生殖医学研究锦囊 (1).pdf

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1、IUIIVFICSIPGT辅助生殖技术Assisted Reproductive Technology 1978年，第一例“试管婴儿”诞生，让人们认识了ART；2010年，试管婴儿之父获诺贝尔医学奖标志了世界对ART的认可学习要点 ART的定义 ART的分类 ART的并发症 ART展望ART的定义 辅助生殖技术（ART）：通过对精子、卵子或胚胎等的体外操作，帮助不孕不育患者获得妊娠的技术学习要点 ART的定义 ART的分类 ART的并发症 ART展望ART的分类ART人工授精配子移植体外受精-胚胎移植其它IVF-ET 衍生技术（ICSI、PGT、IVM等）ART的分类IVF-ET 体外受精-胚

2、胎移植(IVF-ET)定义：将卵子取出体外，在体外完成受精、早期胚胎发育，再选择优质胚胎移入宫腔使其着床发育成胎儿 适应证：女性不可逆性输卵管损害;子宫内膜异位症经药物和手术治疗无效者;免疫性不孕症;顽固性PCOS;男性因素的不孕症。IVF-ET过程1.控制性超促排卵2.取卵3.体外受精4.胚胎移植2.精液准备胚胎发育过程示意图取卵后1天：原核取卵后1.5天：2细胞取卵后2天：4细胞取卵后3天：8细胞取卵后4天：桑葚胚取卵后5-6天：囊胚ART的分类ART人工授精配子移植体外受精-胚胎移植其它IVF-ET 衍生技术（ICSI、PGT、IVM等）ART的分类ICSI 卵细胞浆内单精子注射（ICS

3、I）定义：即人工将单个精子通过显微授精的方式注射入卵母细胞浆内达到使卵子受精的目的，其他技术程序同常规IVF-ET 适应证：男性重度少、弱精者、阻塞性无精者以往IVF-ET不能正常受精者ICSI的过程M期卵GV期卵M期卵 选择成熟的卵子ICSI授精示意图及照片ICSI示意图ICSI照片ICSI安全性的隐患 ICSI操作对卵子是具创伤性的 ICSI在全面的动物实验之前就广泛应用于人类 选用的精子原是属于被自然淘汰的 睾丸采集的精子可能未发育成熟，基因印迹尚未发育完成 少弱及无精子的缺陷是否会殃及后代ART的分类ART人工授精配子移植体外受精-胚胎移植其它IVF-ET 衍生技术（ICSI、PGT、

4、IVM等）ART的分类PGT 胚胎植入前遗传学检测(PGT)定义：在体外受精过程中，对具有遗传风险患者的胚胎进行植入前活检和遗传学分析，以选择无遗传学疾病的胚胎植入宫腔，从而获得“正常”胎儿的诊断方法 分类：染色体结构重排的PGT；单基因遗传病的PGT；非整倍体的PGTART的分类PGT 适应证：染色体疾病单基因遗传病非整倍体筛查易感基因剔除HLA分型PGT流程 遗传咨询 获得家系遗传信息 基因检测与连锁分析 ART治疗 体外受精及胚胎培养 极体/胚胎活检 遗传学检测 单囊胚CET 产前诊断健康宝宝出生其中第2、3步仅用于单基因病病例分享先天性耳聋家系 我国新生儿总的听力损伤率为9.52，其中

5、50%遗传因素造成，约1500万。PGT-M是目前唯一可预防耳聋发生的手段。耳聋病例分享病史回顾：夫妇表型正常，生育过一个先天耳聋的患儿欲生育一个健康孩子耳聋病例分享第1步：遗传咨询 先天性耳聋发病率高，约为1/1500；高度遗传异质性；环境因素也可引起先天性聋哑；大部分是常染色体隐性遗传，存在着三十余种突变基因。此外，也存在常染色体显性遗传及X连锁遗传。第2步：PGT-M前的致病突变确认及家系连锁分析 一代测序结果显示先证者具有GJB2基因的复合杂合突变，分别来自母亲和父亲 12个STR位点中筛选出7个有效的STR位点用于连锁分析GJB2 c.299delATGJB2 c.235delCGJ

6、B2 c.235delC&c.299delAT 第3步：ICSI后8个胚胎用于胚胎植入前遗传学诊断患者患者E1192 190155 155443 435251 247188 180105 109202 204GJB2 c.235 del C/c.299delAT患者患者E5192 190155 155443 435251 247188 180105 107202 204GJB2 c.235 del C/c.299delAT患者患者E8192 190155 155443 435251 247188 180105 107202 204GJB2 c.235 del C/c.299delATGJB2

7、c.299delAT E2190 190153 155435 435247 247180 182107 109200 204携带者携带者GJB2 c.235delCE7192 190155 155443 435251 247188 182105 109202 204携带者携带者GJB2 c.235delCE9192 190155 155443 435251 247180 182107 109200 204携带者携带者GJB2 c.235delCE11192 190155 155435 435247 247180 182107 109200 204携带者携带者GJB2 c.235delCE131

8、92 190155 155443 435251 247188 182105 109202 204携带者携带者胚胎编号胚胎编号STR位点位点一代测序结果一代测序结果结论结论第1次ET植入失败第2次ET获妊娠出生后脐血靶基因检测和听力测试 GJB2 c.299(Normal)-Cord blood after birth GJB2 c.235del C(heterozygous)-Cord blood after birth AABRtestTEOAEtestLeft earRight ear2Li 10 2Li 15 Li15 Li10 2Li 20 2Li 80 Li80 2Li 60 Li2

9、0 Li30 Li40 Li70 Li60 2Li 50 VVVVVIIIIVVV0.2 V1 ms21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz18171615141312111098765432102Ri 15 Ri15 2Ri 10 Ri10 2Ri 20 2Ri 80 Ri80 Ri20 Ri30 Ri40 Ri50 Ri60 2Ri 70 Ri70 VVVVVIIIIVVV0.2 V1 ms21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21

10、.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz21.1 Hz1817161514131211109876543210Li70 Li60 Li50 Li40 2Li 30 0.25 V10 ms1009080706050403020100Ri30 Ri70 Ri50 Ri40 Ri60 0.25 V10 ms1009080706050403020100ADBCABR：A-left ear，cutoff 20dBnHL，B-right ear，cutoff 20dBnHL；40HzAERP：C-left ea

11、r，cutoff 30dBnHL，D-right ear，cutoff 30dBnHL.出生后24小时听力测试正常 脐血靶基因检测正常 出生后2月听力测试正常ART的分类ART人工授精配子移植体外受精-胚胎移植其它IVF-ET 衍生技术（ICSI、PGT、IVM等）ART的分类AI 人工授精(AI)定义：将处理后的优选精子注入宫颈内或宫腔内使女性受孕的技术 分类：夫精人工授精 供精人工授精人工授精适应证AIH适用于：男方性功能障碍 女方宫颈管狭窄 宫颈粘液异常 抗精子抗体阳性AID适用于：男方无精症 不良遗传基因携带者 Rh因子不合及多次流产或新生儿溶血病死亡者同一供精者的精液最多只能使5名妇

12、女受孕人工授精（AI）的过程AI精子的处理：洗涤法上游法梯度离心法 精子注射：注射精子的容量为0.3-0.5ml AI并发症：子宫痉挛盆腔感染刺激抗精子抗体产生ART的分类ART人工授精配子移植体外受精-胚胎移植其它IVF-ET 衍生技术（ICSI、PGT、IVM等）ART的分类配子移植技术 配子移植技术：输卵管内配子移植宫腔内配子移植 1992年5月在我国第一例GIUT技术获得成功 1997年我国首例经阴道GIFT婴儿诞生GIUT vs.IVF-ET优势：无需体外受精和早期胚胎培养，减少了外界环境和人工操作干预可能对卵和胚胎造成的损害无需精细的实验室培养条件和技术弱势：GIUT的妊娠率约15

13、，较IVF-ET低（可能由于宫腔不是受精和早期胚胎发育的生理环境）学习要点 ART的定义 ART的分类 ART的并发症 ART展望ART的并发症 OHSS 多胎妊娠 穿刺取卵并发症 其它潜在风险：流产率、早产率、异位妊娠率宫内外同时妊娠率均较自然妊娠者高卵巢过度刺激综合征（OHSS）总体发生率20%，其中中重度为1%-10%妊娠周期发生率高于非妊娠周期 发病机制尚不完全清楚 病理生理：毛细血管通透性增加、体液大量外渗并继发一系列改变OHSS的临床表现 症状：体征：生化检查改变：其它临床表现：血栓、脏器衰竭、DIC 腹胀、腹痛 恶心、呕吐 少尿 卵巢增大 卵巢扭转 腹水、水肿 胸水、心包积液 雌

14、激素增加 水钠潴留、血管通透性 血液浓缩OHSS的治疗原则轻度OHSS中度OHSS对症治疗（口服镇痛药、止吐药）未妊娠患者，病程约14d，月经后可自愈妊娠患者发生重度OHSS的风险显著增加扩容腹水穿刺预防血栓门 诊（防止加重、并发症）住 院多胎妊娠 IVF-ET后，多胎率25-50%孕妇妊娠及围产儿并发症发生率明显升高，围产儿死亡率明显升高；预防策略：严格促排卵药物适应症，适度超排卵；减少胚胎移植数目 补救措施：减胎学习要点 ART的定义 ART的分类 ART的并发症 ART展望展望ART的发展方向 提高妊娠率和活产率 实现真正的生育调控 研究人类遗传疾病，减少出生缺陷 发现人类生殖奥秘 干细胞及人类治疗性克隆问题维护促进生殖健康