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1、脱毒苗的繁殖与保存脱毒苗的繁殖与保存 1.1 1.1 脱毒苗的繁殖脱毒苗的繁殖 利用不同方法获得脱毒苗后,要想进一步获得大田生产用的足够脱毒苗,快速繁殖技术就起着决定的作用。1.1.1 脱毒苗的繁殖方法脱毒苗的繁殖方法 脱毒苗的繁殖方法主要由以下几种:嫁接繁殖:从通过鉴定的脱毒母本植株上采集穗条,嫁接到实生砧木上。如柑橘、苹果、桃等木本植物多采用这种方法。扦插繁殖:于冬季从脱毒母本植株上剪取芽体饱满的成熟休眠枝,经沙藏后于次年春季剪切扦插。绿枝扦插在生长季节(4-6 月份)进行,从脱毒母株上剪取半木质化新梢扦插。扦插前注意土壤消毒和防止昆虫传播病毒,扦插后要注意遮阳保湿。微型块茎繁殖:从脱毒的
2、单茎苗上剪下带叶的叶柄,扦插到育苗箱中的沙土中,保持湿度,1-2 月后叶柄下长出微型薯块,即可用作种薯。试管繁殖:对脱毒试管苗进行继代培养,这是目前应用最普遍、效率最高的一种方法。1.1.2 1.1.2 脱毒苗繁育生产体系脱毒苗繁育生产体系 为确保脱毒苗的质量,推进作物脱毒栽培的顺利实施,建立科学的脱毒苗繁育生产体系十分重要。2006 年 4 月起,农业部柑橘及苗木质量监督检测中心和中国农科院柑橘研究所负责起草的柑橘无病毒苗木繁育规范,就已作为农业行业推荐标准实行了。(NY/T 973-2006)我国农作物脱毒苗繁育生产体系主要模式如下:国家级(或省级)脱毒中心脱毒苗繁育基地脱毒苗栽培示范基地
3、作物无病毒化生产。脱毒中心负责作物脱毒、鉴定与保存、提供脱毒母株或穗条;脱毒苗繁育基地负责繁殖用的脱毒种苗;示范基地负责脱毒苗栽培的试验和示范,在基地的带动下实现作物无病毒化生产。下面以脱毒马铃薯马铃薯为例,介绍脱毒苗的繁殖方法。马铃薯在种植过程中易感染病毒,危害马铃薯的病毒有 17 种之多。由于马铃薯是无性繁殖作物,病毒在母体内增殖、转运和积累于所结的薯块中,并且世代传递,逐年加重。从20世纪70年代开始,利用茎尖分生组织离体培养技术对已感染的良种进行脱毒处理,并在离体条件下生产微型薯和在保护条件下生产小薯再扩大繁育脱毒苗,对马铃薯增产效果极为显著。把茎尖脱毒技术和有效留种技术结合应用,并建
4、立合理的良种繁育体系,是全面提高马铃薯产量和质量的可靠保证。(1)原原种繁殖 利用防虫温室快速繁殖,将试管苗移栽到营养钵中,室温炼苗 57 d,然后按株距 5cm,行距 5cm 栽植脱毒苗,温度控制在 25左右,待苗长到 1520cm 时,可以剪成 2 叶节扦插,以苗繁苗。用脱毒试管苗及其扩繁苗在防虫网室栽植,所结的种薯为脱毒马铃薯原原种。生产脱毒马铃薯原原种要求具备 3 个条件:一是必须用脱毒苗;二是必须在 40 目(孔径 0.35mm)以上防虫网棚内栽植;三是所用地块土壤必须无病源。并在网棚内种指示植物,如果指示植物表现病毒症状,整个棚内繁殖的种薯应降级使用。原原种收获前逐株观察是否带有病
5、毒症状,一旦发现病株,立即清除,确保原原种质量。一般原原种数量少,价格较高。因此,原原种育苗最好在防虫温室或塑料网棚内加温育苗。当苗高 1520cm 时,剪苗进行叶节插扦,以苗繁苗,增大繁殖系数。春季气温回升后要在防虫网棚内建采苗圃,扩大繁殖面积,降低生产成本,加快原原种苗繁殖速度。(2)原种苗繁殖 用脱毒马铃薯原原种苗在 500m 内无普通马铃薯种植的空间隔离条件下栽植所结种薯为脱毒马铃薯原种。繁殖脱毒马铃薯原种田间周围应种少量指示植物,观察是否有病源存在,如发生蚜虫传播,种薯应降级使用。脱毒马铃薯原种苗繁殖可用温室、温床、大棚等建采苗圃,以苗繁苗,提高繁殖倍数。(3)良种苗繁殖 用脱毒马铃
6、薯原种苗在大田种植,收获的种薯为一级良种,即大面积生产用种。用一级良种育苗栽植,收获的种薯为二级良种。二级良种育苗供大田生产纯商品薯,纯商品薯不能再作种薯。一般良种在生产上连续使用 2 年,第 3 年由于病毒再侵染,要进行更新换代。原原种在田间和收获后检测中主要病毒病不允许检出,原种主要病毒病允许率为 1%,一级良种为 5%,二级良种为 10%。1.2 1.2 脱毒苗的脱毒苗的保存保存 通过不同方法获得的脱毒植株并没有额外的抗病毒特性,如有不慎还有可能被病毒感染,因此必须安全保存。脱毒试管苗出瓶移栽后的苗木称作原原种,一般多在科研单位的隔离网室内保存;原原种繁殖的苗木称为原种,多在县级以上良种
7、繁育基地保存;由原种繁殖的苗木作为脱毒苗提供给生产单位栽培。这些原原种或原种材料,最长可保存利用 510 年。而常用的保存方法主要有离体培养保存、隔离种植保存。(1)离体培养保存 选择脱毒原种的优良株系,在离体条件下将茎尖或小植株接种到培养基上,至 1-9低温、低光照下保存。低温下材料生长极缓慢,只需半年或一年更换培养基一次,此法又叫最小生长法。(2)隔离种植保存 隔离种植保存是保存脱毒原种最常用的方法。首先应建立隔离带,再用 300 目纱网,建立防虫网室。种植前土壤必须进行严格消毒,接触无病毒原种苗的工具也均应消毒并单独保管专用,避免昆虫、线虫以及人为因素传播病毒,确保无毒原种在严格隔离、远离病毒的条件下种植。试管苗保存技术具有节省土地、节省劳力费用、避免病虫害感染和环境伤害以及能快速繁殖等优点。其缺点是有些材料的再生能力弱,会在继代培养中逐渐丧失,还会发生染色体畸变,难以保护原有的遗传基因。保存试管苗种质,关键是要维持最低生长速度,以延长继代培养的时间。而生长速度又取决于培养温度、培养基组成和品种特性。在脱毒苗的繁殖与保存过程中,必须采取严格措施,切断病毒的传播方式,以确保满足生产需求,提供优质种苗。
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