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1、细胞生物学实验细胞膜的渗透性第1页,本讲稿共12页课程介绍课程介绍2细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,本课程的目的和任务在于通过实验加深和学,本课程的目的和任务在于通过实验加深和巩固学生对基本知识和基础理论的理解,初步巩固学生对基本知识和基础理论的理解,初步掌握细胞生物学实验的一些基本操作和基本技掌握细胞生物学实验的一些基本操作和基本技能,培养学生分析问题、解决问题的能力,培能,培养学生分析问题、解决问题的能力,培养科学务实的精神。养科学务实的精神。第2页,本讲稿共12页实验内容实验内容3序号序号实验名称实验名称学时学时1细胞膜的渗透性细胞膜的
2、渗透性22线粒体的活体染色与观察线粒体的活体染色与观察23细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示24细胞核的分离与鉴定细胞核的分离与鉴定35细胞融合细胞融合36人类体细胞染色体组型分析人类体细胞染色体组型分析37动物染色体标本的制备与观察动物染色体标本的制备与观察3第3页,本讲稿共12页实验一、细胞膜的渗透性实验一、细胞膜的渗透性4第4页,本讲稿共12页1.1.了解溶血现象及其发生机制;了解溶血现象及其发生机制;2.2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入了解细胞膜的渗透性及各类物质进入 细胞的速度。细胞的速度。一、实验目的一、实验目的5第5页,本讲稿共12页由于细胞膜对各种
3、溶质的透性不同,将红细由于细胞膜对各种溶质的透性不同,将红细胞放入数种等渗液中后,有的溶质可以渗入,胞放入数种等渗液中后,有的溶质可以渗入,有的溶质不能渗入,渗入的物质能够提高红有的溶质不能渗入,渗入的物质能够提高红细胞的渗透压,所以促使水分进入细胞,引细胞的渗透压,所以促使水分进入细胞,引起溶血。由于溶质渗入细胞速度各不相同,起溶血。由于溶质渗入细胞速度各不相同,因此溶血时间也不相同。因此,可以利用溶因此溶血时间也不相同。因此,可以利用溶血时间粗略的判断物质穿膜的速度和时间。血时间粗略的判断物质穿膜的速度和时间。二、实验原理二、实验原理6第6页,本讲稿共12页1 1、实验器材、实验器材50m
4、L50mL烧杯、烧杯、10mL10mL移液管、滴管、试管、试管架移液管、滴管、试管、试管架2 2、试剂、试剂生理盐水、蒸馏水、生理盐水、蒸馏水、0.17 mol/L 0.17 mol/L 氯化钠、氯化钠、0.17mol/L0.17mol/L氯化铵、氯化铵、0.17mpl/L0.17mpl/L硝酸钠、硝酸钠、0.12mol/L0.12mol/L草酸铵、草酸铵、0.32mol/L0.32mol/L葡萄糖、葡萄糖、0.32mol/L0.32mol/L甘油、甘油、0.32mol/L0.32mol/L乙醇、乙醇、3 3、实验材料、实验材料鸡血液鸡血液三、实验材料三、实验材料7第7页,本讲稿共12页1 1
5、、鸡血细胞悬液的制备、鸡血细胞悬液的制备取将取将35ml35ml鸡血倒入鸡血倒入350nl350nl生理盐水中,配成一种不透生理盐水中,配成一种不透明的红色鸡血细胞悬浮液明的红色鸡血细胞悬浮液2 2、溶血观察溶血观察往试管中加入往试管中加入10ml10ml蒸馏水,再加入蒸馏水,再加入1ml1ml鸡血细胞悬鸡血细胞悬液,摇动混匀,溶液有浑浊迅速变为澄清透明,液,摇动混匀,溶液有浑浊迅速变为澄清透明,即红细胞膜发生破裂形成溶血。即红细胞膜发生破裂形成溶血。四、实验步骤四、实验步骤8第8页,本讲稿共12页3 3、鸡血细胞膜渗透性观察、鸡血细胞膜渗透性观察逐一量取逐一量取6 6种等渗溶液各种等渗溶液各
6、10ml10ml,倒入试管中,再逐一,倒入试管中,再逐一加入加入1ml1ml鸡血细胞悬液,轻轻摇动混匀,注意发生鸡血细胞悬液,轻轻摇动混匀,注意发生什么变化?溶液是否逐渐澄清透明?若是,记下时什么变化?溶液是否逐渐澄清透明?若是,记下时间,即自加入鸡血细胞悬液到溶液变成澄清透明所间,即自加入鸡血细胞悬液到溶液变成澄清透明所经历的时间。如果经历的时间。如果10min10min溶液仍然保持浑浊,则为溶液仍然保持浑浊,则为不溶血。不溶血。四、实验步骤四、实验步骤9第9页,本讲稿共12页1 1、试管中有红细胞和测试溶液时,不能用、试管中有红细胞和测试溶液时,不能用力摇动,避免人为因素造成的红细胞破裂力
7、摇动,避免人为因素造成的红细胞破裂五、注意事项五、注意事项10第10页,本讲稿共12页记录观察到的实验现象,并对实验结果进行分析和比较记录观察到的实验现象,并对实验结果进行分析和比较六、实验结果六、实验结果11试管编号试管编号是否溶血是否溶血时间时间结果分析结果分析0、5ml蒸馏水蒸馏水+1ml 稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液1、5ml 氯化钠氯化钠+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液2、5ml 氯化铵氯化铵+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液3、5ml 硫酸钠硫酸钠+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液4、5ml 硝酸钠硝酸钠+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液5、5ml 草酸铵草酸铵+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬
8、液6、5ml 葡萄糖葡萄糖+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液7、5ml 甘油甘油+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液8、5ml 乙醇乙醇+1ml稀释鸡血悬液稀释鸡血悬液第11页,本讲稿共12页1.1.生理盐水:氯化钠生理盐水:氯化钠 0.9g 0.9g,蒸馏水,蒸馏水 100.0ml100.0ml2.2.0.17 mol/L 0.17 mol/L 氯化钠溶液:氯化钠氯化钠溶液:氯化钠 4.976g4.976g,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml3.3.0.12mol/L0.12mol/L硫酸钠溶液:硫酸钠硫酸钠溶液:硫酸钠 8.5g8.5g,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml4.4.0.17mo
9、l/L 0.17mol/L 硝酸钠溶液:硝酸钠硝酸钠溶液:硝酸钠 7.224g7.224g,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml5.5.0.17mol/L 0.17mol/L 氯化铵溶液:氯化铵氯化铵溶液:氯化铵 4.574g4.574g,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml6.6.0.12mol/L0.12mol/L草酸铵溶液:草酸铵溶液:草酸铵草酸铵 4.62g4.62g,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml7.7.0.32mol/L0.32mol/L乙醇溶液:乙醇溶液:无水乙醇无水乙醇 9.33ml9.33ml,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml8.8.0.32mol/L0.32mol/L甘油溶液:甘油溶液:甘油(甘油(1.26g/ml1.26g/ml)11.7ml11.7ml,蒸馏水,蒸馏水500ml500ml9.9.0.32mol/L 0.32mol/L 葡萄糖溶液葡萄糖溶液 葡萄糖葡萄糖 28.83g28.83g,蒸馏水,蒸馏水 500ml500ml试剂配制试剂配制12第12页,本讲稿共12页
限制150内