微生物复习——南开大学.pdf
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1、微生物学复习微生物学复习一、绪论一、绪论思考题思考题1、微生物包括哪些类群?病毒、亚病毒真细菌、古细菌真菌、藻类、原生动物2、微生物有哪些特殊的属性?形体微小、比表面积大吸收营养多、生长旺盛、营养物质和营养类型多样对环境适应性强易变异分布广、数量多3、巴斯德的什么著名实验是如何击败了自然发生理论的?曲颈瓶实验4、柯赫原则是如何证明疾病的因果关系?(1)病原微生物一定存在于一切患病个体中;(2)能从患病个体中分离出这种微生物,并能纯培养;(3)将分离出的纯培养微生物接种健康的个体时,同样导致相同的疾病;(4)从试验发病的个体中能重新分离培养出这种病原微生物。5、谁是第一人在微生物学中使用固体培养
2、基的?科赫6、举例说明微生物在生命科学发展中的重大贡献?动植物细胞培养技术;基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术、发酵工程技术、抗体工程技术的建立和实施做出了巨大贡献二、形态结构二、形态结构思考题思考题1.G+、G-菌细胞壁化学组成的主要区别是什么?都由肽聚糖组成,但肽聚糖G-交联低,无肽桥,DAP 取代 L-Lys,G+有磷壁酸,G-有脂多糖2.G+、G-菌细胞壁结构的主要区别是什么?G+:肽聚糖分子组成的三维网状结构 磷壁酸分子包埋在其中 周质(膜壁间)G-:内壁层:肽聚糖 外壁层:外膜(含脂多糖层)周质(外膜与膜间隙)3.从 G+、G-菌细胞壁化学组成和结构的区别阐明革兰氏染色的基本原
3、理。1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染2、用碘溶液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉(溶解掉了脂多糖),细胞呈无色。4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如沙黄,它使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色革兰氏染色后,细胞内形成一种不溶性的结晶紫-碘复合物,这种复合物可以用乙醇从革兰氏阴性菌中抽提出来。革兰氏阳性菌因为多层肽聚糖交联成的厚细胞壁,被乙醇脱水后,壁上小孔罐壁,阻止了不溶性复合
4、物的逸出。而乙醇容易渗入富含脂质的革兰氏阴性菌外膜。思考题思考题1.试根据细菌细胞结构的特点,分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布广泛。细菌体积小,面积大,且具有芽孢结构2.简述细菌与古生菌在细胞壁结构和化学组成、细胞质膜脂类结构等方面的区别。细胞壁的区别假肽聚糖与肽聚糖(甲烷杆菌属)热原体属没有细胞壁(1)肽聚糖双糖单位为 N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和 N-乙酰胞壁酸(NAM)假肽聚糖为 N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和 N-乙酰塔罗糖苷糖醛酸(NAT)(2)连接双糖的是-1,3-糖苷键而不是-1,4 糖苷键,不能被溶菌酶水解(3)肽尾有三个 L 型氨基酸组成 肽聚糖由两个 L 型氨基酸和两
5、个 D 型氨基酸组成(4)肽桥为一个氨基酸组成,肽聚糖的肽桥由五个氨基酸或无肽桥细胞膜的区别(1)磷脂疏水部位不是长链脂肪酸 而是异戊二烯重复单位(2)烃链和甘油成醚键而非酯键(3)古细菌存在单分子层,是二甘油四醚二植烷单层膜3.青霉素与溶菌酶破坏细菌细胞壁的机制有何不同?溶菌酶破坏细胞壁,青霉素组织细胞壁再生4.简述细菌芽胞和营养细胞在结构,化学组成和抵抗极端环境条件的能力有何不同。芽胞的耐热机制是什么?芽孢结构:胞外壁 芽孢衣 皮层 核心(芽孢壁 芽孢膜 芽孢质 核区)最外两层由蛋白质组成 皮层是芽孢肽聚糖 核心含吡啶二磷酸抵御极端环境能力强耐热机制:(1)吡啶二磷酸与钙结合形成吡啶二磷酸
6、盐 可降低核心含水量(2)皮层的肽聚糖交联松弛,渗透压高,吸水性强,可进一步降低芽孢核心含水量核心脱水,核心细胞质呈胶体状,大大提高了抗热性和抗辐射能力。5.请描述细菌鞭毛的结构与功能。鞭毛结构:鞭毛丝 钩形鞘 基体(G-含 P 环 L 环 MS 环和 C 环 Mot 蛋白和 Fli 蛋白 G+不含 P 环和 L环)功能 运动器官 实现其趋性运动能量来源:质子动势三、形态结构(真核)三、形态结构(真核)磷壁酸存在于 G+真细菌细胞中m-二氨基庚二酸存在于 G-真细菌细胞壁肽聚糖分子中吡啶二羧酸钙存在于真细菌分化形成的芽孢皮层中甘油磷脂存在于真细菌原生质膜中植烷甘油醚存在于古生菌原生质膜中菌丝变
7、态结构:厚垣孢子、吸器、附着胞、菌环、菌网、假根、匍匐枝特化结构:菌索、菌核、子座菌丝顶端生长:囊泡假说思考题思考题1.请给真菌下个定义。具有真正细胞核;分枝繁茂的丝状体菌丝顶端生长;有坚硬细胞壁,成分为几丁质与葡聚糖为主,少数为纤维素;营养方式为化能有机异养型 好氧;以产生有性孢子和无性孢子两种方式繁殖2.丝状真菌的隔膜类型有哪些?封闭型 单孔型 多孔型 桶孔型3.菌丝的变态类型、特殊结构有哪些?变态类型:厚垣孢子 吸器 附着胞 粘球、菌环和菌网 匍匐菌丝和假根特殊结构:菌索 菌核 子座4.简述真菌细胞壁的组成和结构。组成:(1)多糖:几丁质 纤维素 葡聚糖(2)蛋白质(3)脂质 黑色素 无
8、机离子结构:(1)最内层几丁质微纤维紧连质膜,起支撑作用。(2)中层是-1,3-葡聚糖链借助氢键联接形成内部的网络骨架结构,与几丁质紧密相连;(3)外层-1,6-葡聚糖可以直接与几丁质相连,也可以联接于-1,3-葡聚糖链网状结构上;一些联接到细胞壁上的GPICWPs 蛋白经由糖基磷脂酰肌醇锚定在-1,6-葡聚糖上而位于壁的外部;Pir-CWP 蛋白以共价键连接于-1,3-葡聚糖上。5.真核微生物(低等水生真菌)的游动孢子的鞭毛结构与功能。由 9 根微管二联体包围一对镶嵌在中央鞘的微管形成的9+2 型结构。有质膜包裹。功能:运动6.请试述酵母的细胞循环。G1 期是 DNA 合成的准备时期,染色体
9、解螺旋成伸展的染色质状态,同时各种酶类开始合成;S 期是 DNA 合成期,DNA 进行复制期间细胞核发生分裂,核的分裂与开始形成芽体是相关的;G2 期是有丝分裂准备期,DNA 合成停止,核延伸成细长的葫芦状,一部分进入新芽,此刻纺锤极体位于核的长轴两端,微管连于其间;M 期是有丝分裂期,复制好的染色单体在此期间向两个子核分配,最后形成两个子细胞,在出芽基部形成隔膜,最后芽体从母细胞上脱落。四、病毒四、病毒思考题思考题1.什么是病毒,如何理解病毒是一种特殊的生命形式?病毒(virus)是一类既具有化学大分子属性,又具有生物体基本特征;既具有细胞外的感染性颗粒形式,又具有细胞内的繁殖性基因形式的独
10、特生物类群病毒不具有一般生物所具有的细胞结构,但却可以像生物一样复制传递,是一种介于生物和非生物之间的生命形式。2.病毒粒有哪几种对称形式?螺旋对称衣壳二十面体对称衣壳双对称衣壳(二十面体对称+螺旋对称3.病毒复制循环分为哪几个阶段?各个阶段的主要过程如何?分 3 个阶段,六个步骤:1.病毒感染宿主细胞侵染起始:(1)吸附吸附力来源:病毒表面蛋白与细胞受体的结合-特异性,不可逆吸附静电引力、氢键、范德华力-可逆吸附,(2)侵入侵入又称病毒内化,(3)脱壳病毒侵入后,病毒的包膜和/或衣壳除去而释放出病毒核酸的过程。脱壳是病毒基因组进行功能表达所必需的感染事件2.病毒编码蛋白的表达和基因组的复制大
11、分子合成(4)增殖(复制与生物合成)病毒利用宿主的生物合成机构和场所,使病毒核酸表达和复制,产生大量的病毒蛋白质和核酸早期蛋白和中期蛋白:参与 DNA 酶 复制和转录的酶;晚期蛋白:是头部和尾部蛋白以及参与成熟噬菌体颗粒从细胞释放出来的酶。噬菌体编码的一些蛋白可以调节宿主 RNA 聚合酶与启动子的结合能力,调节早期、中期、3.病毒的装配与释放(5)装配新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒,称做病毒的装配/成熟(6)释放当宿主细胞内的大量子代噬菌体已成熟后,由于水解细胞膜的 脂肪酶 和水解细胞壁的 溶菌酶 的作用,从细胞内部促进了细胞的裂解,从而实现了子代噬菌体的释放。4.试结合一步生长曲线
12、分析病毒的特点,并与细菌进行比较。病毒:潜伏期释放稳定细菌:迟缓期对数期稳定期衰退期1)病毒在潜伏期不会增长,细菌缓慢增长2)病毒在释放过程速率相对稳定,而细菌对数期速率在变化3)病毒到达稳定期后数量不会衰减,但细菌在稳定期后会衰亡5.亚病毒有哪几类?各自有何特点?类病毒只含 RNA,专性寄生,分子病原体。无抗原性,无蛋白质外壳,有侵染活性,不需要辅助病毒独立复制,单链共价闭合环状小 RNA 分子,无蛋白质外壳,依赖辅助病毒在细胞质复制,ssRNA,单独拟病毒不具有是目前已知最小的 具有侵染性的致病因子,完全依赖宿主聚合酶,在 细胞核 内进行 滚环式病毒可干扰辅助病毒的复制并减轻其对宿主的病害
13、。拟病毒侵染性阮病毒卫星病毒蛋白质侵染因子,疏水性强的糖蛋白,高度保守,传染性,需要特异性辅助病毒,与辅助病毒没有同源性,基因组可以编码自身外壳蛋白,基因组不完整或者因基因某一点突变而产生的不能正常进行复制的病毒,也称缺陷病毒,需要借助辅助病毒改变蛋白高级构象PrPcPrPsc干扰辅助病毒复制干扰缺 损颗粒DI 颗粒与辅助病毒核酸序列同源,但不完整DI 颗粒有蛋白质外壳不能干扰异种病毒五、营养五、营养思考题思考题1.以紫色非硫细菌为例,解释微生物的营养类型可变性及对环境条件变化适应能力的灵活性。紫色非硫细菌(purple nonsulphur bacteria):没有有机物时,同化 CO2,为
14、自养型微生物;有机物存在时,利用有机物进行生长,为异养型微生物;光照和厌氧条件下,利用光能生长,为光能自养型微生物;黑暗与好氧条件下,依靠有机物氧化产生的化学能生长,为化能异养型微生物;2.试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的特点1 1 不通过膜上载体蛋白不通过膜上载体蛋白被动扩散:扩散过程不消耗能量、无载体蛋白参与、不能逆浓度梯度扩散。不是主要方式2 2 通过膜上载体蛋白通过膜上载体蛋白(1)不耗能量:促进扩散(2)耗能:主动运输:需要消耗能量,可以进行逆浓度运输;物质运送须借助细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助初级主动运输:H 的膜外运输:消耗呼吸能、化学能、光能能化膜:膜外表面高能次级
15、主动运输:由初级主动运输在细胞质膜(能化膜)上所建立起来的H+质子浓度差(电势差),在其消失过程中所偶联的营养物质运输,称为次级主动运输Na+K+-ATP酶系统:Na+,K+-ATP 酶利用 ATP 的能量将 Na+由细胞内泵出胞外,并将 K+泵入胞内。ATP 结合性盒式转运蛋白系统:ABC 转运蛋白由两个疏水性跨膜域和两个核苷酸结合结构域组成,核苷酸结合结构域可与ATP 结合。ABC 转运蛋白可与专一性的溶质结合蛋白结合基团转位:物质运送须借助细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助,需要消耗能量;溶质在运送前后发生分子结构的变化;铁载体运输吸收:微生物细胞通过向胞外分泌铁载体(siderophor
16、e)来运输铁离子。铁载体是一类能与 Fe3+形成复合物并将其运输到胞内的小分子物质蛋白质输出:Sec(Secretory)移位酶在蛋白质转运系统中起重要作用。Sec YEG 是一种膜介导的移位酶,广泛地分布在原核生物中,特异性地将某些蛋白质或酶插入膜中,然后向膜外分泌。3 3 膜泡运输膜泡运输原生生物六、代谢六、代谢分子氧对专性厌氧菌的抑制或致死作用是因细胞内缺乏超氧化物歧化酶和过氧化氢酶。硝酸盐还原菌兼性厌氧;在有氧条件下,硝酸盐还原酶活性被抑制,所利用的硝酸盐作为氮源营养物,称为同化性硝酸盐还原作用固定 CO2 的途径1)Calvin 循环(光能自养、和许多化能自养)CO2 固定1、5二磷
17、酸核酮糖羧化酶CO2 还原3磷酸甘油酸还原酶受体再生5磷酸核酮糖激酶2)还原性 TCA 循环(绿色硫细菌)3)羟基丙酸循环(绿色非硫细菌)4)厌氧乙酰-CoA 循环(化能自养菌)思考题思考题1.微生物营养与动、植物相比,碳源和氮源谱非常广泛,为什么说微生物的能源谱也非常广泛?微生物可以利用光能,有机物,无机物2.不同营养类型的微生物在不同条件下产生 ATP 和还原力的方式与特点。光能营养型光能营养型:环式光合磷酸化(红螺菌目、厌氧菌)光合磷酸化生成 ATP;在强还原环境下,由外源电子供体氧化释放的电子逆电子传递链生成 NAD(P)H特点:特点:1)电子传递途径属于循环方式,在光能驱动下,电子从
18、菌绿素逐出,又回到菌绿素;2)产 ATP 与产还原力H分别进行;3)还原力来自 H2S、H2 等的无机氢供体;4)不产生氧非环式光合磷酸化藻类、蓝细菌(有氧)H2O 作为氢供体特点:特点:1)电子传递途径非循环;2)有氧条件;3)有两个光合系统,其中的PS(含叶绿素a)可以利用红光,PS(含叶绿素b)可利用蓝光;4)反应中同时有ATP(产自 PS)、还原力H(产自 PS)和O2(产自 PS进行水光解释放氧)产生;5)还原力 NADPH 2 中的H是来自 H2O 分子光解后的 H+和 e-。绿色细菌(厌氧)H2S 作为氢供体嗜盐菌紫膜光合作用(光介导 ATP 合成)在无氧有光下,光介导视紫红质蛋
19、白辅基视黄醛分子顺、反式结构变化形成质子跨膜动势(不断把质子驱至膜外),经 ATP 酶产生 ATP。化能异养型化能异养型还原力形成:主要靠 EMP 途径,HMP 途径发酵:将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物无氧呼吸一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物(少数为有机氧化物)的生物氧化有氧呼吸 有机物是氢供体 O2 为氢受体化能自养型化能自养型化能自养微生物从无机底物,例如,NH4+、NO2-、H2S、S0、H2 和 Fe2+的氧化中得到能量ATP 和还原力H,同化 CO2 合成细胞物质。CO2 是氢受体3.酵母酒精发酵的三种类型。思考题思考题1.如何利用微生物的生长规
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