(2.1)--实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察.pdf

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1、预防兽医学实验预防兽医学实验 兽医微生物学和免疫学实验 实验二实验二 细菌分离培养、移植及培细菌分离培养、移植及培养性状观察养性状观察 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 一、实验目的一、实验目的 1、掌握细菌分离培养、纯培养的基本要领及方法。、掌握细菌分离培养、纯培养的基本要领及方法。2、掌握细菌在固体、液体培养基中的生长表现。、掌握细菌在固体、液体培养基中的生长表现。3、了解细菌培养性状对细菌鉴别的重要意义。、了解细菌培养性状对细菌鉴别的重要意义。4、了解厌氧菌培养的原理及其方法。、了解厌氧菌培养的原理及其方法。实验二、细菌分离培养、移植及培养

2、性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 二、实验原理二、实验原理 细菌在自然界中分布极广，数量大、种类多。细菌在自然界中分布极广，数量大、种类多。分离培养分离培养是对微生物进行研究的一种方法，目的在于从含多种细菌的是对微生物进行研究的一种方法，目的在于从含多种细菌的病料或培养物中分离出纯的病原菌。病料或培养物中分离出纯的病原菌。分离培养常在固体平板分离培养常在固体平板培养基上用划线分离法或液体稀释法等进行，分离出单个菌培养基上用划线分离法或液体稀释法等进行，分离出单个菌落，然后挑选菌落进行纯培养，再将纯培养物移植培养及培落，然后挑选菌落进行纯培养，再将纯培养物移植培养及培养性状观察。

3、养性状观察。细菌分离培养是一个复杂的技术，培养时应根据细菌种细菌分离培养是一个复杂的技术，培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件（温度、类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件（温度、pH值、时间，对氧的需求与否等）。值、时间，对氧的需求与否等）。一般操作步骤为先将一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 二、实验原理二、实验原理

4、细菌培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血细菌培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。等。一般细菌可在有氧条件下，一般细菌可在有氧条件下，37中放中放1824小时生长。小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放厌氧菌则需在无氧环境中放23天后生长。天后生长。个别细菌如结核个别细菌如结核菌要培养菌要培养1个月之久。个月之久。由于细菌无处不在，因此从制备培养基由于细菌无处不在，因此从制备培养基时开始，整个培养过程时开始，整个培养过程必须按无菌操作必须按无菌操作要求进行，否则外要求进行，否则

5、外界细菌污染标本，会导致错误结果。界细菌污染标本，会导致错误结果。实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 三、实验准备三、实验准备 1、器材、器材 恒温培养箱，厌氧培养箱，二氧化碳培养箱，超净工作台，恒温培养箱，厌氧培养箱，二氧化碳培养箱，超净工作台，普通冰箱，酒精灯，接种环，试管架，剪刀，记号笔，线普通冰箱，酒精灯，接种环，试管架，剪刀，记号笔，线绳，牛皮纸或报纸，标签纸等。绳，牛皮纸或报纸，标签纸等。2、菌种、菌种 大肠杆菌平板或斜面大肠杆菌平板或斜面，大肠杆菌与金黄色葡萄球菌混合，大肠杆菌与金黄色葡萄球菌混合培养肉汤等。培养肉汤等。3、培养基、培

6、养基 营养肉汤，营养琼脂斜面，营养琼脂平板，营养肉汤，营养琼脂斜面，营养琼脂平板，半固体半固体琼脂琼脂 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 超净工作台超净工作台 接种环境接种环境 接种工具接种工具 接种针和接种环：接种针和接种环：由三部分组由三部分组组成，即组成，即环（针环（针)、金属柄和、金属柄和绝缘柄绝缘柄。接种前后都要过火灭菌。接种前后都要过火灭菌。接种针接种针用于穿刺接种细菌，用于穿刺接种细菌，接接种环种环用于固体、液体培养基的用于固体、液体培养基的细菌接种。细菌接种。三、实验准备三、实验准备 环环 金属柄金属柄 绝缘柄绝缘柄 实验二、细菌

7、分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 四、实验内容及方法四、实验内容及方法（一）细菌的分离培养及移植技术（一）细菌的分离培养及移植技术 1、平板划线培养法、平板划线培养法 2、斜面接种技术、斜面接种技术 3、肉汤接种技术、肉汤接种技术（二）常用的细菌培养方法（二）常用的细菌培养方法 1、需氧菌分离培养法（常用）、需氧菌分离培养法（常用）2、厌氧菌分离培养法（示范）、厌氧菌分离培养法（示范）3、二氧化碳培养法（示范）、二氧化碳培养法（示范）（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现 1、固体培养基中的生长表现、固体培养基中的生

8、长表现 2、液体培养基中的生长表现、液体培养基中的生长表现 3、半固体培养基中的生长表现、半固体培养基中的生长表现 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （一）细菌的分离培养及移植技术（一）细菌的分离培养及移植技术 接种环烧灼灭菌接种环烧灼灭菌 沾取标本沾取标本 接种接种 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 接种环烧灼灭菌接种环烧灼灭菌 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（一）细菌的分离培养及移植技术（一）细菌的分离培养及移植技术 目的：使混合的细菌呈单个分散生长，目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成

9、单个菌落，以便获得纯的细菌。形成单个菌落，以便获得纯的细菌。1、平板划线培养法、平板划线培养法 平板划线法是最常用的一种方法！平板划线法是最常用的一种方法！四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（1）接种环）接种环灭菌：灭菌：右手持接种环右手持接种环在酒精灯外焰烧灼在酒精灯外焰烧灼灭菌，先将接种环竖着烧，当镍铬丝烧红后，再横着烧金灭菌，先将接种环竖着烧，当镍铬丝烧红后，再横着烧金属柄部分，来回通过火焰属柄部分，来回通过火焰3-4次。次。（2）挑菌：）挑菌：待接种环冷却后，待接种环冷却后，用接种环挑取平板或斜用接种环

10、挑取平板或斜面培养物少许，或取液体材料和肉汤培养物一环。面培养物少许，或取液体材料和肉汤培养物一环。（3）取平板：）取平板：左手持皿，用手掌托住平皿，拇指、左手持皿，用手掌托住平皿，拇指、食指及中指将皿盖食指及中指将皿盖揭开呈揭开呈30左右的角度，角度越小越好左右的角度，角度越小越好。平板划线法的操作步骤：平板划线法的操作步骤：四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（4）划线接种：）划线接种：分为分为连续划线法连续划线法和和分区划线法分区划线法。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 平板连续划线法 此法适用于含菌较

11、少的标本此法适用于含菌较少的标本 配套视频配套视频:平板连续划线法平板连续划线法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 平板分区划线法 第一区划线第一区划线 接种环烧灼灭菌接种环烧灼灭菌 第二区划线第二区划线 接种环烧灼灭菌接种环烧灼灭菌 第三区划线第三区划线 接种环烧灼灭菌接种环烧灼灭菌 此法适用于含菌较多的标本此法适用于含菌较多的标本 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 配套视频配套视频:平板三区划线法平板三区划线法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（6）培养观察：）培养观察：将接种好的平板倒置于

12、将接种好的平板倒置于37恒温箱内，培养恒温箱内，培养24h后，在划线区观察菌落形态。后，在划线区观察菌落形态。平板划线法的操作步骤：平板划线法的操作步骤：（5）标记：）标记：用记号笔皿底上标明细菌名称和用记号笔皿底上标明细菌名称和接种日期。接种日期。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 平板倒置平板倒置培养（于培养（于37恒温培养恒温培养箱箱）实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（一）细菌的分离培养及移植技术（一）细菌的分离培养及移植技术 目的：目的：主要用于接种纯菌，

13、使其增殖后用以鉴定或主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种。保存菌种。2、斜面接种法、斜面接种法 （1）左手持试管：）左手持试管：两试管斜面移植时，左手斜持菌种管两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和待接种斜面各一管，使管口互相并齐，稍上斜，管底和待接种斜面各一管，使管口互相并齐，稍上斜，管底握于手中，松动两管硅胶塞，以便接种时容易拔出。握于手中，松动两管硅胶塞，以便接种时容易拔出。斜面接种法的操作步骤：斜面接种法的操作步骤：四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（2）右手持接种环：）右手持接种环：右手食指和拇

14、指持接种环，灼右手食指和拇指持接种环，灼烧接种环。烧接种环。（3）打开试管塞：）打开试管塞：以右手小指扭开一管的硅胶塞，无以右手小指扭开一管的硅胶塞，无名指扭开第二管的硅胶塞。塞头向掌心内，将试管口通过名指扭开第二管的硅胶塞。塞头向掌心内，将试管口通过酒精灯火焰灭菌。酒精灯火焰灭菌。（4）斜面接种：）斜面接种：接种环灼烧冷却后插入菌种管中，钓接种环灼烧冷却后插入菌种管中，钓取细菌少许取出接种环立即接种在待接斜面上，不要碰及取细菌少许取出接种环立即接种在待接斜面上，不要碰及管壁，直达斜面底部。管壁，直达斜面底部。从斜面底部开始划曲线或直线，向从斜面底部开始划曲线或直线，向上至斜面顶端为止，上至斜

15、面顶端为止，管口通过火焰灭菌后，塞好硅胶塞。管口通过火焰灭菌后，塞好硅胶塞。斜面接种法的操作步骤：斜面接种法的操作步骤：四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（5）标记：）标记：用记号笔在试管上标明细菌名称和接种用记号笔在试管上标明细菌名称和接种日期。日期。（6）培养：）培养：置置37温箱中培养，一般为温箱中培养，一般为1824小时。小时。斜面接种法的操作步骤：斜面接种法的操作步骤：四、实验内容及方法四、实验内容及方法 接种环灭菌法接种环灭菌法 细菌培养物的取材细菌培养物的取材 配套视频配套视频:1、平板到试管斜、

16、平板到试管斜面接种法面接种法 2、试管斜面到试、试管斜面到试管斜面接种法管斜面接种法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 试管斜面接种法示意图试管斜面接种法示意图 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （一）细菌的分离培养及移植技术（一）细菌的分离培养及移植技术 目的：目的：主要主要用于增菌培养及观察肉汤中生用于增菌培养及观察肉汤中生长表现，长表现，如混浊度、沉淀物、菌膜、菌环和颜如混浊度、沉淀物、菌膜、菌环和颜色等。色等。3、肉汤接种法、肉汤接种法 具体操作参见斜面接种法具体操作参见斜面接种法 四、实验

17、内容及方法四、实验内容及方法 配套视频配套视频:1、平板到试管肉汤接种法、平板到试管肉汤接种法 2、试管斜面到试管肉汤接种法、试管斜面到试管肉汤接种法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （一）细菌的分离培养及移植技术（一）细菌的分离培养及移植技术 半固体移植用穿刺法接种，半固体移植用穿刺法接种，操作方法与试操作方法与试管斜面接种法相似，管斜面接种法相似，不同的是用接种针挑取菌不同的是用接种针挑取菌落，垂直刺入培养基内落，垂直刺入培养基内。从培养基表面的中部。从培养基表面的中部一直刺入管底，然后按原方向退出即可。一直刺入管底，然后按原方向退出即可。

18、4、穿刺培养法穿刺培养法 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 配套视频配套视频:半固体琼脂穿刺接种法半固体琼脂穿刺接种法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（二）常用的细菌培养方法（二）常用的细菌培养方法 1 1、需氧性细菌分离培养法（一般培养方法）、需氧性细菌分离培养法（一般培养方法）培养温度：培养温度：3737（采用恒温培养箱）（采用恒温培养箱）培养时间：培养时间：181824h24h 2、二氧化碳培养法：、二氧化碳培养法：少数细菌如布氏杆菌（牛少数细菌如布氏杆菌（牛型）等，孵育时，需大气中添加型）等，孵育时，需大气中添加5%10%二氧化二氧

19、化碳，方能使之生长繁殖旺盛。碳，方能使之生长繁殖旺盛。常用方法有烛缸法、常用方法有烛缸法、二氧化碳培养箱。二氧化碳培养箱。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 二氧化碳培养箱二氧化碳培养箱 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 3、厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧培养法：厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、厌氧罐、疱肉培养法、焦性没食子酸法、硫乙醇酸盐法等疱肉培养法、焦性没食子酸法、硫乙醇酸盐法等 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 厌氧培养系统厌氧培养系统 实验二、细菌

20、分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 厌氧罐厌氧罐 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 厌氧袋厌氧袋 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 厌氧培养时气体浓度变化厌氧培养时气体浓度变化 二氧化碳培养时气体浓度变化二氧化碳培养时气体浓度变化 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现 1、细菌在、细菌在固体培养固体培养基中的生长表现基中的生长表现（平板）（平板）菌落

21、定义：菌落定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。单一肉眼可见的细菌集团。菌落特征：菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性湿润度、黏度、溶血性 菌落类型：菌落类型：光滑型（光滑型（S）、粗糙型（）、粗糙型（R）、黏液型（）、黏液型（M）菌苔：菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 菌苔菌苔 菌落菌落 细

22、菌在营养琼脂平板生长表现（葡萄球菌）细菌在营养琼脂平板生长表现（葡萄球菌）实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现 1、细菌在、细菌在固体培养固体培养基中的生长表现基中的生长表现（平板）（平板）（1）大小：菌落的大小，规定用毫米（）大小：菌落的大小，规定用毫米（mm）表示，）表示，一般不足一般不足lmm者为露滴状菌落；者为露滴状菌落；12mm者为小菌落；者为小菌落；24mm者为中等大菌落；者为中等大菌落；46mm或更大者称为大菌落或巨或更大者称为大菌落或巨大菌落。大菌落。（2

23、）形状：菌落的外形有圆形、不规则形、根足形、）形状：菌落的外形有圆形、不规则形、根足形、葡萄叶形葡萄叶形。（3）边缘：菌落边缘有整齐、锯齿状、网状、树叶状、）边缘：菌落边缘有整齐、锯齿状、网状、树叶状、虫蚀状、放射状等虫蚀状、放射状等。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （4）表面性状：观察其是否平滑、粗糙、皱襞状、旋）表面性状：观察其是否平滑、粗糙、皱襞状、旋涡状、荷包蛋状，甚至有子菌落等涡状、荷包蛋状，甚至有子菌落等。1.1.圆形、边缘整齐、表面光滑；圆形、边缘整齐、表面光滑；2 2圆形、边缘整齐、表面有同

24、心圆；圆形、边缘整齐、表面有同心圆；3 3圆形、叶状边缘、表面有圆形、叶状边缘、表面有放射状皱褶；放射状皱褶；4 4圆形、锯齿状边缘、表面较不光滑；圆形、锯齿状边缘、表面较不光滑；5 5不规则形、波浪状边缘、表面有不规则皱不规则形、波浪状边缘、表面有不规则皱纹；纹；6 6圆形、边缘残缺不全、表面呈颗粒状；圆形、边缘残缺不全、表面呈颗粒状；7 7毛状毛状 ；8 8根状根状 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （5）隆起度：表面有隆起、轻度隆起、中央隆起，也）隆起度：表面有隆起、轻度隆起、中央隆起，也有陷凹或堤状者

25、有陷凹或堤状者。（6 6）颜色及透明度：菌落有无色、灰白色，有的能）颜色及透明度：菌落有无色、灰白色，有的能产生各种色素；菌落是否有光泽，其透明度可分为透明、产生各种色素；菌落是否有光泽，其透明度可分为透明、半透明及不透明。半透明及不透明。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （7）硬度：黏液状、膜状、干燥或湿润等。）硬度：黏液状、膜状、干燥或湿润等。（8）溶血情况：若是鲜血琼脂平皿，应看其是否溶）溶血情况：若是鲜血琼脂平皿，应看其是否溶血、溶血情况怎样。血、溶血情况怎样。（9）气味：闻气味）气味：闻气味 四、实

26、验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 大肠杆菌麦康凯平板菌落大肠杆菌麦康凯平板菌落 沙门氏菌麦康凯平板菌落沙门氏菌麦康凯平板菌落 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 金黄色葡萄球菌在营养琼脂平板菌落金黄色葡萄球菌在营养琼脂平板菌落 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 鸭巴氏杆菌血平板菌落鸭巴氏杆菌血平板菌落 猪丹毒杆菌血平板菌落猪丹毒杆菌血平板菌落 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实

27、验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 炭疽杆菌营养平板菌落（苗毒）炭疽杆菌营养平板菌落（苗毒）链球菌血平板菌落链球菌血平板菌落 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现 2、细菌在、细菌在琼脂斜面琼脂斜面的生长表现的生长表现 细菌蛇形细菌蛇形划线生长划线生长 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体

28、培养基中的生长表现 3、细菌在液体培养基中的生长表现、细菌在液体培养基中的生长表现 （1）混浊度：混浊度：细菌接种在液体培养基中经适当培养细菌接种在液体培养基中经适当培养后其表现性状不同，有均匀混浊，轻度混浊或培养基保持后其表现性状不同，有均匀混浊，轻度混浊或培养基保持透明（表面有菌膜或底部有沉淀物）。透明（表面有菌膜或底部有沉淀物）。（2）沉淀物：）沉淀物：细菌在液体培养基中所形成的沉淀有颗细菌在液体培养基中所形成的沉淀有颗粒状沉淀、粘稠沉淀、絮状沉淀、小块状沉淀。另外还有粒状沉淀、粘稠沉淀、絮状沉淀、小块状沉淀。另外还有不生成沉淀的细菌。不生成沉淀的细菌。四、实验内容及方法四、实验内容及方

29、法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 （3）表面性状：）表面性状：主要是细菌在液体培养基中培养后，主要是细菌在液体培养基中培养后，有无菌膜或菌环形成等。有无菌膜或菌环形成等。（4）颜色：）颜色：有的细菌在生长繁殖过程中能产生色素，有的细菌在生长繁殖过程中能产生色素，色素能溶于水，所以细菌在液体培养基中培养后，所产生色素能溶于水，所以细菌在液体培养基中培养后，所产生的色素会使培养基的颜色发生变化。的色素会使培养基的颜色发生变化。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（三

30、）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现 3、细菌在液体培养基中的生长表现（肉汤）、细菌在液体培养基中的生长表现（肉汤）白色菌膜白色菌膜 均匀浑浊均匀浑浊 菌的沉淀物菌的沉淀物 对照对照 四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 对照对照 紫色菌环紫色菌环 均匀浑浊均匀浑浊 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现（三）细菌在固体、液体培养基中的生长表现 4、细菌在、细菌在半固体中半固体中的生长表现的生

31、长表现 （1）有鞭毛细菌：）有鞭毛细菌：在培养基中在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。线边缘模糊。（2）无鞭毛细菌：）无鞭毛细菌：只沿穿刺线只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。生长，穿刺线边缘清晰。四、实验内容及方法四、实验内容及方法 实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 五、注意事项五、注意事项 1、接种环必须是一个、接种环必须是一个光滑光滑平整平整、闭闭合合的圆环，使用前的圆环，使用前后须烧灼灭菌。后须烧灼灭菌。2、接种时应、接种时应严格无菌操作严格无菌操作，以防止外界微生物的进入。，以防止外界微生物的进入。

32、3、应选择合适的培养基应选择合适的培养基进行分离培养细菌，如果选择进行分离培养细菌，如果选择不当就可能难以分离成功。不当就可能难以分离成功。4、平板划线、平板划线时时线的疏密要合适线的疏密要合适，太密容易形成菌苔，太密容易形成菌苔，过疏不能充分利用平板的表面积，也不易得到单个菌落。过疏不能充分利用平板的表面积，也不易得到单个菌落。5、平板或试管等接种后、平板或试管等接种后要及时进行标记菌名及时间。要及时进行标记菌名及时间。实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 六、思考题六、思考题 1、分离培养的目的是什么、分离培养的目的是什么?何谓纯培养何谓纯培养?

33、2、在挑取固体培养物上的细菌作平板分区、在挑取固体培养物上的细菌作平板分区划线时，为什么在每区之间都要将接种环划线时，为什么在每区之间都要将接种环上剩余的细菌烧掉上剩余的细菌烧掉?3、培养皿培养时为什么要倒置、培养皿培养时为什么要倒置?实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察实验二、细菌分离培养、移植及培养性状观察 实验要求实验要求 1、每人先练习平板划线培养法，熟练为止。、每人先练习平板划线培养法，熟练为止。2、每人从平板中挑菌分别接种平板、每人从平板中挑菌分别接种平板1个（练习个（练习3区区划线），肉汤划线），肉汤1管，斜面管，斜面1根，半固体根，半固体1根。根。3、做好标记。、做好标记。明天下午明天下午3点到实验室观察培养结果。点到实验室观察培养结果。