人教版高中生物选修3知识点清单说课讲解.doc
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1、Good is good, but better carries it.精益求精,善益求善。人教版高中生物选修3知识点清单-生物选修3专题1基因工程1.1DNA重组技术的基本工具-1.2基因工程的基本操作程序一、与DNA分子相关的几种酶及基因工程的其他工具1、与DNA分子相关的酶限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键作用结果形成粘性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)功能:
2、能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。“分子缝合针”DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(EcoliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:相同点:都缝合磷酸二酯键。区别:EcoliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA
3、连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。2、载体(1)条件:能在宿主细胞中稳定保存下来并大量复制。有一个至多个限制性核酸内切酶切割点,以便与外源基因连接。具有特殊的标记基因,便于筛选。(2)种类:质粒(常用)、噬菌体的衍生物、动植物病毒。(3)作用:作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内;利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。二、基因工程基本操作程序1、目的基因的获取途径(目的基因:编码蛋白质的结构基因。)(1)从基因文库中获取(2)人工合成目的基因,人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法。(原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。)(3)PCR技术扩增目的基
4、因原理:DNA双链复制过程:第一步:加热至9095DNA解链;第二步:冷却到5560,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至7075,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。2、基因表达载体的构建(1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。(2)组成:目的基因启动子终止子标记基因启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细
5、胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。3、将目的基因导入受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法采用最多的方法是农杆菌转化法其次还有基因枪法和花粉管通道法等显微注射技术Ca2+处理法使其处于感受态受体细胞体细胞受体细胞多是受精卵受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入Ti质粒的TDNA上农杆菌导入植物细胞整合到受体细胞的DNA表达将含有目的基因的表达载体提纯取卵(受精卵)显微注射受精卵发育获得具有新性状的动物Ca2处理细胞微生物细胞壁的通透性增加重组质粒与感受态细胞混合感受态细胞吸收DNA分子4、目的基因的检测与鉴定(1)分子水平检测导入检测即转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基
6、因:DNA分子杂交技术,即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针。转录检测即检测目的基因是否转录出了mRNA:分子杂交法,即目的基因作探针与mRNA杂交翻译检测即检测目的基因是否翻译成蛋白质:抗原抗体杂交法(2)个体生物学水平鉴定:对转基因生物进行抗虫或抗病的接种实验。1.3基因工程的应用-1.4蛋白质工程的崛起一、基因工程的成果1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。2.动物基因工程:提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3.基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。二、蛋白质工程与基因工程的比较蛋白质工程
7、基因工程区别过程预期蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列获取目的基因构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需的蛋白质定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品结果可产生自然界没有的蛋白质只能生产自然界已有的蛋白质结果(1)蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质进行修饰、改造专题2细胞工程2.1植物细胞工程一、植物细胞工程1、原理:细胞全能性:细胞具有该生物的全部遗传信息并具有发育成完成个体的能力。全能性表达的难易程度:受精卵生殖细胞干细胞
8、体细胞;植物细胞动物细胞2、 植物组织培养技术概念:是指依据细胞全能性的原理,在无菌条件下,分离植物的器官、组织、细胞或原生质体(称为外植体),并在培养基上培养,在适宜的条件下使其长成部分或完整植株的技术。(1)过程:离体的植物器官、组织或细胞脱分化愈伤组织再分化试管苗植物体(2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。(3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。l 愈伤组织:是一团没有特定结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。l 脱分化:由已分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。l 再分化:愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培养基
9、(人教版:分化培养基)上继续培养,重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。(4)条件:首先用消毒剂除去外植体表面的微生物,在无菌条件下将其放到适宜的培养基上。培养基一般有五类成分:(1)水(2)无机营养:包括大量元素和微量元素。(3)有机营养:主要有糖、维生素、氨基酸。(4)生长物质:指植物激素,常用的有生长素和细胞分裂素,离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例。此外,赤霉素对刺激细胞的伸长也有一定的作用。(5)天然附加物:如椰子乳、酵母提取物等。3.植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。(3)意义:克服了远
10、缘杂交不亲和的障碍。二、植物细胞工程的应用1、植物繁殖的新途径(1)微型繁殖:用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。特点:保持优良品种的遗传特性;高效快速的实现种苗的大量繁殖。(2)作物脱毒:植物分生区附近,如茎尖、根尖,很少被病毒感染,甚至无病毒,因而被用来培育无病毒植株。(3)人工种子:以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等为材料,经过人工薄膜包装得到的种子。2、作物新品种的培育:单倍体育种和突变体的利用。3、细胞产物的工厂化生产:细胞产物有蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。【要点名师精解】植物组织培养和植物体细胞杂交的比较名称植物组织培养植物体细胞杂交原理细胞的全能性
11、细胞膜具有一定的流动性和细胞的全能性过程注意事项选材:选取根尖、茎尖、形成层部位、最容易诱导脱分化光照:脱分化过程不需光照,再分化过程一定要有光去细胞壁的方法:酶解法,所用的酶是纤维素酶和果胶酶人工诱导融合的方法:物理法:离心、振动电激化学法:用聚乙二醇诱导2.2动物细胞工程一、 动物细胞培养概念:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。这项技术是动物细胞工程的基础。用于培养的动物细胞和组织大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织1、原理:细胞增殖2、过程:相关概念l 细胞贴壁:培养时悬液中分散的细胞很快就会贴附在瓶壁上,称为
12、细胞贴壁。l 接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。l 原代培养:是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。l 传代培养:将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养。(一般情况下,传代培养10-50次后,细胞增殖会明显放缓,甚至完全停止,但有少部分细胞克服细胞寿命的自然极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正在朝着等同于癌细胞的方向发展。)3、结果:获得细胞群4、传代培养的原因:培养到一定时期细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭。5、条件:(1)无菌、无毒的环境 培养液和培养用具进行无菌处理 培养液中添加一定量的抗生素 定期更
13、换培养液(2)营养 葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐、微量元素、促生长因子等。 合成培养基中还需加入动物血清、血浆等(3)温度和PH 温度:细胞体外培养的温度一般与动物的体温相近,哺乳动物多以36.50.5为宜。 PH:多数细胞最适PH为7.2-7.4。(4)气体环境 细胞培养所需气体主要是O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的PH。 进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。附:培养基的的种类(按来源分)天然培养基:主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等,具有营养价值高、成分复杂的特点。合成培养基:
14、是人工配制的,具有成分明确、便于控制实验条件的特点。4、应用:(1)许多有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,都可以借助动物细胞的大规模培养来生产。(2)作为基因工程的受体细胞。(3)用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性。(4)用于医学研究二、动物体细胞核移植概念:将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合,借助于卵细胞的发育能力,经过培养发育成胚胎,进而形成个体的技术。1、不同细胞全能性的表现程度不同,如:受精卵胚胎干细胞多能干细胞单能干细胞体细胞。2、动物细胞核的移植技术项目细胞核的移植概念利用一个细胞的细胞核(供体核)来取代另一个细胞中的细胞核,形成一个重
15、建的“合子”原理动物体细胞核具有全能性过程结果获得与供体遗传物质基本相同的个体意义有利于遗传疾病的治疗,优良品种的培育对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义降低畜牧业的成本,缩短育种年限,提高生产效率三、 动物细胞融合与单克隆抗体制备概念:指在一定条件下将2个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。(融合成的细胞称为杂交细胞)1、原理:细胞膜的流动性、细胞增殖2、诱导融合的因素:聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。3、意义:制备单克隆抗体。4、单克隆抗体的制备:(1)过程(2)主要优点:特异性强、灵敏度高,并可大量制备。【要点名师精解】动物细胞融合与植物体细胞杂交的不同比较项
16、目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动,聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外,再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一专题3胚胎工程概念:是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和技术处理,经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物体内产生后代,以满足人类的各种需求。技术:体外受精技术、胚胎移植技术、胚胎分割技术、胚胎干细胞移植技术、胚胎冷冻保存技术、性别控制技术等操作对象:生殖细胞、受精卵和早期胚胎细胞3.1动物胚胎发
17、育的基本过程(一)精子的发生1、场所:睾丸2、时间:初情期3、过程:第一阶段:位于曲细精管管壁的精原细胞进行数次有丝分裂,产生多个初级精母细胞。第二阶段:初级精母细胞连续进行两次分裂(即减数分裂,包括M和M),第一次分裂产生2个次级精母细胞,每个次级精母细胞再分裂一次产生2个精子细胞。第三阶段:圆形的精子细胞经过变形成为精子。(二)卵子的发生1、场所:卵巢2、时间及过程:l 胎儿期动物的胚胎在性别分化后以后,卵原细胞通过有丝分裂不断增加数量,并进一步演变为初级卵母细胞,这时,它被卵泡细胞包围,形成卵泡。l 初情期后减数第一次分裂:是在雌性动物排卵前后完成的,结果产生1个次级卵母细胞和1个第一极
18、体,进入输卵管,准备与精子受精。减数第二次分裂:是在精子和次级卵母细胞(减中期)结合的过程中形成的,次级卵母细胞经分裂产生1个卵子和1个第二极体。(当在卵细胞膜和透明带的间隙观察到2个极体时,说明卵子已经完成了受精,这是判断卵子是否受精的重要标志)(三)受精准备阶段1精子获能刚刚排出的精子,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物的生殖道(子宫和输卵管)发生相应的生理变化后,才能获得受精的能力,这种现象称为“精子获能”。(苏教版:卵泡液、输卵管分泌物、血清等液体可使精子获能)准备阶段2卵子的准备卵子在受精前也要经历类似精子获能的过程。动物排出的卵子成熟程度不同,有的可能是次级卵母细胞,有的可能是初级
19、卵母细胞,它们都要在输卵管内进一步成熟,当达到减数第二次分裂中期时,才具备与精子受精的能力。受精阶段(1)场所:输卵管(2)主要过程(哺乳动物):精子穿越放射冠和透明带,进入卵细胞膜,原核形成和配子结合。获能后的精子与卵子相遇时,首先发生顶体反应,使顶体内的顶体酶释放出来,以溶解透明带外面的放射冠(由卵泡细胞构成的放射状结构),形成精子穿越的通道。精子穿越透明带后,在接触卵细胞膜的瞬间,会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应,这个反应称作透明带反应。这是防止多精子入卵受精的第一道屏障。精子外膜与卵细胞膜相互融合,精子入卵。精子入卵后,卵黄膜会立即发生一种生理反应,拒绝其他精子再进入卵内,这种
20、生理反应称作卵细胞膜反应。这是防止多精子入卵受精的第二道屏障。精子入卵后的另一个变化,是尾部脱离,并且原有的核膜破裂;随后,精子形成一个新的核膜,最后形成一个比原来精子核还大的雄原核。与此同时,精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂,排出第二极体后,形成雌原核。雄、雌原核充分发育后,相向移动,彼此接触,二者体积缩小、合并,形成一个含二倍染色体的合子,即受精卵。受精过程至此结束,受精卵的发育也由此开始。注意:1、 一个卵泡中一般能形成一个成熟的卵子。2、排卵是指卵子从卵泡中排出而不是指卵泡从卵巢中排出。3、刚排出的卵子尚未完全成熟,一般仅完成减数第一次分裂,需要在输卵管内进一步成熟。4、成熟的
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