维生素类药物分析 PPT课件.ppt

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1、关于维生素类药物的分析 第一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月公元前公元前35003500年年-古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后古埃及人发现能防治夜盲症的物质，也就是后来的维来的维A A。16001600年年-医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症。医生鼓励以多吃动物肝脏来治夜盲症。17471747年年-苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来苏格兰医生林德发现柠檬能治坏血病，也就是后来的维的维C C。18311831年年-胡萝卜素被发现。胡萝卜素被发现。19111911年年-波兰化学家丰克为维生素命名。波兰化学家丰克为维生素命名。19151915年年-科学家认为糙皮病是由于

2、缺乏某种维生素而造成的科学家认为糙皮病是由于缺乏某种维生素而造成的维生素发展史维生素发展史第二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月19161916年年-维生素维生素B B被分离出来。被分离出来。19171917年年-英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病，随后英国医生发现鱼肝油可治愈佝偻病，随后 断定这种病是缺乏维断定这种病是缺乏维D D引起的。引起的。19201920年年-发现人体可将胡萝卜素转化为维生素发现人体可将胡萝卜素转化为维生素A A 19221922年年-维维E E被发现。被发现。19281928年年-科学家发现维科学家发现维B B至少有两种类型。至少有两种类型。19331933

3、年年-维维E E首次用于治疗。首次用于治疗。19481948年年-大剂量维大剂量维C C用于治疗炎症。用于治疗炎症。第三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月19491949年年-维维B B3 3与维与维C C用于治疗精神分裂症。用于治疗精神分裂症。19541954年年-自由基与人体老化的关系被揭开。自由基与人体老化的关系被揭开。19571957年年-Q-Q1010多酶被发现。多酶被发现。19691969年年-体内超级抗氧化酶被发现。体内超级抗氧化酶被发现。19701970年年-维维C C被用于治疗感冒。被用于治疗感冒。19931993年年-哈佛大学发表维生素哈佛大学发表维生素E E与

4、心脏病关系的研与心脏病关系的研 究结究结果。果。第四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月 VitA、D2、D3、E、K1 等等 脂溶性脂溶性水溶性水溶性 VitB族族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、泛酸等。、叶酸、烟酸、泛酸等。分类分类按溶解度分按溶解度分第五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第一节维生素第一节维生素A A的分析的分析分类：分类：A1、A2、A3A1存在于动物肝脏、血液和眼球的存在于动物肝脏、血液和眼球的视网膜视网膜中，又称中，又称为视黄醇为视黄醇,天然维生素天然维生素A主要以此形式存在。脂溶性主要以此形式存在。脂溶性淡黄色片状结晶，熔点

5、淡黄色片状结晶，熔点64。A2主要存在于主要存在于淡水鱼淡水鱼的肝脏中。的肝脏中。维生素维生素A2的化学的化学结构与结构与A1的区别只是在的区别只是在-白芷酮环的白芷酮环的3,4位上位上多一多一个双键个双键。第六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月功能：1.维持视觉：维持视觉：维生素维生素A可可促进视觉细胞内感光色素的形成促进视觉细胞内感光色素的形成。维生。维生素素A可可调试调试眼睛适应外界光线的强弱的能力，以降眼睛适应外界光线的强弱的能力，以降低低夜盲症夜盲症和和视力减退视力减退的发生，维持正常的视觉反应的发生，维持正常的视觉反应,有助于对多种眼疾有助于对多种眼疾(如眼球干燥与如眼

6、球干燥与结膜炎结膜炎等等)的治疗。的治疗。2.促进生长发育：促进生长发育：与视黄醇对与视黄醇对基因基因的调控有关的调控有关.视黄醇也具有相当于类视黄醇也具有相当于类固醇激素的作用，固醇激素的作用，可促进糖蛋白的合成。可促进糖蛋白的合成。促进生长、促进生长、发育，强壮骨骼，维护头发、牙齿和牙床的健康。发育，强壮骨骼，维护头发、牙齿和牙床的健康。第七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3.维持上皮结构的完整与健全维持上皮结构的完整与健全视黄醇和视黄酸可以调控基因表达，减弱上皮细胞向鳞片状的分化，增加上皮生长因子受体的数量。保持皮肤湿润，防止皮肤黏膜干燥角质化，不易受细菌伤害，有助于对粉刺

7、、脓包、疖疮，皮肤表面溃疡等症的治疗。4.加强免疫能力加强免疫能力维生素A有助于维持免疫系统功能正常，能加强对传染病特别是呼吸道感染及寄生虫感染的身体抵抗力；有助于对肺气肿、甲状腺机能亢进症的治疗。第八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月富含维生素富含维生素A的食物的食物梨、苹果、枇杷、樱桃、香蕉、桂圆、杏子、荔枝、西瓜、甜瓜。水果类水果类第九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月蔬蔬菜菜类类 马齿菜、大白菜、荠菜、番茄、茄子、南瓜、黄瓜、菠菜 第十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月植物类绿豆、大米、胡桃仁 第十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月一、

8、结构与性质一、结构与性质（一）结构（一）结构R:-H 维生素维生素A醇醇 -COCH3 维生素维生素A醋酸酯醋酸酯 -COC15H31 维生素维生素A棕榈酸酯棕榈酸酯一个共轭多烯侧链的环己烯，一个共轭多烯侧链的环己烯，有立体异构体有立体异构体第十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月 醋酸酯醋酸酯 相对生物效价相对生物效价维生素维生素A 325.5 100%新维生素新维生素Aa 328 75%新维生素新维生素Ab 320.5 24%新维生素新维生素Ac 310.5 15%异维生素异维生素Aa 323 21%异维生素异维生素Ab 324 24%第十三张，PPT共一百四十九页，创作于20

9、22年6月（二）性质（二）性质1 1、具紫外吸收：在、具紫外吸收：在325325328nm328nm间有最大吸收间有最大吸收2 2、不稳定性：、不稳定性：（易氧化变质）易氧化变质）易被空气中氧或氧化剂氧化易被空气中氧或氧化剂氧化 易被紫外光裂解易被紫外光裂解 在在加加热热和和金金属属离离子子存存在在时时，更更易易氧氧化化变变质质，生生成成无无生生物物活活性性的的环环氧氧化化物物、维维生生素素A A醛醛及及维生素维生素A A酸酸第十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月v 或有金属离子存在时氧化或有金属离子存在时氧化第十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3 3、能与三氯化

10、锑呈色：产生不稳定的蓝色。、能与三氯化锑呈色：产生不稳定的蓝色。4 4、溶解性：、溶解性：维维生生素素A A能能与与氯氯仿仿、乙乙醚醚、环环己己烷烷或或石石油油醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶醚任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶第十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月二、鉴别试验二、鉴别试验（一）三氯化锑反应（一）三氯化锑反应 原原理理：维维生生素素A A在在饱饱和和无无水水三三氯氯化化锑锑的的无无醇醇氯氯仿仿溶溶液中，即显蓝色，渐变成紫红色。液中，即显蓝色，渐变成紫红色。注注意意：鉴鉴别别在在无无水水、无无醇醇（乙乙醇醇可可以以和和碳碳正正离离子子作作用用使使其其正正电电荷荷

11、消失）消失）条件下进行。条件下进行。CHCl3水中水解为氯化氧锑水中水解为氯化氧锑第十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（二）紫外吸收光谱：（二）紫外吸收光谱：5 5个共轭双键个共轭双键6 6个共轭双健个共轭双健第十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月去水去水VitA（VitA3）VitA第十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第二十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（三）薄层色谱（三）薄层色谱吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶G G展开剂：环己烷展开剂：环己烷-乙醚乙醚 (80:20)(80:20)点样量：各点样量：各2l2l，不必挥散溶剂，立即展开，

12、不必挥散溶剂，立即展开显色剂：三氯化锑溶液显色剂：三氯化锑溶液结结 论论：比比较较供供试试品品溶溶液液和和对对照照品品溶溶液液所所显显蓝蓝色色斑斑点点位置位置第二十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月BP 杂质对照品法杂质对照品法 显色剂显色剂 三氯化锑三氯化锑USP USP 显色剂显色剂 磷钼酸磷钼酸 规定斑点颜色和规定斑点颜色和R Rf f值值第二十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月立体异构体立体异构体氧化降解产物氧化降解产物合成中间体合成中间体副产物副产物UV法法（一）（一）三、三、含量测定含量测定维生素维生素A A2 2维生素维生素A A3 3环氧化物环氧化物

13、维生素维生素A A醛醛维生素维生素A A酸酸第二十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月1 1、方法建立的依据、方法建立的依据三点校正法三点校正法第二十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月2 2、测定原理、测定原理方法的依据：方法的依据：主主成成分分：在在325 325 328nm328nm有有吸收吸收杂杂质质：在在310310340nm340nm范范围围内内 吸吸收收呈呈一一条条直直线线，且且随随波波长的增大，吸收度变小。长的增大，吸收度变小。物质对光的吸收具有加和性。物质对光的吸收具有加和性。第二十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3 3、三点波长的选择

14、、三点波长的选择（1 1）第）第1 1点：选择维生素点：选择维生素A A的最大吸收波长的最大吸收波长(1 1)（2 2）第）第2 2点和第点和第3 3点：在点：在maxmax两侧各选一点两侧各选一点 等波长差法：等波长差法：3 3-1 1=1 1-2 2 测定测定VAVA醋酸酯，规定：醋酸酯，规定：1 1=328 nm=328 nm，入，入2 2=316nm=316nm，3 3=340nm=340nm 等吸收度法：等吸收度法：A A22=A=A33=6/7A=6/7A11 测定测定VAVA醇，规定：醇，规定：1 1=325 nm=325 nm，2 2=310 nm,=310 nm,3 3=33

15、4 nm=334 nm第二十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月4 4、杂质吸收、杂质吸收(1)(1)维生素维生素A A2 2和维生素和维生素A A3 3(2)(2)维维生生素素A A的的氧氧化化产产物物为为环环氧氧化化物物、维维生生素素A A醛醛和和维维生生素素A A酸。酸。(3)(3)维生素维生素A A在光照下产生的无生物活性的聚合物鲸醇。在光照下产生的无生物活性的聚合物鲸醇。(4)(4)维生素维生素A A的异构体。的异构体。(5)(5)合成时产生的中间体。合成时产生的中间体。(1)(1)(5)(5)这这些些杂杂质质在在310310340 340 nmnm波波长长范范围围内内有

16、有吸吸收收，因因此此，在在测测定定维维生生素素A A含含量量时时，必必须须考考虑虑这这些些杂杂质质的的干干扰。三点校正法可以消除这些杂质的影响。扰。三点校正法可以消除这些杂质的影响。第二十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月5 5、测定方法、测定方法（1 1）基本步骤）基本步骤:第一步第一步 A A的选择的选择 选择依据：选择依据：所选所选A A值中杂质的干扰已被基本消除值中杂质的干扰已被基本消除第二十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第二步：求百分吸收系数，第二步：求百分吸收系数，注意：注意：C C 为混合样品的浓度为混合样品的浓度第二十九张，PPT共一百四十九页，

17、创作于2022年6月第三步第三步 求效价求效价换算因数由纯品计算而得：换算因数由纯品计算而得：第三十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第三十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第三十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第四步：求标示量第四步：求标示量第三十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月(2)(2)第一法第一法等波长差法，高纯度等波长差法，高纯度VAVA醋酸酯醋酸酯测量方法：测量方法：计算各波长下的吸收度与计算各波长下的吸收度与328nm328nm波长下的吸波长下的吸收度的比值收度的比值第三十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月判

18、断判断 是否在是否在326329nm之间之间在在326329nm之间之间改用第二法改用第二法是是否否 求算求算 并与规定值比较并与规定值比较第三十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月 规定值规定值 差值差值第三十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月判断前提；最大吸收波长在判断前提；最大吸收波长在326326329nm329nm之间之间A A的选取的选取直接用直接用A A328328A A328328 A A328328校正校正 第一法不第一法不适用适用 第三十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月03%15%3%第二法第二法第二法第二法第三十八张，PPT共一百

19、四十九页，创作于2022年6月讨讨 论论1.VA醋醋酸酸酯酯的的吸吸收收度度校校正正公公式式是是用用直直线线方方程程式式法法（即即代代数数法法）推推导导而而来来；VA醇醇的的吸吸收收度度校校正正公公式式是是用用相相似似三角形法（几何法或称三角形法（几何法或称6/7定位法）推导而来。定位法）推导而来。2.在在应应用用三三点点校校正正法法时时，除除其其中中一一点点在在最最大大吸吸收收波波长长处处测测定定外外，其其余余两两点点均均在在最最大大吸吸收收峰峰的的两两侧侧进进行行测测定定。在在测测定定前前务务必必要要校校正正波波长长。测测定定的的样样品品应应不不得得少于两份。少于两份。第三十九张，PPT共

20、一百四十九页，创作于2022年6月（3）第二法皂化法：适用于维生素）第二法皂化法：适用于维生素A醇醇加热回流第四十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月判断判断 max是否在是否在323327nm之间之间取未皂化样品采用色取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定谱法纯化后再测定计算计算是是否否0.73 进一步判断进一步判断0.73，杂质含量过高，杂质含量过高第四十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月03%3%第四十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月二、三氯化锑比色法二、三氯化锑比色法优点优点 简便简便 快速快速max 618nm620nm标准曲线法标准曲线法缺点缺点

21、呈色不稳定呈色不稳定（5 10s内）内）水分干扰水分干扰与标准曲线温差与标准曲线温差1专属性差专属性差三氯化锑有腐蚀性三氯化锑有腐蚀性第四十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（三）高效液相色谱法（三）高效液相色谱法RP-HPLC同时测定人血清中同时测定人血清中VitA和和VitE的含量的含量1、仪器与分析条件：、仪器与分析条件：HPLC-UV、C18(3003.9 mm）、）、甲醇水（甲醇水（96：4）、流速：）、流速：1.2 ml/min、检测波长：检测波长：08min(330 nm),8 min后后(292 nm）内标：维生素内标：维生素A醋酸酯醋酸酯第四十四张，PPT共一百

22、四十九页，创作于2022年6月血清样品的制备：血清样品的制备：LLE法制备法制备分析方法的建立：分析方法的建立：线性线性 LOD Recovery PrecisionChromatogram:第四十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月作业：维生素AD胶丸中维生素A醋酸酯的测定方法如下：取内容物0.0410g，加环己烷溶解并稀释至50ml，摇匀，取出2ml加环己烷溶解并稀释至25ml，摇匀，在下列5个波长处测定吸光度如下：已知：平均丸重（平均内容物重）=0.0910g，标示量10000IU/丸，求维生素A醋酸酯的标示量%？波长（nm）测得A值药典规定的吸收度比值3000.2120.5

23、553160.3090.9073280.3371.0003400.2730.8113600.1160.299第四十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第二节第二节 维生素维生素BlBl的分析的分析第四十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第四十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月二、结构及性质二、结构及性质(一一)结构结构氨基嘧啶环氨基嘧啶环CH2噻唑环噻唑环(季铵碱季铵碱)HClCl-存在于米糠、麦麸和酵母中存在于米糠、麦麸和酵母中人工合成人工合成第四十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月(二二)性质性质（1 1）溶解性：）溶解性：在水中易溶，

24、水溶液显酸性在水中易溶，水溶液显酸性 在乙醇中微溶，在乙醚中不溶在乙醇中微溶，在乙醚中不溶（2 2）具有紫外吸收：）具有紫外吸收：max=246nmmax=246nm（HClHCl溶液）溶液）（3 3）硫色素反应：）硫色素反应：具有荧光具有荧光第五十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（4 4）碱性）碱性 可与酸成盐可与酸成盐 与生物碱沉淀试剂反应，生成组成恒定的沉淀。与生物碱沉淀试剂反应，生成组成恒定的沉淀。（5 5）氯化物特性）氯化物特性嘧啶环嘧啶环 伯胺伯胺噻唑环噻唑环 季铵季铵碘化汞钾、三硝基酚、碘溶碘化汞钾、三硝基酚、碘溶液、硅钨酸等液、硅钨酸等第五十一张，PPT共一百四十

25、九页，创作于2022年6月三、鉴别试验三、鉴别试验(一一)硫色素反应硫色素反应维生素维生素B B1 1的专属反应的专属反应原理：原理：第五十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第五十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月硫色素硫色素【O】第五十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月注意事项：(1)硫色素反应为维生素Bl的专属反应，虽非定量完成，但在一定条件下形成的硫色素与维生素Bl浓度成正比，且回收恒定。故可用于维生素Bl及其制剂的含量测定。(2)本法为维生素B1所特有，故不受氧化破坏产物的干扰，测定结果较为准确。但操作繁琐，且荧光测定受多种因素干扰；(3)本法

26、中使用的氧化剂，除铁氰化钾外、尚可用氯化汞或溴化氰。其中，溴化氰能将维生素Bl完全定量地氧化为硫色素，在较宽的浓度范围内与荧光强度成正比，且尿液中某些代谢产物不干扰测定。故亦适用于临床体液分析。第五十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月VitB1H+H+H+H+（二）（二）沉淀反应沉淀反应第五十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月S元素反应元素反应Cl-反应反应（三）（三）其他反应其他反应()21PbSNaSVitBNO3PbNaOH第五十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月四、含量测定四、含量测定非水溶液滴定法（原料）和紫外分光光度法（制剂）、非水溶液滴定

27、法（原料）和紫外分光光度法（制剂）、硫色素荧光法（硫色素荧光法（USPUSP（2424）。）。（一）非水滴定法（一）非水滴定法1 1、原理：、原理：含含有有两两个个碱碱性性的的已已成成盐盐的的伯伯胺胺和和季季铵铵基基团团，在在非非水水溶溶液液中可与高氯酸作用，用于含量测定。中可与高氯酸作用，用于含量测定。喹那啶红亚甲蓝（紫红喹那啶红亚甲蓝（紫红天蓝）天蓝）第五十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第五十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月2 2、方法：、方法：用冰醋酸作溶剂，滴加醋酸汞，用冰醋酸作溶剂，滴加醋酸汞，以喹哪啶红以喹哪啶红亚甲蓝混合物作指示剂，亚甲蓝混合物作

28、指示剂，高氯酸作滴定液高氯酸作滴定液第六十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3 3、注意事项：、注意事项：（1 1）加醋酸汞。）加醋酸汞。（2 2）滴定度为）滴定度为16.86mg/ml16.86mg/ml。VBVB1 1有两个碱性基团，与高氯酸反应的摩尔比为有两个碱性基团，与高氯酸反应的摩尔比为1 12 2（3 3）非非水水容容量量法法可可用用于于弱弱酸酸性性特特别别是是弱弱碱碱性性药药物物及及其其盐类的含量测定。盐类的含量测定。（4 4）此处仅适用于维生素）此处仅适用于维生素B1B1的原料药含量测定。的原料药含量测定。第六十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（二）

29、紫外分光光度法（二）紫外分光光度法1 1、原理：、原理：第六十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月2 2、V VB1B1片的含量测定片的含量测定测定方法：测定方法：以以盐酸盐酸溶液溶液 (91000)(91000)作溶剂，在作溶剂，在246nm246nm测测定吸收度，按定吸收度，按C Cl2l2H Hl7l7ClNClN4 4OSHClOSHCl的吸收系数的吸收系数 (百百分吸收系数分吸收系数)为为421421计算，即得。计算，即得。第六十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月片剂、注射剂片剂、注射剂=421（每片）相当于标示量的（每片）相当于标示量的%=A=ECL规格规

30、格g/片片g/100mlgChP第六十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（每（每ml）相当于标示量的）相当于标示量的%=规格规格g/mlml第六十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月差示分光光度法差示分光光度法简称简称AA法法 取两份相等的供试液，一份加酸，另一份加碱或缓冲取两份相等的供试液，一份加酸，另一份加碱或缓冲液或其他能够发生某种化学反应的试剂，有时也可不加任液或其他能够发生某种化学反应的试剂，有时也可不加任何溶液，然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池何溶液，然后将两者分别稀释至同样浓度，一份置样品池中，另一份置参比池中，于适当波长处，测其吸收度的差中，

31、另一份置参比池中，于适当波长处，测其吸收度的差值（值（AA值）值）在供试溶液的一定浓度范围内，在供试溶液的一定浓度范围内，AA值与浓度值与浓度C C之间呈之间呈线性关系。线性关系。优点：在不同优点：在不同pHpH介质中，或经适当化学反应后，供试物发介质中，或经适当化学反应后，供试物发生了特征性的光谱变化，而赋形剂或其他共存物质不受生了特征性的光谱变化，而赋形剂或其他共存物质不受pHpH条件或化学试剂的影响，未引起光谱变化，从而消除了它条件或化学试剂的影响，未引起光谱变化，从而消除了它们的干扰。们的干扰。第六十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月差示分光光度法差示分光光度法AA法使用

32、：法使用：1 1、利用最大吸收波长进行药物的测定：紫外光谱对、利用最大吸收波长进行药物的测定：紫外光谱对pHpH十十分敏感时，可测得分敏感时，可测得AA（碱（碱-酸）或酸）或AA（pH7-pH7-酸）。酸）。2 2、利用最大吸收与最小吸收之差（即振幅）进行药物测、利用最大吸收与最小吸收之差（即振幅）进行药物测定：某些药物共存物在某定：某些药物共存物在某pHpH范围内的光谱与范围内的光谱与pHpH无关（即无关（即吸收度不变）。而主药有最大和最小吸收，两者差值与吸收度不变）。而主药有最大和最小吸收，两者差值与主药浓度成正比。主药浓度成正比。第六十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月差示

33、分光光度法差示分光光度法AA法使用：法使用：3 3、利用干扰杂质等吸收波长进行测定：于干扰物的等吸、利用干扰杂质等吸收波长进行测定：于干扰物的等吸收波长处进行测量，如测得供试物的相应吸收度，即可消收波长处进行测量，如测得供试物的相应吸收度，即可消除共存物的干扰。除共存物的干扰。4 4、利用最小吸收波长、利用最小吸收波长(lmin)(lmin)处的增色效应进行测定：某处的增色效应进行测定：某些药物在碱性和酸性溶液中吸收重叠，但吸收值不同。但些药物在碱性和酸性溶液中吸收重叠，但吸收值不同。但在碱性或酸性溶液中于在碱性或酸性溶液中于lmaxlmax或或lminlmin处可产生增色效应，利处可产生增色

34、效应，利用此效应可测定药物浓度。用此效应可测定药物浓度。第六十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（三）（三）硫色素荧光法硫色素荧光法原理原理1、荧光荧光硫色素硫色素异丁醇异丁醇铁氰化钾铁氰化钾1VitBNaOH通过与对照品荧光强度的比较即可测得供试品含量通过与对照品荧光强度的比较即可测得供试品含量第六十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月2 2、实验操作、实验操作 40 ml40 ml具塞试管具塞试管3 3支支对照品溶液对照品溶液5 ml5 ml；其中；其中2 2支加入氧化试剂支加入氧化试剂3.0 ml3.0 ml，再迅速加入异丁醇，再迅速加入异丁醇20 20 mlm

35、l，振摇。第三支试管中加入，振摇。第三支试管中加入3.5 mol/l3.5 mol/l的的NaOHNaOH，同，同法操作为空白。法操作为空白。另取三支试管加入供试品，同法操作。另取三支试管加入供试品，同法操作。各试管中加入无水乙醇各试管中加入无水乙醇2 ml2 ml，分取异丁醇，进，分取异丁醇，进行荧光测定行荧光测定。第七十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3、结果计算、结果计算式中：A和S分别为供试品和对照品溶液测得的平均荧光读数；b和d则分别为其相应的空白读数；0.2为对照品溶液的浓度（g/ml）；5为测定时对照品溶液的取样体积（ml）。第七十一张，PPT共一百四十九页，创作于

36、2022年6月特点特点4、（1）灵敏度高，线性范围宽）灵敏度高，线性范围宽（2）代谢产物不干扰，适用于体液分析）代谢产物不干扰，适用于体液分析（3）该法适用于）该法适用于VitB1的制剂含量分析的制剂含量分析（4）可用）可用BrCN为氧化剂，反应定量完全，适合于生物样本为氧化剂，反应定量完全，适合于生物样本分析分析第七十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第三节维生素第三节维生素C C的分析的分析功效：功效：1 1、促进胶原蛋白的合成、促进胶原蛋白的合成2 2、治疗坏血病、治疗坏血病 3 3、预防、预防牙龈萎缩牙龈萎缩、出血、出血 4 4、预防动脉硬化、预防动脉硬化 5 5、抗氧化

37、抗氧化剂剂 6 6、治疗贫血、治疗贫血7 7、防癌、防癌 8 8、保护肝脏的解毒能力和细胞的正常代谢、保护肝脏的解毒能力和细胞的正常代谢 9 9、提高人体的免疫力、提高人体的免疫力 1010、提高机体的应急能力、提高机体的应急能力 第七十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月维生素维生素C C有有四四种光学异构体，其中以种光学异构体，其中以L-L-构构型右旋体的生物活性最强。型右旋体的生物活性最强。药典：维生素药典：维生素C C原料、片剂、泡腾片、颗粒原料、片剂、泡腾片、颗粒剂和注射剂剂和注射剂第七十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月一、结构及性质一、结构及性质(一一)

38、结构结构具有烯二醇结构具有烯二醇结构和内酯环和内酯环在在C C4 4、C C5 5有两个有两个手性碳原子手性碳原子性质活泼性质活泼具有旋光性具有旋光性 第七十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（二）性质（二）性质1 1、溶解性：、溶解性：水中易溶水中易溶 乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶 水溶液呈酸性水溶液呈酸性第七十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月C3OH的的pKa=4.17C2OH的的pKa=11.57一元酸（与碳酸氢钠成盐）一元酸（与碳酸氢钠成盐）2 2、具有酸性、具有酸性第七十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月烯二

39、醇结构烯二醇结构（抗坏血酸）（抗坏血酸）二酮基结构二酮基结构（去氢抗坏血酸）（去氢抗坏血酸）烯二醇结构烯二醇结构o-2Ho-2H+2H+2H3 3、强还原性、强还原性第七十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月有活性有活性有活性有活性无活性无活性L-二酮古洛糖酸第七十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月L(+)抗坏血酸抗坏血酸活性最强活性最强手性手性C（C4、C5）*4 4、光学活性、光学活性第八十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月与碱反应与碱反应内酯环内酯环5、水解性、水解性第八十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月糖类的显色反应糖类的显色反应5

40、0结构与糖类相似结构与糖类相似6 6、糖类的性质、糖类的性质第八十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月7、紫外吸收特性、紫外吸收特性第八十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月二、鉴别试验二、鉴别试验（一）利用（一）利用V VC C所具有的强还原性所具有的强还原性第八十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月1 1、与硝酸银反应、与硝酸银反应(1)(1)方方法法：取取本本品品0.2g0.2g，加加水水l0mll0ml溶溶解解。取取该该溶溶液液5m15m1，加硝酸银试液，加硝酸银试液0.5m10.5m1，即生成银的，即生成银的黑色黑色沉淀。沉淀。(2)(2)原理：原

41、理：烯二烯二醇基，醇基，具强具强还原还原性性 第八十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月2 2、与、与2 2，66二氯靛酚反应二氯靛酚反应(1)(1)方方法法：取取本本品品0.2 0.2 g g，加加水水l0mll0ml溶溶解解。取取该该溶溶液液5m15m1，加加2 2，66二二氯氯靛靛酚酚试试液液1 12 2滴，试液的颜色即消失。滴，试液的颜色即消失。第八十六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月原理：原理：氧化型氧化型玫瑰红色玫瑰红色还原型还原型蓝色蓝色OH（玫瑰色）（玫瑰色）（无色）（无色）第八十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3 3、与其他氧化剂反应

42、、与其他氧化剂反应亚甲蓝或高锰酸钾亚甲蓝或高锰酸钾 试剂褪色试剂褪色碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜 砖红色沉淀砖红色沉淀磷钼酸磷钼酸 钼蓝钼蓝第八十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月或盐酸或盐酸吡咯吡咯50（二）利用维生素（二）利用维生素C C所具有糖类性质的反应所具有糖类性质的反应第八十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月 H H+吡咯吡咯第九十张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（三）利用（三）利用V VC C所具有的紫外吸收特性所具有的紫外吸收特性 维维生生素素C C在在0.0lmol/L0.0lmol/L盐盐酸酸液液中中，在在243nm 243nm 波波长

43、长处有惟一的最大吸收，利用此特征进行鉴别。处有惟一的最大吸收，利用此特征进行鉴别。BPBP中中采采用用该该法法，并并规规定定其其吸吸收收系系数数应应为为545545585585之间之间（四）薄层色谱（四）薄层色谱第九十一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月三、杂质检查三、杂质检查1.1.溶液的澄清度与颜色：有色杂质溶液的澄清度与颜色：有色杂质 分光光度法分光光度法2.2.铁、铜离子：原子吸收分光光度法铁、铜离子：原子吸收分光光度法3.3.草酸的检查：草酸的检查：第九十二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月四、含量测定四、含量测定 具有较强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化。具

44、有较强的还原性，可被不同氧化剂定量氧化。（一）碘量法（一）碘量法1 1、原理、原理指示剂指示剂 淀粉指示液淀粉指示液第九十三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月H+第九十四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月 取本品约取本品约0.2g，精密称定，加新，精密称定，加新沸过的冷水沸过的冷水100ml与稀醋酸与稀醋酸10ml使溶使溶解，加淀粉指示液解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴，立即用碘滴定液（定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝）滴定，至溶液显蓝色，在色，在30秒内不褪。每秒内不褪。每1ml碘滴定液碘滴定液(0.1mol/L)相当于相当于8.806mg的的C6H8O6方

45、法方法2、第九十五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月3 3、注意事项、注意事项防止样品氧化防止样品氧化 减慢减慢VitCVitC被被O O2 2氧化速度氧化速度用新沸冷水作溶剂用新沸冷水作溶剂 赶走水中赶走水中O O2 2应用范围广应用范围广 对对维维生生素素C C原原料料、维维生生素素C C片片、维维生生素素C C泡泡腾腾片片、维维生生素素C C注注射射液液、维维生生素素C C颗颗粒粒剂剂等等的的含含量量测测定定均均采用。采用。差差别别仅仅在在前前处处理理：为为了了消消除除制制剂剂中中辅辅料料对对测测定定的的干干扰，滴定前要作些必要的处理。扰，滴定前要作些必要的处理。第九十六张，

46、PPT共一百四十九页，创作于2022年6月4 4、附加剂干扰的排除、附加剂干扰的排除片剂片剂 滑石粉滑石粉 过滤过滤注射剂注射剂 抗氧剂抗氧剂 丙酮丙酮甲醛甲醛Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5 第九十七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月2，6-二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法（二）（二）USPJP原理原理1、酚亚胺酚亚胺二氯靛酚二氯靛酚，-6 62 2VitCVitC第九十八张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月自身指示终点法自身指示终点法方法方法2、第九十九张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（2）快速滴定）快速滴定 2min内内 （1）酸

47、性环境）酸性环境 HPO3-HAc 稳定稳定VitC防止其他还原性物质干扰防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定）剩余比色测定 （定量过量）（定量过量）（测剩余染料）（测剩余染料）讨论讨论3、第一百张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（4 4）缺点）缺点 需经常标定需经常标定贮存贮存一周一周不稳定不稳定干扰多干扰多 氧化力较强氧化力较强第一百零一张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（三）高效液相色谱法（三）高效液相色谱法人血浆中人血浆中VitCVitC浓度的浓度的浓度的浓度的HPLC法测定法测定法测定法测定1、色谱条件、色谱条件2、标准溶液的制备、标准溶液的制备3、血浆样

48、品的处理：酸性溶液沉淀蛋白法、血浆样品的处理：酸性溶液沉淀蛋白法4、方法学考察、方法学考察5、测定、测定第一百零二张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月第一百零三张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月是抗佝偻病维生素的总称。收载有：维生是抗佝偻病维生素的总称。收载有：维生素素D D2 2、D D3 3原料药、维生素原料药、维生素D D2 2胶丸和注射剂、胶丸和注射剂、维生素维生素D D3 3注射剂等。注射剂等。第四节第四节 维生素维生素D D的分析的分析第一百零四张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月维生素维生素D3胆骨化醇胆骨化醇一、结构与性质一、结构与性质维生素维生

49、素D2骨化醇骨化醇24（一）结构（一）结构第一百零五张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（二）性质：（二）性质：1 1、性状：、性状：D D2 2、D D3 3无臭、无味，遇光易变质无臭、无味，遇光易变质2 2、溶解性：在植物油中略溶，水中不溶、溶解性：在植物油中略溶，水中不溶3 3、不稳定性：含有多个烯键，不稳定，易氧化变质降低、不稳定性：含有多个烯键，不稳定，易氧化变质降低效价，毒性增加。效价，毒性增加。4 4、旋光性：维生素、旋光性：维生素D D2 2有有6 6个手性碳原子个手性碳原子 维生素维生素D D3 3有有5 5个手性碳原子个手性碳原子5 5、显色反应：甾醇类化合物共有

50、、显色反应：甾醇类化合物共有6 6、紫外吸收特性、紫外吸收特性第一百零六张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月二、鉴别试验二、鉴别试验（一）显色反应（一）显色反应1.醋酐醋酐-硫酸反应硫酸反应 D2 黄黄 红红 紫紫 绿绿 D3 黄黄 红红 紫、蓝绿紫、蓝绿 绿绿 2.三氯化锑反应三氯化锑反应 橙红色渐变粉红橙红色渐变粉红3.三氯化铁反应三氯化铁反应 橙黄色橙黄色4.二氯丙醇和乙酰氯反应二氯丙醇和乙酰氯反应 绿色绿色渐变渐变渐变渐变迅即迅即迅即迅即第一百零七张，PPT共一百四十九页，创作于2022年6月（二）比旋度鉴别（二）比旋度鉴别维生素维生素D D2 2维生素维生素D D3 3溶溶