废水生物处理新发展优秀PPT.ppt
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1、废水生物处理新发展废水生物处理新发展你现在浏览的是第一页,共64页 随着现代生物技术的发展以及向环境学科的不断渗透,一门新的学科环境生物技术应运而生。环境生物技术生物技术在环境学科中的应用,是现代生物技术与环境科学与工程紧密结合而形成的新兴交叉学科。2001-12-8你现在浏览的是第二页,共64页2001-12-8生物技术生物技术基因工程基因工程基因工程菌基因工程菌分子生物学技术分子生物学技术微生物及微生物微生物及微生物 群落分析群落分析酶工程酶工程酶的应用酶的应用发酵工程发酵工程废水处理产能、产电等,废水处理产能、产电等,CH4、H2、MFC、乙醇等乙醇等你现在浏览的是第三页,共64页 酶在
2、废水处理中的应用越来越受到重视,这是因为:(1)难降解有机污染物的排放日益增多,使用传统的化学和生物处理方法已很难达到令人满意的去除效果,这就需要寻找比现行方法更快捷、更经济、更可靠、更简便的方法;(2)人们已逐渐认识到酶能用来专门处理某些特定的污染物;(3)生物工程技术的发展使酶的生产成本降低。2001-12-8你现在浏览的是第四页,共64页 大多数废水处理过程可分为物理化学过程和生物处理过程。酶的处理介于二者之间,因为它所参与的化学反应建立在生物催化剂的作用基础上。将酶直接用于污染治理时,与传统的生物方法相比,存在以下一些潜在的优势:酶具有高度选择性,不易被有生物毒性的物质所抑制;可以处理
3、生物难降解的化合物;可以处理各种浓度污染物,尤其是低浓度有机污染物;可以在各种pH、温度和盐度环境下使用;不存在冲击负荷效应;不存在与生物生长及其适应相关的滞后效应,所需HRT短;减少污泥产量(不产生污泥);处理过程的控制简便易行。2001-12-8你现在浏览的是第五页,共64页 因此,酶处理方法是一种有前途的废水处理技术。特别适用于低浓度、高毒性污染物的处理。利用基因工程和蛋白质工程扩展酶的代谢途径,是治理难降解有毒有机污染物的主要方法。研究方向:酶的修饰、酶的固定化、酶反应器的开发等。2001-12-8你现在浏览的是第六页,共64页 酶:过氧化物酶(如辣根过氧化物酶、木质素过氧化物酶);聚
4、酚氧化酶(如漆酶);蛋白酶淀粉酶脂酶废水:含芳香族化合物的废水(如石化废水、印染废水);含睛(氰)废水;食品加工废水。Return2001-12-8你现在浏览的是第七页,共64页基因工程为改变细胞内的关键酶或酶系统提供了可能,从而可以:提高微生物的降解速率;拓宽底物的专一性范围;维持低浓度下的代谢活性;形成降解有毒污染物的新型催化活性;改善微生物的其他生物学特性。2001-12-8你现在浏览的是第八页,共64页主要应用:开发脱氮除磷新工艺,增强脱氮除磷能力有毒有机污染物的降解重金属和放射性废水的处理2001-12-8你现在浏览的是第九页,共64页难降解有机污染物、毒性有机污染物、持久性有机污染
5、物(POPs)、内分泌干扰物等。共同特点:通常情况下(如活性污泥法),难以被生物降解。目前采用的方法:AOPs 生物处理将来可能的方法:生物技术化工技术微生物基因改造;增加代谢途径微生物所处微环境的改造:固定化(人工包埋、生物膜),新型反应器的构建:改变微生物的微环境、抵抗污染物的毒性、提高在处理系统的持留能力等。2001-12-8 Return你现在浏览的是第十页,共64页2001-12-8废水处理目标废水处理目标传统方法传统方法 去除污染物去除污染物好氧(好氧(CO2)厌氧(厌氧(CH4)将废水中的有机污染物转化将废水中的有机污染物转化成有价值的物质和能量载体:成有价值的物质和能量载体:如
6、甲烷、乙醇、氢气、电等。如甲烷、乙醇、氢气、电等。处理水回用处理水回用回用回用资源化资源化能源化能源化你现在浏览的是第十一页,共64页废水中的能量回收:将废水有机污染物中或剩余污泥中储存的能量转化成甲烷、乙醇、氢气、电等形式的能量。产甲烷:较为成熟产乙醇:研究较少产氢气:提高氢的产率,产电:MFC(微生物学、电化学、材料学、工程学)。2001-12-8 Return你现在浏览的是第十二页,共64页2001-12-8极端环境极端环境微生物微生物嗜冷微生物嗜冷微生物寒冷地区的废寒冷地区的废水处理水处理饮用水处理饮用水处理嗜盐微生物嗜盐微生物耐辐射微生物耐辐射微生物含盐废水处理含盐废水处理放射性废水
7、处理放射性废水处理贫营养微生物贫营养微生物你现在浏览的是第十三页,共64页 基于现代生物学的分子方法,为深入研究废水生物处理过程中各种微生物的作用,为深刻理解废水处理过程的本质、提高处理系统的性能以及进行工艺革新等提供了新的强有力的方法和手段,为我们了解这些处理系统中的微生物生态并对处理过程进行工程控制提供了可能。分子生物学方法的出现使我们有可能更好的理解现有的生物处理工艺以及开发新的处理工艺。2001-12-8你现在浏览的是第十四页,共64页与建立在某些表型特性基础上的细胞富集培养方法不同,分子方法直接针对微生物群落的基因信息,分子技术测定的是细胞DNA或RNA的碱基序列。分子方法以不同类型
8、的DNA或RNA为目标,这取决于我们需要哪种信息。表1总结了检测目标以及每个目标能够提供的信息。2001-12-8分子方法探询的基因目标分子方法探询的基因目标你现在浏览的是第十五页,共64页2001-12-8目标获得的信息核糖体(r)RNA系统发育身份,它们是什么?DNA上编码 rRNA 的基因系统发育身份,它们是什么?DNA上的其他基因表型潜力,它们能够做什么?信使(m)RNA表型活性,它们正在做什么?蛋白质或其他报告产物表型活性或发育系统身份,它们是什么?或它们正在做什么?表表1 1 分子生物学方法探询的目标分子生物学方法探询的目标 你现在浏览的是第十六页,共64页2001-12-8为了确
9、定群落中的微生物在系统发育上的身份,以为了确定群落中的微生物在系统发育上的身份,以 rRNA(通常是通常是16S rRNA)或用于编码或用于编码 rRNA 的基因为分子检的基因为分子检测的目标。测的目标。表型潜力,如对某种特殊基质的降解能力,可以通过在表型潜力,如对某种特殊基质的降解能力,可以通过在DNA上寻找相关基因来进行检测。已经得到表达的表型潜力可以通上寻找相关基因来进行检测。已经得到表达的表型潜力可以通过检测过检测mRNA 或蛋白质产物(如酶)来证明。或蛋白质产物(如酶)来证明。根据我们的研究需要,可以利用适当的分子方法来探询表根据我们的研究需要,可以利用适当的分子方法来探询表1给出的
10、基因目标,从这些基因分析中我们可以得到所需的给出的基因目标,从这些基因分析中我们可以得到所需的信息。信息。基因探询的目标如图基因探询的目标如图1所示。图所示。图1总结了微生物细胞如何总结了微生物细胞如何将将DNA中的遗传密码转录和翻译成蛋白质分子的机制。中的遗传密码转录和翻译成蛋白质分子的机制。你现在浏览的是第十七页,共64页2001-12-8复制基因转录信使RNA蛋白质产物翻译氨基酸转运RNA微生物细胞内的信息流动示意图微生物细胞内的信息流动示意图DNA,mRNA,rRNA和蛋白质产物均可以作为分子方法探询的基因目标。和蛋白质产物均可以作为分子方法探询的基因目标。你现在浏览的是第十八页,共6
11、4页 核糖体RNA(rRNA)是目前用于构建生物系统发育树比较可靠的基因目标,可以为我们提供微生物群落中某一特定微生物丰度方面的信息。目前人们最常用的基因目标是rRNA,这是基于以下原因。2001-12-8你现在浏览的是第十九页,共64页2001-12-8(1)生物细胞需要)生物细胞需要rRNA将遗传信息翻译成蛋白质,因此,将遗传信息翻译成蛋白质,因此,rRNA存在于存在于所有的生物细胞中;所有的生物细胞中;(2)生物细胞内含有大量的核糖体,因此,)生物细胞内含有大量的核糖体,因此,rRNA相对来说容易检测到;相对来说容易检测到;(3)由于)由于rRNA被包埋于核糖体中,因而相对较为稳定;被包
12、埋于核糖体中,因而相对较为稳定;(4)细菌和古细菌的小亚单位)细菌和古细菌的小亚单位rRNA,即通常所说的即通常所说的16S rRNA,大约含大约含1600个碱基对,这个碱基对,这1600个碱基对可以提供足够的进化信息,从中选择个碱基对可以提供足够的进化信息,从中选择15-20个碱基对序列的寡核苷酸片段用作探针,可以检测和鉴定多种微生物;个碱基对序列的寡核苷酸片段用作探针,可以检测和鉴定多种微生物;(5)从环境样品中分离出)从环境样品中分离出rRNA并用于微生物系统发育、种类鉴定、多态并用于微生物系统发育、种类鉴定、多态性及多样性研究的方法已经全面建立。性及多样性研究的方法已经全面建立。利用利
13、用rRNA序列研究微生物群落特征的方法总结如图序列研究微生物群落特征的方法总结如图2。你现在浏览的是第二十页,共64页2001-12-8利用利用rRNA序列研究微生物群落特征的方法序列研究微生物群落特征的方法 你现在浏览的是第二十一页,共64页2001-12-8分子信息及其应用分子信息及其应用 微生物细胞拥有一个复杂的信息流动网络,微生物细胞拥有一个复杂的信息流动网络,并用来决定其类型和控制其行为。这些信息并用来决定其类型和控制其行为。这些信息在在DNA中编码。中编码。DNA编码的基因并不实际承担任编码的基因并不实际承担任何细胞工作,如能量产生或合成。相反,它们通过何细胞工作,如能量产生或合成
14、。相反,它们通过精确的、多步骤机制解码精确的、多步骤机制解码DNA上的信息,并最上的信息,并最终生成各种工作分子,如催化细胞内生化反终生成各种工作分子,如催化细胞内生化反应需要的酶。应需要的酶。你现在浏览的是第二十二页,共64页目前常用的分子方法有:核酸分子杂交变性梯度凝胶电泳限制性片段长度多态性末端限制性片段长度多态性2001-12-8常用的分子生物学方法常用的分子生物学方法你现在浏览的是第二十三页,共64页探针是能与特定核苷酸序列发生特异性结合的己知碱基序列的核酸片段。它可以是长探针(100-1000 bp),也可以是短核苷酸片段(10-50 bp);可以是从RNA制备的cDNA探针,也可
15、以是PCR产物或人工合成的寡核苷酸探针。探针既可用放射性核苷酸标记,也可用非放射性分子标记。核酸分子杂交的高度特异性以及检测方法的高度灵敏性,使核酸分子杂交技术广泛应用于检测环境中的微生物,并对它们的存在、分布、丰度和适应性等进行定性和定量分析。2001-12-8你现在浏览的是第二十四页,共64页核酸杂交的主要步骤是核酸分子的变性和选择性退火。双链DNA或处于二级结构的RNA分子通过变性回复到它们原来的单链、线性形式,从而使它们处于能与互补的核苷酸链退火杂交的状态。核酸杂交以碱基配对原理为基础,利用寡核苷酸探针与靶细胞专一性结合进行生物分析。核酸杂交的基本实验步骤为:细胞固定、杂交(专一性和严
16、格性依赖于杂交温度和时间、盐浓度、探针长度及其浓度)、洗脱(去除与靶细胞没有结合和非专一性结合的物质)和检测,如下图所示。2001-12-8你现在浏览的是第二十五页,共64页2001-12-8标记探针的原理标记探针的原理磷酸标记的探针磷酸标记的探针变性、转膜变性、转膜3553加入标记探加入标记探针、杂交针、杂交3535放射自显影放射自显影53353探针探针探针探针*53*35你现在浏览的是第二十六页,共64页2001-12-8核酸杂交的步骤核酸杂交的步骤 你现在浏览的是第二十七页,共64页2001-12-8核酸杂交试验并不要求探针与目标核酸序列之间百分之百地核酸杂交试验并不要求探针与目标核酸序
17、列之间百分之百地互补。有限数目的非互补碱基对的存在是可以接受的。互补。有限数目的非互补碱基对的存在是可以接受的。互补的单链核苷酸分子经退火形成核酸双链分子的过程互补的单链核苷酸分子经退火形成核酸双链分子的过程是可逆的。因此,可以通过改变反应的物理和化学环境是可逆的。因此,可以通过改变反应的物理和化学环境(条件)从而增加核酸双链分子生成的速度、程度及其稳(条件)从而增加核酸双链分子生成的速度、程度及其稳定性。定性。影响两段互补核苷酸链杂交的因素包括:杂交和洗膜的温影响两段互补核苷酸链杂交的因素包括:杂交和洗膜的温度、杂交时间、离子强度、甲酰胺浓度、碱基对之间非互补度、杂交时间、离子强度、甲酰胺浓
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