现代生物技术和环境污染治理.ppt
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1、关于现代生物技术与环境污染治理第一张,PPT共五十九页,创作于2022年6月第一节第一节 现代生物技术的概述现代生物技术的概述第二张,PPT共五十九页,创作于2022年6月1.11.1、现代生物技术概述、现代生物技术概述一、一、生物技术生物技术生物技术生物技术 生物技术(生物技术(BiotechnologyBiotechnology)是指利用生物有机体或组成部分发展新)是指利用生物有机体或组成部分发展新产品或新工艺的一种技术体系。产品或新工艺的一种技术体系。基因工程:核酸的分离、提取、体外剪切、拼接重组以及扩基因工程:核酸的分离、提取、体外剪切、拼接重组以及扩增与表达等技术。增与表达等技术。细
2、胞工程:细胞的离体培养、繁殖、再生、融合,细胞细胞工程:细胞的离体培养、繁殖、再生、融合,细胞核、质、器的移植改建。核、质、器的移植改建。酶工程:利用酶的特异催化功能,借助固定化,生物反应器等酶工程:利用酶的特异催化功能,借助固定化,生物反应器等新技术生产特定产品的技术新技术生产特定产品的技术发酵工程:为微生物提供最适宜的发酵条件,生产特定产品的技术发酵工程:为微生物提供最适宜的发酵条件,生产特定产品的技术生生生生物物物物技技技技术术术术第三张,PPT共五十九页,创作于2022年6月生物技术的依据和出发点:生物技术的依据和出发点:生物在生长、发育与繁殖过程中进行物质合成、降解生物在生长、发育与
3、繁殖过程中进行物质合成、降解和转化的能力。和转化的能力。生物技术的核心基础是基因工程和细胞工程。生物技术的核心基础是基因工程和细胞工程。优越性:优越性:优越性:优越性:不可取代不可取代快速、精确快速、精确低耗、高效低耗、高效副产物、副作用小副产物、副作用小安全性好安全性好 第四张,PPT共五十九页,创作于2022年6月二、现代生物技术的发展二、现代生物技术的发展v 目前发达国家目前发达国家中经营石油,化工,医药,酿造和中经营石油,化工,医药,酿造和种子等产业的公司无一例外地都竞相开展生物技术的种子等产业的公司无一例外地都竞相开展生物技术的研究和发展生物技术产业。研究和发展生物技术产业。v 我国
4、生物技术目前发展的重点我国生物技术目前发展的重点:为进一步发展:为进一步发展农业培育高产优质和抗逆的动植物新品种:为防农业培育高产优质和抗逆的动植物新品种:为防治严重疾病研制新型疫苗和药物:为医药、食品治严重疾病研制新型疫苗和药物:为医药、食品化工和农业生产开辟新途径开发蛋白质工程技术。化工和农业生产开辟新途径开发蛋白质工程技术。第五张,PPT共五十九页,创作于2022年6月1.21.2、现代生物技术在环境科学中的应用前、现代生物技术在环境科学中的应用前景景 环境生物技术环境生物技术 就是应用于认识和解决环境问题过程的生物技术体就是应用于认识和解决环境问题过程的生物技术体系、包括对环境污染效应
5、的认识、环境质量评价和环境系、包括对环境污染效应的认识、环境质量评价和环境污染的生物处理技术等。污染的生物处理技术等。生物技术最早应用于环境污染治理的是利用农业废物沤制堆肥。生物技术最早应用于环境污染治理的是利用农业废物沤制堆肥。废水生物处理主要方法废水生物处理主要方法活性污泥法已经过活性污泥法已经过8080余年的历程。余年的历程。第六张,PPT共五十九页,创作于2022年6月第二节第二节 基因工程与环境污染生物基因工程与环境污染生物治理治理第七张,PPT共五十九页,创作于2022年6月2.12.1、基因工程分子生物学基础、基因工程分子生物学基础遗传物质分子遗传物质分子遗传物质分子遗传物质分子
6、脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸DNADNADNADNADNADNA是由大量的脱氧核糖核苷酸组成的生物大分子。可变是由大量的脱氧核糖核苷酸组成的生物大分子。可变部分是其碱基序列,嘌呤和嘧啶碱基携带遗传信息部分是其碱基序列,嘌呤和嘧啶碱基携带遗传信息,糖和磷糖和磷酸基则起结构作用。(四种碱基:腺嘌呤酸基则起结构作用。(四种碱基:腺嘌呤A A、鸟嘌呤、鸟嘌呤G G、胸腺、胸腺嘧啶嘧啶T T、胞嘧啶、胞嘧啶C C)基因基因基因基因v基因是基因是DNADNA分子上的一个特定的片段,不同基因的遗传信息有各自分子上的一个特定的片段,不同基因的遗传信息有各自片段的碱基排列顺序所决定。片段的碱
7、基排列顺序所决定。v基因通过转录出的信息是核糖核酸指导基因通过转录出的信息是核糖核酸指导mRNAmRNA合成特定的蛋白质,合成特定的蛋白质,使基因的以表达,完成特定的生命活动。使基因的以表达,完成特定的生命活动。第八张,PPT共五十九页,创作于2022年6月2.22.2、基因工程的基本过程、基因工程的基本过程 一、基因工程的工具酶一、基因工程的工具酶一、基因工程的工具酶一、基因工程的工具酶 要进行基因片段的剪切和拼接,首先需要能在特定位要进行基因片段的剪切和拼接,首先需要能在特定位置上切割置上切割DNADNA分子的限制性内切酶核能将分子的限制性内切酶核能将DNADNA片段连接在一起的片段连接在
8、一起的DNADNA连接酶。连接酶。每种限制酶只能识别特定的核苷酸序列,并在其中特每种限制酶只能识别特定的核苷酸序列,并在其中特定的切点上切割定的切点上切割DNADNA分子,把两种来源不同的分子,把两种来源不同的DNADNA用同一种用同一种限制酶来切,然后让两者的末端粘起来,在用限制酶来切,然后让两者的末端粘起来,在用DNADNA连接酶将其连接酶将其连接起来,就可以组成重组连接起来,就可以组成重组DNADNA分子分子第九张,PPT共五十九页,创作于2022年6月二、基因工程载体二、基因工程载体二、基因工程载体二、基因工程载体v要将一个外源的基因送入受体细胞,需要有运输工具,要将一个外源的基因送入
9、受体细胞,需要有运输工具,这就是载体。这就是载体。v常用载体有:质粒,噬菌体,动植物病毒。常用载体有:质粒,噬菌体,动植物病毒。v质粒是基因工程最常用的载体,首先由于其上有某一限制酶的质粒是基因工程最常用的载体,首先由于其上有某一限制酶的单一切点,用同种酶切断的外源单一切点,用同种酶切断的外源DNADNA片段插入该质粒的切口,片段插入该质粒的切口,就组成了重组就组成了重组DNADNA分子。其次由于质粒上有选择性标记,可以分子。其次由于质粒上有选择性标记,可以根据受体细胞是否具有该种标记来判断受体细胞是否获得了该根据受体细胞是否具有该种标记来判断受体细胞是否获得了该重组质粒。因此质粒在基因工程中
10、得以广泛应用。重组质粒。因此质粒在基因工程中得以广泛应用。第十张,PPT共五十九页,创作于2022年6月三、目的基因的分离三、目的基因的分离三、目的基因的分离三、目的基因的分离1 1、从基因组直接分离目的基因、从基因组直接分离目的基因常用鸟枪法,用限制酶将某种生物的常用鸟枪法,用限制酶将某种生物的DNADNA切成片段并分别加切成片段并分别加入载体,对受体细胞进行转化,让外源入载体,对受体细胞进行转化,让外源DNADNA所有的片段都在宿主细所有的片段都在宿主细胞中大量扩增,在筛选出有目的基因的转化细胞。该法有一定的盲胞中大量扩增,在筛选出有目的基因的转化细胞。该法有一定的盲目性,工作量大。目性,
11、工作量大。2 2、酶促合成法、酶促合成法将真核细胞基因转录的全部将真核细胞基因转录的全部RNARNA提取出来,在体外经反转录酶的提取出来,在体外经反转录酶的作用,生成与作用,生成与mRNAmRNA互补的互补的DNADNA,即,即cDNAcDNA,再将,再将cDNAcDNA酶切后载入载酶切后载入载体,建立体,建立cDNAcDNA文库,筛选出目的基因。文库,筛选出目的基因。或对已知核苷酸顺序的目的基因,通过聚合酶链反应或对已知核苷酸顺序的目的基因,通过聚合酶链反应(PCRPCR)技术直接合成。)技术直接合成。第十一张,PPT共五十九页,创作于2022年6月四、目的基因与载体的重组工艺四、目的基因与
12、载体的重组工艺四、目的基因与载体的重组工艺四、目的基因与载体的重组工艺用同一种限制酶切割含有目的基因的外源用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNADNA和载和载DNA,DNA,产生相同的粘性末端,在产生相同的粘性末端,在DNADNA连接酶的作用下,形成完整连接酶的作用下,形成完整的重组的重组DNADNA分子。分子。五、将目的基因导入受体五、将目的基因导入受体五、将目的基因导入受体五、将目的基因导入受体在体外完成的在体外完成的DNADNA的重组后,一般将重组的的重组后,一般将重组的DNADNA分子导入受分子导入受体细胞让目的基因在受体细胞中表达。基因工程中常用的体细胞让目的基因在受体细胞中表达
13、。基因工程中常用的受体细胞是大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞。受体细胞是大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞。第十二张,PPT共五十九页,创作于2022年6月六、对目的基因的筛选和检测六、对目的基因的筛选和检测六、对目的基因的筛选和检测六、对目的基因的筛选和检测将目的基因在入载体,导入受体细胞后,必须对目的基因进行将目的基因在入载体,导入受体细胞后,必须对目的基因进行检测,确认细胞中以摄入重组的检测,确认细胞中以摄入重组的DNADNA分子。检测方法一般有遗传分子。检测方法一般有遗传学方法、原位杂交法和免疫学方法。学方法、原位杂交法和免疫学方法。七、目的基因在受体细胞中的表达七、目的基因
14、在受体细胞中的表达七、目的基因在受体细胞中的表达七、目的基因在受体细胞中的表达目的基因在受体细胞中的表达,受到许多因素的表达。目的基因在受体细胞中的表达,受到许多因素的表达。目的基因的阅读框架必须与载体目的基因的阅读框架必须与载体DNADNA的启示密码相吻合。的启示密码相吻合。要有适当的启动子保证目的基因的正确转录。要有适当的启动子保证目的基因的正确转录。基因的蛋白产物有时还需要经过修饰和加工才能成为有活性的功基因的蛋白产物有时还需要经过修饰和加工才能成为有活性的功能蛋白。能蛋白。第十三张,PPT共五十九页,创作于2022年6月2.32.3基因工程在环境生物处理中的应用基因工程在环境生物处理中
15、的应用应用基因工程菌处理污染物的主要优势:应用基因工程菌处理污染物的主要优势:应用基因工程菌处理污染物的主要优势:应用基因工程菌处理污染物的主要优势:集中与创造与目的基因,提供综合性代谢新污染的通路和杂种细集中与创造与目的基因,提供综合性代谢新污染的通路和杂种细胞。胞。提高代谢通路结构基因的表达,针对新的污染物,改变表达的调提高代谢通路结构基因的表达,针对新的污染物,改变表达的调节方式。节方式。控制降解途径的限制性步骤,提高分解代谢酶的合成或控制降解途径的限制性步骤,提高分解代谢酶的合成或其他生化反应过程效率其他生化反应过程效率防止有毒中污染物的产生,防止非需要产品的出现,用确定的基防止有毒中
16、污染物的产生,防止非需要产品的出现,用确定的基因实现最初的目的。因实现最初的目的。第十四张,PPT共五十九页,创作于2022年6月主要应用:主要应用:主要应用:主要应用:降解卤代芳烃的基因工程菌降解卤代芳烃的基因工程菌分解尼龙寡聚物的基因工程菌分解尼龙寡聚物的基因工程菌分解多糖的基因工程菌分解多糖的基因工程菌抗金属基因工程菌抗金属基因工程菌除草剂降解基因工程菌除草剂降解基因工程菌杀虫剂降解基因工程菌杀虫剂降解基因工程菌第十五张,PPT共五十九页,创作于2022年6月第三节第三节 细胞工程与环境污染生物处细胞工程与环境污染生物处理理第十六张,PPT共五十九页,创作于2022年6月3.1 3.1
17、细胞工程概述细胞工程概述细胞工程细胞工程细胞工程细胞工程细胞工程是利用细胞学技术,有计划地改造细胞遗传细胞工程是利用细胞学技术,有计划地改造细胞遗传结构,从而培育出人们所需要的生物品种或具有某些结构,从而培育出人们所需要的生物品种或具有某些新性状的细胞群体。新性状的细胞群体。细胞工程的内容细胞工程的内容细胞工程的内容细胞工程的内容细胞培养细胞培养:即使细胞在继续体外生长和繁殖。:即使细胞在继续体外生长和繁殖。细胞融合细胞融合:在一定条件下,将两个或多个细胞融合为:在一定条件下,将两个或多个细胞融合为一个细胞的过程,又称细胞杂交。一个细胞的过程,又称细胞杂交。第十七张,PPT共五十九页,创作于2
18、022年6月细胞重组细胞重组:在体外条件下,运用试验技术从活细胞中分离:在体外条件下,运用试验技术从活细胞中分离出各种细胞的结构或组件,再根据需要把它们在不同的细出各种细胞的结构或组件,再根据需要把它们在不同的细胞之间重新进行装配,成为具有生物活性的细胞。胞之间重新进行装配,成为具有生物活性的细胞。遗传物质转移遗传物质转移:基因在细胞水平上的转移。:基因在细胞水平上的转移。第十八张,PPT共五十九页,创作于2022年6月3.2 3.2 细胞融合构建环境工程菌细胞融合构建环境工程菌一、原生质体的制备与融合方法一、原生质体的制备与融合方法一、原生质体的制备与融合方法一、原生质体的制备与融合方法1.
19、1.概念:原生质体(概念:原生质体(ProtoplastProtoplast)v细胞质壁分离后去掉细胞壁所余下的那部分结构称细胞质壁分离后去掉细胞壁所余下的那部分结构称为原生质体。为原生质体。v原生质体具有原有细胞全部的内部结构与生理性能,原生质体具有原有细胞全部的内部结构与生理性能,但无细胞壁,细胞呈球形,对渗透压敏感,对外界理但无细胞壁,细胞呈球形,对渗透压敏感,对外界理化因子比较敏感化因子比较敏感。第十九张,PPT共五十九页,创作于2022年6月v在外界理化融合因子的诱导下,不同物种间的原生质在外界理化融合因子的诱导下,不同物种间的原生质体的质膜相互融合杂交,并在适当的条件下,融合的原体
20、的质膜相互融合杂交,并在适当的条件下,融合的原生质体再生出细胞壁并恢复原来完整的细胞形态与群落生质体再生出细胞壁并恢复原来完整的细胞形态与群落形态,构成具有多种遗传性状的新物种。故可利用原生形态,构成具有多种遗传性状的新物种。故可利用原生质体融合来构建新物种。质体融合来构建新物种。2.2.原生质体融合方法原生质体融合方法vv亲本的选择:亲本的选择:亲本的选择:亲本的选择:选择两种合适于充足的亲本菌株,选定适选择两种合适于充足的亲本菌株,选定适宜的遗传标记。宜的遗传标记。第二十张,PPT共五十九页,创作于2022年6月vv原生质体的制备:原生质体的制备:原生质体的制备:原生质体的制备:选用合适的
21、酶系,在等渗溶液中溶解选用合适的酶系,在等渗溶液中溶解细胞壁。细胞壁。vv原生质体的再生原生质体的再生原生质体的再生原生质体的再生:酶解后得到的原生质体能够在:酶解后得到的原生质体能够在等渗的培养基中重建细胞壁,恢复细胞完整形态,等渗的培养基中重建细胞壁,恢复细胞完整形态,并能生长、分裂的过程称为再生。并能生长、分裂的过程称为再生。vv原生质体的融合与融合子的检出:原生质体的融合与融合子的检出:原生质体的融合与融合子的检出:原生质体的融合与融合子的检出:化学诱导法:化学诱导法:在得到两亲本原生质体后,等量混合在得到两亲本原生质体后,等量混合两亲本的原生质体,加入适量的两亲本的原生质体,加入适量
22、的PEGPEG(聚乙二醇)和(聚乙二醇)和钙离子溶液,保温后,洗去多余的钙离子溶液,保温后,洗去多余的PEGPEG,在选择培养,在选择培养基上筛选出融合子。基上筛选出融合子。电融合法:电融合法:借助电场的作用,引发细胞融合。借助电场的作用,引发细胞融合。第二十一张,PPT共五十九页,创作于2022年6月二、原生质体融合来构建环境工程菌二、原生质体融合来构建环境工程菌二、原生质体融合来构建环境工程菌二、原生质体融合来构建环境工程菌原生质体融合构建苯环化合物降解菌原生质体融合构建苯环化合物降解菌原生质体融合构建纤维素降解菌原生质体融合构建纤维素降解菌聚已二醇诱导原生质体融合制备细菌杀虫剂聚已二醇诱
23、导原生质体融合制备细菌杀虫剂电融合诱导选育利用木糖和纤维二糖产乙醇的电融合诱导选育利用木糖和纤维二糖产乙醇的菌株。菌株。第二十二张,PPT共五十九页,创作于2022年6月第四节第四节 酶学工程与环境污染生物治酶学工程与环境污染生物治理理第二十三张,PPT共五十九页,创作于2022年6月4.1 4.1 酶学工程基本概念与研究现状酶学工程基本概念与研究现状酶工程(酶工程(酶工程(酶工程(Enzymatic EngineeringEnzymatic EngineeringEnzymatic EngineeringEnzymatic Engineering)指利用生物有机体内酶所具有的特异催化功能,借
24、助固指利用生物有机体内酶所具有的特异催化功能,借助固定化生物反应器和生物传感器等技术、装置,高效优质定化生物反应器和生物传感器等技术、装置,高效优质地生产特定产品的技术。地生产特定产品的技术。目前酶工程主要研究酶的生产、纯化和固定化技术以及目前酶工程主要研究酶的生产、纯化和固定化技术以及在环境污染治理、工业、医药、卫生和理论探索等方面在环境污染治理、工业、医药、卫生和理论探索等方面的应用。的应用。第二十四张,PPT共五十九页,创作于2022年6月4.2 4.2 固定化酶固定化酶一、固定化酶及其特点一、固定化酶及其特点一、固定化酶及其特点一、固定化酶及其特点 固定化酶(固定化酶(固定化酶(固定化
25、酶(Immobilized EnzymeImmobilized EnzymeImmobilized EnzymeImmobilized Enzyme)又称水不溶酶,是通过物理吸附法或化学键合法将水溶性酶和又称水不溶酶,是通过物理吸附法或化学键合法将水溶性酶和固态的不溶性载体相结合,使酶变成不溶于水但仍保持催化固态的不溶性载体相结合,使酶变成不溶于水但仍保持催化活性的衍生物。活性的衍生物。vv固定化酶的特点:固定化酶的特点:固定化酶的特点:固定化酶的特点:比较稳定,可长时间保持酶的活性;比较稳定,可长时间保持酶的活性;可回收、再生、重复使用,适合于连续化、自动化和可回收、再生、重复使用,适合于连
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