。一般来讲,光强水平也会因为样本生物反应以外的原因随着时间而变化。5.3. 所有测试试管的反应都与控制实验的反应进行比较。干扰含有大量颗粒物的样本会对测试产生干扰。需要进行稀释和离心甩脱。色度过高的样本(特别是红和棕色)也会受到干扰,这样的样本在测试前应该稀释。6. 测试模式和分析过程6.1. 毒性检测模式DeltaTox系统有两种标准的急性毒性检测和评估模式。第一个是Q-Tox模式,这种模式是为快速毒性检测设计的。当有几个样本需要快速检测或者只需要初略估测其毒性量级时,这种模式最合适。第二个是B-Tox模式,它是一个基本的毒性检测模式,当需要更精确的检测结果时,采用该模式。在B-Tox
15、模式下,系统要在试剂刚水合,而测试样本还没有加入前读取光强度(零时间读数),而Q-Tox模式不读取该数据。在这两个测试过程中,不需要对样本进行任何处理-例如调节样本渗透压。所有的测试液、采样和分析仪都应该在100C-280C范围进行测试。分析仪在这个范围之外不能可靠工作。2%B-Tox高毒性样本测试过程本测试过程是用来检测被估计有高毒性的样本的(例如污水处理厂的进厂水等)。分析仪设置1、 将分析仪放到一个平稳、干净的平面上。2、 按“ON”键打开电源。分析仪将进行1分钟的自检。3、 如果1分钟自检通过,省缺的开机屏幕显示。在屏幕上确认分析仪的环境温度在10-28范围内。4、 按“MODE”键,
16、直到屏幕显示“B-Tox”。设置DeltaTox5分钟的培养时间。测试过程5、 将两个小试管放到试管支架的A1和A2两个位置。6、 用2.5ml稀释液(2500微升)使1小瓶特有试剂水合(见附录“试剂水合”)。7、 将水合的试剂倒入一个小试管。8、 使用500微升的吸移器将试剂混合3到4次。9、 在A1和A2两个试管中各加1000微升水合试剂。10、 等待15分钟。在确保分析仪的样本室没有试管的条件下(确认样本室盖子盖好,且插销插好)按“START”键。设备将顺序显示“Closelidandlatch”、“WaitingforPMTtowarmup”、“Readingdarkcurrent.P
17、leasewait.”。这期间,设备创建并打开一个记录。屏幕显示:11、 将控制实验小试管A1放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管A1。取出控制小试管A1,放到试管架上A1位置。12、 将控制实验小试管A2放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管A2。按“STOP”键,取出控制小试管A2,放到试管架上A2位置。13、 立即加10微升样本(室温下)到小试管A2。14、 摇晃A2试管,是其混合。5分钟到计时后,报警声响,接着显示器上出现:15、 将控制实验小试管A1放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管A1。取出控制小试
18、管A1,放到试管架上A1位置。16、 将样本小试管A2放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管A2。DeltaTox分析仪的显示屏上自动显示光损失或光增益百分比。按“STOP”键返回省缺界面。多样本测试如果有多个样本需要检测,可以使用上面的过程,但要增加下面步骤:17、 将小试管放到试管架上。试管的数量与要测试的样本数量相同(增加一个做控制实验)。18、 每个小试管加入1000微升水合后的试剂。19、 等15分钟。20、 进行零时间读数。21、 每个样本取10微升加到相应的小试管中。22、 5分钟后,将样本试管依次放入样本室进行第二次读数。23、 当最后一个样本读完,按
19、“STOP”键,终止读数和实验。屏幕显示“ToxReadingDone”和最后一个试管的读数。再按一次“STOP”键回到省缺界面。查看结果24、 可以按测试样本的时间顺序查看测试结果。25、 要查看结果进行以下操作:l 按“ENTER”键并使用右箭头键()滚动到“Dat.”。l 在“Dat.”按“ENTER”键l 在“Cycle”按“ENTER”键l 选到“B-Tox”按“ENTER”键创建的第一个记录的记录头(Record#001)出现在屏幕上,显示为:按右箭头键(),你可以在已经读过的样本间滚动,如果你要看的记录没有出现,继续按右箭头键(),直到该记录出现。当到最后一个记录时,会显示“No
20、morerecords”。在任何一个记录出现时,按“ENTER”键回到省缺界面。关闭分析仪如果所有的实验已经完成,也不查看历史数据,按“OFF”键关闭分析仪。(注意:如果仪器超过30分钟不用,仪器自动关闭)45%B-Tox中毒性样本测试过程本测试过程是用来检测被估计有中毒性的样本的(例如暴雨雨水等)。分析仪设置1、 将分析仪放到一个平稳、干净的平面上。2、 按“ON”键打开电源。分析仪将进行1分钟的自检。3、 如果1分钟自检通过,省缺的开机屏幕显示。在屏幕上确认分析仪的环境温度在10-28范围内。4、 如果屏幕上没显示希望的模式(B-Tox),按“MODE”键,直到屏幕显示“B-Tox”。设置
21、DeltaTox5分钟的培养时间。测试过程5、 将四个小试管放到试管支架的A1、A2和B1、B2四个位置。6、 加1000微升稀释液入A1。7、 加1000微升样本入A2。8、 加100微升渗透调节液入A2,并用吸移器混合。9、 用1.5ml稀释液(1500微升)使1小瓶特有试剂水合(见附录“试剂水合”)。10、 将水合的试剂倒入一个小试管。11、 使用500微升的吸移器将试剂混合3到4次。12、 在B1和B2两个试管中各加500微升水合试剂。13、 等待15分钟。14、 在确保分析仪的样本室没有试管的条件下(确认样本室盖子盖好,且插销插好)按“START”键。设备将顺序显示“Closelid
22、andlatch”、“WaitingforPMTtowarmup”、“Readingdarkcurrent.Pleasewait.”。这期间,设备创建并打开一个记录。设备将提示操作者放入控制样本试管(“Insertcontrolcuvette”),准备进行第一组读数(零时间读数)。15、 将控制实验小试管B1放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管B1。取出控制小试管B1,放到试管架上B1位置。16、 将测试样本小试管B2放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管B2。按“STOP”键,取出控制小试管B2,放到试管架上B2位置。17、 立即从A1中
23、取500微升(室温下控制样本)加到小试管B1。18、 从A2中取500微升(室温下测试样本)转移到小试管B2。19、 摇晃B1和B2试管,是其混合。5分钟到计时后,报警声响,报警灯亮,设备准备进行第二次读数。20、 将控制实验小试管B1放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管B1。取出控制小试管B1,放到试管架上B1位置。21、 将样本小试管B2放入样本室。盖好盖子,插好插销后按“READ”键,读取控制小试管A2。DeltaTox分析仪的显示屏上自动显示光损失或光增益百分比。按“STOP”键返回省缺界面。81.9%B-Tox低毒性样本测试过程本测试过程是用来检测被估计有
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