兽药残留.pptx

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1、食品中兽药残留量食品中兽药残留量的分析检测的分析检测 团队团队：F(X)组员组员组员组员：2021/9/132兽药残留兽药残留安全问题安全问题出口日本的一万吨肉鸡，由于检测出抗球虫药氯羟吡啶氯羟吡啶的残留量超标，要求我国政府销毁所有产品。与此同时，出口到德国的蜂蜜由于农药“杀虫脒杀虫脒”残留超标而被退货，接着欧共体、美国、日本也相继拒绝进口我国蜂蜜。日本政府制订法规，规定对来自中国的鳗鱼鳗鱼须加强对抗生素、磺胺制剂及恶喹酸三项有害物质控制检查，其中土霉素等四环素类抗生素要求未检出（检测限为0.1mg/kg）。2021/9/133一一.兽药残留研究背景兽药残留研究背景u 兽兽药药：预预防防和和治

2、治疗疗畜畜禽禽疾疾病病的的药药物物；促促进进生生长长、提提高高生生产产性性能能、改改善善动动物物性性食食品品的的品品质质；也也包包括括一一些些化化学学的的、生生物物的的动动物物保保健品或饲料添加剂。健品或饲料添加剂。u现现代代化化的的动动物物集集中中饲饲养养，经经常常需需要要使使用用抗抗生生素素或或其其他他药药物物来来控控制制可可能能爆爆发发的的疾疾病病，同同时时有有效效使使用用兽兽药药可可以以在在很很大大程程度度上上提提高高动物对饲料的利用率。动物对饲料的利用率。2021/9/1341.11.1兽药残留的类型兽药残留的类型u抗抗生生素素类类：氯氯霉霉素素、四四环环素素、土土霉霉素素、青青霉素

3、等；霉素等；u 磺胺类：磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶等；磺胺类：磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶等；u 呋呋喃喃类类：呋呋喃喃唑唑酮酮、呋呋喃喃西西林林、呋呋喃喃妥妥因因等；等；u 激激素素和和-兴兴奋奋剂剂：盐盐酸酸克克伦伦特特罗罗、己己烯烯雌雌酚、孕酮等；酚、孕酮等；u 抗抗寄寄生生虫虫类类：左左旋旋咪咪唑唑、苯苯丙丙咪咪唑唑、克克并并咪唑、克球酚、吡喹酮等。咪唑、克球酚、吡喹酮等。2021/9/1351.21.2兽药残留产生的原因兽药残留产生的原因p 非法使用违禁或淘汰药物；非法使用违禁或淘汰药物；p 不遵守休药期规定；不遵守休药期规定；p 滥用药物；滥用药物；p 违背有关标签的规定；违背有关标签的规定

4、；p 屠宰前用药。屠宰前用药。2021/9/1361.31.3兽药残留的危害兽药残留的危害u破坏微生态平衡，导致二重感染破坏微生态平衡，导致二重感染;u 引发过敏反应；引发过敏反应；u 导致病原菌产生耐药性导致病原菌产生耐药性;u毒性损害毒性损害;u 致畸、致癌、致突变作用致畸、致癌、致突变作用;u 影响生态环境；影响生态环境；u 影响畜牧业的发展影响畜牧业的发展2021/9/137二二.兽药残留检测兽药残留检测2021/9/138兽药残留检测方法兽药残留检测方法 1.兽兽药药残残留留的的检检验验分分析析方方法法包包括括筛筛选选、检检测测和和确确认认。2.2021/9/139兽药残留兽药残留检

5、测检测方法方法中华人民共和国农业部公告中华人民共和国农业部公告第第236236号号 根据兽药管理条例规定，我部组织制定了12种动物性食品中兽药残留检测方法，现予发布，请各地遵照执行。附件附件：动物性食品中兽药残留检测方法.doc中华人民共和国农业部 二OO三年一月二十二日 2021/9/13102.2.12.2.1高效液相色谱仪高效液相色谱仪 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时,经过反复多

6、次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。2021/9/1311HPLC原理原理1）高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。2）与试样预处理技术相配合，HPLC 所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。2021/

7、9/1312高效液相色谱法高效液相色谱法应用应用HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。2021/9/13132.2.22.2.2微生物测定法微生物测定法 microbiological assay 在规定条件下选用适当微生物测定某物质含量的方法。被测定的物质可以是某些生物生长所必需的维生素、氨基酸等，也可以是抑制某些微生物生长的抗生素、农药等。常使用的有液体稀释法和固体平板扩散法

8、。2021/9/1314微生物测定微生物测定常用办法常用办法1.1.液体稀释法液体稀释法在一组试管中分别加入一定的培养基，然后加入不等量的被测物质，再将已培养好的、用于测定的微生物接种进去,在规定的条件下培养一定时间,观察其消长情况并与标准曲线对比，计算出被测物质的含量。2021/9/1315微生物测定微生物测定常用办法常用办法2.2.固体平板扩散法固体平板扩散法将溶化的固体培养基与被测定微生物混合做成平板，把含不等量被测物质的液体滴入置于平板上(直接滴样法)；或注入平板上的牛津杯内（管碟法）；或吸入圆形滤纸片后，再置于平板上(纸片法)；也可以在平板上挖一定大小的圆孔，然后把被测物滴入孔内（打

9、孔法）；经培养后在物质扩散所及的范围内出现抑菌法（或生长圈）,测量圈的直径,并与标准曲线对比,计算出被测物质的含量2021/9/1316 固体平板扩散法固体平板扩散法 1 1、3 3、7 7 打孔法打孔法，2 2、8 8纸片纸片法法，4 4、6 6管碟法管碟法5 5直接滴样法直接滴样法。2021/9/13172.2.32.2.3猪组织中盐酸克伦特罗的检猪组织中盐酸克伦特罗的检验验 (1)(1)盐酸克伦特罗概述盐酸克伦特罗概述u盐盐酸酸克克伦伦特特罗罗（clenbuterol，CLB）是是一一种种选选择择性性 2 2-肾肾上上素素受受体体激激动动剂剂（简简称称-兴兴奋奋剂剂），是是国国家家按按兴

10、兴奋奋剂剂管管理理的的药药品品，为为人人、畜畜呼呼吸吸系系统统药药物物（氨氨哮哮素素、克克喘喘素素）。盐盐酸酸克克伦伦特特罗罗可可促促进进动动物物生生长长，加加速速脂脂肪肪转转化化，提提高高瘦瘦肉肉率率，被被俗俗称称为为“瘦肉精瘦肉精”。l-(叔丁氨基叔丁氨基)甲基甲基-4-氨基氨基-3，5-二氯苯甲二氯苯甲醇盐酸盐醇盐酸盐 2021/9/1318 (2)(2)盐酸克伦特罗加速脂肪转化盐酸克伦特罗加速脂肪转化胰高血糖素胰高血糖素促甲状腺激素促甲状腺激素cAMPcAMP脂肪酶脂肪酶激活激活激活激活2021/9/1319(3)盐酸克伦特罗的非法使用盐酸克伦特罗的非法使用u非非法法使使用用作作为为饲

11、饲料料添添加加剂剂，使使用用量量大大（是是治治疗疗剂剂量量的的5-105-10倍倍），使使用用时时间间长长（持持续续添添加加时时间间一一般般3 3周周以以上上），代代谢谢慢慢，因因而而容容易易在在动动物物体体内内（尤尤其其是是眼眼 、肺肺、肝肝、肾肾 ）残残留留。盐盐酸酸克克伦伦特特罗罗通通过过食食物物链链进进入入人人体体，产产生生蓄蓄积积中中毒毒，如如头头晕晕、乏乏力力、心心律律失失常常等等。因因此此，国国内内外外已已经经禁禁止止-肾肾上腺素激动剂在动物生产中的应用。上腺素激动剂在动物生产中的应用。2021/9/1320（4 4）猪组织中盐酸克伦特罗的检验猪组织中盐酸克伦特罗的检验ELISA

12、ELISA法法GB/T GB/T 5009.192-20035009.192-2003动动物物性性食食品品中中克克伦伦特特罗罗残残留留量量的的测测定定，提出了从ELISAELISA(酶酶联联免免疫疫吸吸附附测测定定)筛选、HPLC定量到GC-MS确证和定量对动物性食品中克伦特罗残留量进行监测。（A)A)基基本本原原理理：微孔板包被有针对克伦特罗IgG的抗抗体；加入克伦特罗抗体，经过温育和洗涤后；加入酶标记物、标准或样品溶液，克伦特罗与酶标记物竞争与抗体结合；没有连接的克伦特罗酶标记物在被洗涤除去；加入酶底物和发色剂并且温育，结合的酶标记物将无色的发色剂为蓝色的产物，加入反应终止液使颜色有蓝转变

13、为黄色。在450nm处比色测定。2021/9/1321(B)(B)实验设计实验设计 2021/9/1322(C)实验的关键操作实验的关键操作 试剂盒的选择和准备；试剂盒的选择和准备；试样的处理；试样的处理；加样；加样；洗涤；洗涤；比色。比色。2021/9/1323(D)检检验验具体具体操作操作1 1）试剂盒的选择和准备试剂盒的选择和准备l储存条件：储存条件：2-8 2-8；l 室室温温平平衡衡：试试验验用用试试剂剂应应提提前前1-2h1-2h从从冰冰箱中取出，待温度与室温平衡后使用；箱中取出，待温度与室温平衡后使用；l及及时时保保存存：试试剂剂完完毕毕后后不不需需用用的的部部分分应应及时放回冰

14、箱保存。及时放回冰箱保存。2021/9/13242 2）试样的处理）试样的处理l 尽可能使用新鲜样本；尽可能使用新鲜样本；l 进行必要的前处理。进行必要的前处理。3 3）加样）加样l 加样前样本必须混合均匀；加样前样本必须混合均匀；l 加加在在板板孔孔底底部部，避避免免加加在在孔孔壁壁上上部；部；l 不可溅出，不可产生气泡；不可溅出，不可产生气泡；l 每每次次加加标标本本应应更更换换吸吸嘴嘴，以以免免发发生交叉污染；生交叉污染；l 加加酶酶结结合合物物和和底底物物时时可可用用定定量量多多道加液器。道加液器。2021/9/13254 4）温育）温育l 温育前必须震动混匀，但不可溅出；温育前必须震

15、动混匀，但不可溅出；l 温育的温度和时间应按规定力求准确；温育的温度和时间应按规定力求准确；l 温育必须避光。温育必须避光。5 5）洗涤）洗涤l 清洗必须彻底；清洗必须彻底；l 避免出现板孔干燥；避免出现板孔干燥；l 反反转转倾倾空空微微孔孔板板要要迅迅速速，避避免免清清洗洗液液混合。混合。2021/9/13266 6）显色和比色）显色和比色l 显色的温度和时间应按规定力求准确；显色的温度和时间应按规定力求准确；l 显色必须避光；显色必须避光；l 使用多道加液器加终止液；使用多道加液器加终止液；l 显色完毕后尽快比色测定。显色完毕后尽快比色测定。2021/9/1327三三.兽药残留监控措施兽药

16、残留监控措施遵守最高残留限量和休药期规定是避免兽药残遵守最高残留限量和休药期规定是避免兽药残留超标，确保动物性食品安全的关键。在畜牧业留超标，确保动物性食品安全的关键。在畜牧业生产过程中，只要科学、合理地使用兽药，不使生产过程中，只要科学、合理地使用兽药，不使用违禁药物和未被批准的药物，就不会导致动物用违禁药物和未被批准的药物，就不会导致动物性食品中兽药残留超标、危害消费者健康的情况性食品中兽药残留超标、危害消费者健康的情况发生。发生。2021/9/1328兽药残留监控措施兽药残留监控措施到到目目前前为为止止，农农业业部部已已先先后后制制订订、修修订订并并颁颁布布了了240240多多种种兽兽药

17、药在在动动物物性性食食品品中中最最高高残残留留限限量量标标准准和和休休药药期期标标准准；建建立立了了动动物物性性食食品品中中5252种种兽兽药药残残留留的的检检测测方方法法标标准准；建建立立了了完完整整的的兽兽药药残残留留检检测测网网络络结结构构，开开展展了了兽兽药药残残留留的的基基础础研研究究和和实实际际监监控控工工作作，初初步步建建立立起起适适合合我我国国国国情情并并与与国国际际接接轨轨的的兽兽药药残残留留监监控控体体系系。自自19991999年年以以来来，我我国国已已连连续续6 6年年开开展展了了动动物物性性食食品品中中兽兽药药残残留留的的监监测测工工作作，监监测测地地区区、动动物物种种类、兽药种类、样品数量每年都有大幅度的增长。类、兽药种类、样品数量每年都有大幅度的增长。2021/9/1329