《中药化学》PPT课件.ppt

《《中药化学》PPT课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《中药化学》PPT课件.ppt（103页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY第第第第4 4节节节节黄酮类化合物的色谱检识黄酮类化合物的色谱检识黄酮类化合物的色谱检识黄酮类化合物的色谱检识1纸色谱（纸色谱（PC）2薄层色谱（薄层色谱（TLC）3纸电泳（PE）4高效薄层色谱（HPTLC）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY一、纸色谱（一、纸色谱（一、纸色谱（一、纸色谱（PCPC）双向纸色谱层析：分离黄酮及黄酮苷双向纸色谱层析：分离黄酮及黄酮苷第一向：醇性展开剂，如第一向：醇性展开剂，如n-BuOH-HOAc-H2O（4：1：5，上，上层，层，BAW）、）、t-BuOH-HOAc-H

2、2O（3：1：1，TBA）、水饱和正丁醇等等 正相，极性小的化合物正相，极性小的化合物Rf值大。适合游离黄酮。值大。适合游离黄酮。第二向：水性展开剂，如水、第二向：水性展开剂，如水、25乙酸等。乙酸等。反相，极性大的化合物反相，极性大的化合物Rf值大。适合黄酮苷。值大。适合黄酮苷。显色：显色：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。等。2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYBAW（4:1:5,上层）上层）第一向：醇性展开剂第一向：醇性展开剂黄酮苷黄酮苷黄酮苷元黄酮苷元90第二向：水性展开剂第二向：水性展开剂2乙酸乙酸黄酮苷元黄酮苷元黄酮苷黄酮苷一、纸色谱（一、纸色谱（

3、一、纸色谱（一、纸色谱（PCPC）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY二、二、二、二、薄层色谱法（薄层色谱法（薄层色谱法（薄层色谱法（TLCTLC）（1）硅胶：适用于极性小的弱酸性黄酮类化合物。展开剂：多用有机溶剂，如氯仿/甲醇。（2）聚酰胺：游离黄酮苷元及其苷。展开剂：极性强，大多含醇、酸或水。（3）纤维素：分离黄酮苷元及苷。展开剂：醇性或水性。显色：显色：UV、UV/AlCl3、UV/NH3等。等。2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY第第第第5 5节黄酮类化合物的结构测定节黄酮类化合物的结构测定节黄酮类化合物的结构测定节黄酮类化合物的

4、结构测定一、紫外光谱（一、紫外光谱（UV）二、红外光谱（二、红外光谱（IR）三、质谱（三、质谱（MS）四四、核磁（、核磁（NMR）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY原原理理：是是分分子子中中某某些些价电子吸吸收收了了一一定定波波长长的的电电磁磁波波,由由低能级跃近到跃近到高能级而产生的一种光谱。而产生的一种光谱。引起引起分子中电子能级跃迁光波波长范围：分子中电子能级跃迁光波波长范围：100-800 nm.max：跃迁电子的能级差跃迁电子的能级差max：电子跃迁的机率电子跃迁的机率 一、紫外光谱（一、紫外光谱（一、紫外光谱（一、紫外光谱（UVUV）2012 SOUT

5、HERN MEDICAL UNIVERSITY一、紫外光谱（一、紫外光谱（一、紫外光谱（一、紫外光谱（UVUV）类型：类型：-*5-OH 邻二酚OH（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（1 1）样品）样品）样品）样品+AlCl3/HCl+AlCl3/HCl与样品与样品与样品与样品+MeOH+MeOH比较：比较：比较：比较：相同时：既无3-OH，也无 5-OH 不同时：有3-OH或同时有3-OH及5-OH，红移50-60nm；只有5-OH,红移35-55nm（2 2）样品）样品）样品）样品

6、+AlCl3/HCl+AlCl3/HCl与样品与样品与样品与样品+AlCl3+AlCl3比较：比较：比较：比较：相同时：A、B环无邻二酚羟基 不同时：B环有邻二酚-OH，紫移30-40nm；B环有邻三酚-OH，紫移20nm。邻二酚-OH在A环，情况类似。（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类（一）黄酮、黄酮醇类（确定（确定3-OH、5-OH、邻二酚邻二酚OH）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY例：芦丁的例：芦丁的例：芦丁的例：芦丁的UVUV光谱光谱光谱光谱UVmax nm：MeOH 259 266sh 299sh 359NaOMe 272 3

7、27 410NaOAc 271 325 393 NaOAc/H3BO3 262 298 387AlCl3/HCl 271 300 364sh 402AlCl3 275 303sh 433为359 nm（350）黄酮醇或3-O-苷=410-359=51nm 4-OH=271-259=12nm 7-OH=387-359=28nm B环有邻二-OH=402-359=43nm5-OH=402-433=-31nmB环有邻二OH2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 有苯甲酰系统，无桂皮酰系统，带有很强吸收，带以肩峰或低强度吸收峰出现，区分黄酮及黄酮醇区分黄酮及黄酮醇。（二）异黄

8、酮、二氢黄酮（醇）类（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY带（nm）带（nm）类 型245270 310330（肩峰）异 黄 酮270295 300330（肩峰）二氢黄酮（醇）（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类（二）异黄酮、二氢黄酮（醇）类UVUV加入诊断试剂加入诊断试剂：同黄酮，但诊断试剂仅影响带，即A环。2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY3.3.3.3.举例举例举例举例已知某黄酮化合物有3-

9、OCH3、5-OH，还有3个-OH，试根据已知信息确定这三个羟基的位置。UV：（1）加入NaOMe，随时间延长而衰退；（2）加入NaOAc，I、II均红移；（3）加入NaOAc/H3BO3，I、II不变。解析：由（1）知，存在碱敏感基团，如3,4-OH、3,3,4-OH、5,6,7-OH、5,7,8-OH、5,3,4-OH，但3-OCH3，故可能是3,4-OH、5,6,7-OH、5,7,8-OH。由（2）知，有7-OH、4-OH。由（3）知，无邻二酚-OH。练习：练习：练习：练习：2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY已知含1个葡萄糖的黄酮苷，苷元是槲皮素，确定glc

10、的连接位置。UV（max）：I II MeOH 366 250 NaOMe 随时间延长而衰退 NaOAc 405 264 NaOAc/H3BO3 366 250 AlCl3/HCl 428265练习练习练习练习2 2：（黄酮醇）（3-OH,4-OH或邻OH）（7-OH、4-OH）（无邻二酚-OH）（62,3-OH和5-OH）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 洋芹素葡萄糖苷，分子式为C21H20O10。黄色，盐酸-镁粉反应为橙红色，氧氯化锆-枸橼酸反应黄色褪去，UV光谱如下，推断该化合物结构。练习练习练习练习3 3：UV 苷 II I MeOH 268 333 N

11、aOMe 269 386 NaOAc 267 387 NaOAc/H3BO3 267 340 UV苷元 II I MeOH 267 336 NaOMe 275 392 NaOAc 274 376 NaOAc/H3BO3 268 338黄酮或黄酮醇苷带I红移53nm，有4-OH带II 无红移，无7-OHA、B环上无邻二酚-OH 黄酮带I红移56nm，有4-OH带II红移7nm，有7-OHA、B环上无邻二酚-OH2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY小结小结小结小结类型MeOH带II带I说明黄酮 250-285304-350 两峰强度基本相同 黄酮醇（3-OR）328-3

12、57 含氧基，红移黄酮醇（3-OH）352-385异黄酮 245-270 肩峰 A环基团影响带II 二氢黄酮（醇）270-295低强度小峰B环基团不影响带I诊断试剂诊断试剂带带II带带I说明说明作用作用 NaOMe40-60 50-60随时间延长，逐渐衰减320-330有4-OH，无3-OH有3-OH，无4-OH有3,4-OH或3,3,4-OH（衰减更快）有7-OH判断判断4-OH NaOAc5-20有7-OH及4-OH判断判断7-OHNaOAc/H3BO35-1012-30有6,7-OH或7,8-OH B环有邻二酚羟基判断邻二酚判断邻二酚-OH AlCl3/HCl50-6035-55有3,5

13、-二OH或3-OH 有5-OH，无3-OH判断判断3-OH5-OHAlCl3与与 AlCl3/HCl30-40200B环有邻二酚羟基B环皆有邻三酚羟基A,B环皆无邻二酚羟基判断邻二酚判断邻二酚OHUVUVUVUV小结：小结：小结：小结：2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY二、红外光谱（二、红外光谱（二、红外光谱（二、红外光谱（IRIR）原理分子吸收红红外外光光引起的振振动动能能级级跃跃迁迁和转动能级跃迁而产生的吸收信号。4000-1500cm-1为官能团区，用于官能团鉴定1500-500cm-1为指纹区，用于鉴别两化合物是否相同 应用 推断官能团，如苯环、羰基、羟基

14、等 IR相同的化合物，能确定为同一个化合物2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY40004001500OHNH3600320030002700CH(饱和饱和)OCH18501550CO1700(孤立孤立孤立孤立)1700(共轭共轭共轭共轭)33003000CHCH2200CNCC16001450(多峰多峰多峰多峰)苯环苯环主要官能团主要官能团主要官能团主要官能团IRIR特征吸收特征吸收特征吸收特征吸收2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的IRIR 1600-1500 cm-1 游离：36

15、40-3610 cm-1 缔合：3500-3200 cm-1 C=O，1690-1640 cm-1 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY质谱能够提供的信息：质谱能够提供的信息：分子质量分子质量：低分辨质谱可以确定分子质量 分子式：分子式：高分辨质谱仪可以确定分子式 鉴定某些官能团鉴定某些官能团：如甲基(m/z 15)、羰基(m/z 28)、甲氧基(m/z 31)、乙酰基(m/z 43)分子结构信息分子结构信息：由分子结构与裂解方式的经验规律,根据碎片离子的m/z及相对丰度RA提供分子结构信息 人机问答人机问答：给出可能的化合物 三、质谱（三、质谱（三、质谱（三、质谱

16、（MSMS）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY常用术语：常用术语：基峰基峰：离子强度最大的峰，其相对强度或丰度为100。质荷比质荷比：离子的质量与所带电荷之比，用m/z表示。分子离子分子离子：丢失1个电子生成的带正电荷离子。碎片离子碎片离子：分子离子裂解产生的所有离子。重排离子重排离子：经过重排反应产生的离子。准分子离子准分子离子：比分子量多（或少）1质量单位的离子。三、质谱（三、质谱（三、质谱（三、质谱（MSMS）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY1.电子轰击电离（电子轰击电离（electronimpactionization,EI

17、）2.化学电离（chemical ionization,CI）3.场电离（field ionization,FI）4.场解吸（场解吸（fielddesorption,FD）5.快原子轰击（快原子轰击（fastatombombardment,FAB）6.基质辅助激光解吸电离（matrix-assisted laser desportion ionization,MALDI）7.电喷雾电离（电喷雾电离（electrosprayionization,ESI）8.大气压化学电离（atmospheric pressure chemical ionization,APCI）MS分类分类离子源离子源三、质谱

18、（三、质谱（三、质谱（三、质谱（MSMS）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY黄酮类化合物的黄酮类化合物的MS（一）黄酮苷元（一）黄酮苷元（El-MS）黄酮苷元黄酮苷元在电子轰击质谱（El-MS）中分子离子峰M+较强，且为基峰。（二）黄酮苷（二）黄酮苷（FD-MS、FAB-MS、ESI-MS）黄酮苷黄酮苷极性强、难气化以及对热不稳定，EI 测不到分子离子峰，采用FD-MS和FAB-MS、ESI-MS等软电离质谱技术，可获得强的分子离子峰M+、准分子离子峰M+H+、M+Na+峰。峰强度大，且给出糖基碎片（外侧糖、内侧糖）。三、质谱（三、质谱（三、质谱（三、质谱（MSM

19、S）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY途径-I：（RDA裂解）途径-II：两种裂解方式相互竞争、相互制约。（一）黄酮苷元（一）黄酮苷元（一）黄酮苷元（一）黄酮苷元(El-MS)(El-MS)2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（1 1）黄酮）黄酮）黄酮）黄酮 (El-MS)(El-MS)2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY化合物化合物A1+.B1+.黄酮黄酮1201025，7-二氢黄酮二氢黄酮1521025，7，4-三羟基黄酮三羟基黄酮1521185，7-二羟基，二羟基，4-甲氧基黄酮甲氧基黄酮152132黄

20、酮类化合物的质谱数据黄酮类化合物的质谱数据（1 1）黄酮）黄酮）黄酮）黄酮 (El-MS)(El-MS)2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（2 2）黄酮醇）黄酮醇）黄酮醇）黄酮醇(El-MS)(El-MS)大多数黄酮醇苷元的分子离子峰大多数黄酮醇苷元的分子离子峰M+是基峰，裂解主要按是基峰，裂解主要按方式方式进行，得到的进行，得到的B2+.、及其失去、及其失去CO而形成的而形成的 B2-28+离离子具有诊断价值。子具有诊断价值。根据根据B2+.和分子离子之间的质荷比之差，可以推断黄酮醇中和分子离子之间的质荷比之差，可以推断黄酮醇中A环和环和C环的取代情况环的取代情

21、况2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 具有具有2-OH或或2-OCH3的黄酮醇，易失去的黄酮醇，易失去-OH或或-OCH3形成形成新的五元杂环。新的五元杂环。（2 2）黄酮醇）黄酮醇）黄酮醇）黄酮醇2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（二）黄酮苷（二）黄酮苷（二）黄酮苷（二）黄酮苷MSMS（FDFD、FABFAB、ESIESI）黄酮苷类化合物在黄酮苷类化合物在FD-MS、FAB-MS、ESI-MS谱可给出谱可给出强烈的强烈的M+及及M+H+。还给出糖基的某些碎片，为化合物。还给出糖基的某些碎片，为化合物的结构鉴定提供了重要的信息。的结构

22、鉴定提供了重要的信息。2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYMSMS小结：小结：小结：小结：黄酮苷元类化合物的两种裂解方式：黄酮苷元类化合物的两种裂解方式：黄酮：裂解方式黄酮：裂解方式I 黄酮醇：裂解方式黄酮醇：裂解方式II判断判断A、B环的取代情况：环的取代情况：根据根据A1+.、B1+.、B2+.碎片离子可以判断碎片离子可以判断A、B环上环上-OH的取代；的取代；B2+与与M+的的m/z差可知差可知A、C环的取代。环的取代。2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY NMR是是由由磁磁性性核核受受幅幅射射而而发发生生跃跃迁迁所所形形成成的的吸

23、吸收收光光谱谱。研研究究最多、应用最广的是最多、应用最广的是1H核和核和13C核的核的NMR氢谱（氢谱（氢谱（氢谱（1 1H-NMRH-NMR）碳谱（碳谱（碳谱（碳谱（1313C-NMRC-NMR）四、核磁共振谱四、核磁共振谱四、核磁共振谱四、核磁共振谱(NMR)(NMR)2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY四、核磁共振四、核磁共振四、核磁共振四、核磁共振氢谱（氢谱（氢谱（氢谱（1 1H-NMRH-NMR）化学位移化学位移（Chemical shift,）：）：用于判断用于判断H H的化学环境的化学环境和磁环境和磁环境 可提供的结构信息可提供的结构信息可提供的结构信

24、息可提供的结构信息1 1H H核核自旋裂分及偶合常数自旋裂分及偶合常数J(Hz)(Coupling constant)：用于用于判断判断H H与与H H的关系的关系 积分面积：积分面积：用于确定用于确定H个数个数2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY常见质子的化学位移常见质子的化学位移(ppm)：烷氢：烷氢：RCH3，R2CH2，R3CH，烯氢：烯氢：C=C-H，芳氢：芳氢：Ar-H，醇：醇：HO-C-H，；，；HO-C-H，酸：酸：HOOC-C-H，；，；HOOC-C-H，羰基：羰基：O=C-C-H，醛基：醛基：R-CHO，9-10 酚：酚：ArO-H，四、核磁共振

25、谱四、核磁共振谱四、核磁共振谱四、核磁共振谱(1 1H NMR)H NMR)2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY偶合常数：偶合常数：偕偶（偕偶（Jgem）:sp3 J=1016Hz sp2 C=CH2 J=03Hz N=CH2 J=7.617Hz 邻偶（邻偶（Jvic）:烯型：烯型：Jcis=612Hz Jtrans=1218Hz 芳环：芳环：J=69Hz Jae=26Hz Jaa=813Hz Jee=28Hz远程偶合：远程偶合：苯环苯环Jm=13Hz Jp=01Hz四、核磁共振谱四、核磁共振谱四、核磁共振谱四、核磁共振谱(1 1H NMR)H NMR)2012 S

26、OUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR黄酮中的主要氢质子：黄酮中的主要氢质子：1.A环质子环质子2.B环质子环质子3.C环质子环质子4.糖基上的质子糖基上的质子5.取代基上的质子取代基上的质子2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY1.A1.A环质子环质子环质子环质子（1 1）5,7-5,7-二羟基黄酮二羟基黄酮二羟基黄酮二羟基黄酮H6（d，J6,8）H8（d，J8,6）H6 H8，H-6较较H-8高场高场7-羟基苷化后羟基苷化后H-6和和H-8信号均

27、向低场移动信号均向低场移动A（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR H-6 H-82012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(2)7-羟基黄酮羟基黄酮H5（d，J5,6=9)H6（dd,J6,5=9,J6,8）H8（d,J8,6）H-5较较H-6、H-8低场，是由于羰基的去屏蔽效应的影响。低场，是由于羰基的去屏蔽效应的影响。H-6、H-8

28、较较5,7-二二OH黄酮低场，且相互位置可能颠倒。黄酮低场，且相互位置可能颠倒。A（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYB（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR环质子环质子(1)4-氧化黄酮氧化黄酮（）（）（）（）H-3,5H-2

29、,6 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMRH-2,6H-3,52012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(2)3,4-二氧化黄酮：二氧化黄酮：H6（dd，J6,5；J6,2）H2（d，J2,6）H5（d，J5,6）B（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物

30、的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR H-2 H-5 H-62012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(3)3,4,5-三氧化黄酮：三氧化黄酮：若若R1=R2=R3=H，则，则H-2,6为单峰，为单峰，若上述条件不成立，则若上述条件不成立，则H-2,6分别为二重峰（分别为二重峰（J=2Hz）B（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH N

31、MR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY3.C3.C环质子环质子环质子环质子(1)(1)黄酮黄酮黄酮黄酮 H3（s）（易与H6、H8混，但峰形不同，单峰）C（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(2)(2)异黄酮异黄酮异黄酮异黄酮 l H-2位位于于羰羰基基 位位，受受

32、羰羰基基去去屏屏蔽蔽作作用用，且且通通过过碳碳与与氧氧相相连，故较一般芳香质子低场，连，故较一般芳香质子低场，。C H2 （s）（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(3)(3)二氢黄酮：二氢黄酮：二氢黄酮：二氢黄酮：H-2,dd,5.2 Jtrans=11Hz（反偶）（反偶）Jcis=5Hz（顺

33、偶）（顺偶）两个两个H-3,分别为分别为dd峰，中心位于峰，中心位于2.8 H-3e J=17Hz（偕偶），（偕偶），5Hz（顺偶）（顺偶）H-3a J=17Hz（偕偶），（偕偶），11Hz（反偶）（反偶）2 23 3C（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（4 4）二氢黄酮醇）二氢黄酮醇）二氢黄

34、酮醇）二氢黄酮醇 H-2与与H-3为反式双直立键，为反式双直立键，J=11Hz，双重峰，双重峰 3-OR苷化，供电子能力下降，两个氢的向低场位移。苷化，供电子能力下降，两个氢的向低场位移。（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（5）查耳酮：）查耳酮：（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄

35、酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（6）橙酮：）橙酮：（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY4.4.糖上质子糖上质子糖上质子糖上质子在糖的在糖的1H-NMR中：中：端基质子端基质子4.55.5 ppm 其它质子其它质子3.54.5 ppm 鼠李糖的鼠李糖的C-CH3 0.71.2 ppm （）（）（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1

36、 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（1 1）单糖苷）单糖苷）单糖苷）单糖苷 端基质子的峰位于成苷的位置以及糖的种类有关：端基质子的峰位于成苷的位置以及糖的种类有关：葡萄糖苷：葡萄糖苷：C3-OR，1-H：C-5,C-6,C-7,C-4-OR,1-H：鼠李糖苷：鼠李糖苷：C3-OR，1-H：C-7-OR,1-H：（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYH-2为为a键键:（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）

37、黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR可通过糖上C1-H与C2-H的偶合常数，来判断苷键的构型（、）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYH-2为为e键键:无法用无法用J值判断苷键的构型。值判断苷键的构型。-L-鼠李糖苷鼠李糖苷J12=Jee=2-3Hz-L-鼠李糖苷鼠李糖苷J12=Jae=2-3Hz（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY（1 1）双双糖糖苷苷：末末端端糖糖上上的的H-1因因离离黄黄酮酮母母核核较较远

38、远，受受到到的的去去屏屏蔽蔽作作用用较较小小，因因而而较较与与苷苷元元直直接接相相连连的的糖糖的的H-1处处于较高场的位置。于较高场的位置。H1末端末端H1与苷元相连与苷元相连（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(5)其他质子其他质子酚酚-OH：H5-OH H7-OH 10.9 H3-OH 9.7 C6-CH3，C8-CH3：2.45-2.05,C6-CH3 C8-CH3-OCH3：（3H,s）-OCOCH3：糖：糖-OH乙酰化，（乙酰化，（3H,s）酚酚-OH

39、乙酰化，（乙酰化，（3H,s）（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的（一）黄酮类化合物的1 1H NMRH NMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 某黄酮化合物1H-NMR数据如下：ppm：6.18(1H,d,J=2H)6.38(1H,s)6.50(1H,d,J=2Hz)6.90(2H,d,J=8Hz)7.70(2H,d,J=8Hz)6-H3-H8-H3,5-H2,6-H练习练习练习练习2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY四、核磁共振四、核磁共振四、核磁共振四、核磁共振碳谱（碳谱（碳谱（碳谱（1313C-NMRC

40、-NMR）化学位移化学位移（Chemical shift,）用于判断用于判断13C的化学环境和磁环境的化学环境和磁环境 可提供的结构信息可提供的结构信息可提供的结构信息可提供的结构信息峰高或峰面积峰高或峰面积 常规常规13C谱不提供积分曲线等定量数据谱不提供积分曲线等定量数据2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY各种常见的13C核的化学位移如下：四、核磁共振四、核磁共振四、核磁共振四、核磁共振碳谱（碳谱（碳谱（碳谱（1313C-NMRC-NMR）2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(二二二二)黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类

41、化合物的1313CNMRCNMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYC=OC-2(或或C-)C-3(或或C-)归属归属168.6169.8(s)137.8140.7(d)122.1122.3(s)异橙酮类异橙酮类174.5184.0(s)160.5163.2(s)104.7111.8(d)黄酮类黄酮类149.8155.4(d)122.3125.9(s)异黄酮类异黄酮类147.9(s)136.0(d)黄酮醇类黄酮醇类182.5182.7(s)146.1147.7(s)111.6111.9(d)(=CH-)橙酮类橙酮类188.0197.0(s)136.9145.4(d)

42、116.6128.1(d)查耳酮类查耳酮类75.080.3(d)42.844.6(t)二氢黄酮类二氢黄酮类82.7(d)71.2(d)二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY确定黄酮类化合物的取代图示确定黄酮类化合物的取代图示：XZiZoZmZpOH26.9-12.71.4-7.3OCH330.2-14.70.9-8.1(二二二二)黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的1313CNMRCNMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY(二二二二)黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的黄酮类化合物的131

43、3CNMRCNMR2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYNMRNMR小结：小结：小结：小结：黄酮母核：黄酮母核：A环：环：5,7-OH，6-H(d),8-H(d)=7-OH，6-H(dd),8-H(d)=；5-H(d)=8 B环：环：4-OR，H-2,6(d),H-3,5(d)=7.9-6.5 3,4-OR，H-6(dd，2,8 Hz)；H-2(d,2 Hz)；H-5(d,2 Hz)3,4,5-OR，取代基相同：，取代基相同：s，H-6(d)

44、,H-2(d)=C环：黄酮环：黄酮H-3(s)=糖基质子：糖基质子：葡萄糖，葡萄糖，H-其他其他H-1(d)=鼠李糖，鼠李糖，H-1(d)=其他质子：其他质子：Ar-OH 5-OH=12.4 7-OH=10.9 3-OH -OCH3 -COCH32012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY槲皮素的光谱数据槲皮素的光谱数据槲皮素的光谱数据槲皮素的光谱数据IR:IR:3500-3000(-OH),1670,1620(C=O)3500-3000(-OH),1670,1620(C=O)2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYUVUV max(MeOH):ma

45、x(MeOH):371,256,206371,256,2062012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYEI-MS:EI-MS:302(M+100%),274(M+-CO),273(M+-CHO),245(273-CO),153,302(M+100%),274(M+-CO),273(M+-CHO),245(273-CO),153,152,137,109,77152,137,109,772012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY

46、从唇形科植物中分得一成分为淡黄色结晶从唇形科植物中分得一成分为淡黄色结晶I，分子式为，分子式为C21H22O11。定性反应：三氯化铁，蓝绿色定性反应：三氯化铁，蓝绿色 盐酸盐酸-镁粉反应，橙色镁粉反应，橙色 Molish反应，紫色环反应，紫色环 氧氯化锆氧氯化锆-枸橼酸反应，黄色褪去枸橼酸反应，黄色褪去 UV（max）：）：II I MeOH 256 266sh 348 NaOMe 264 301sh 394 NaOAc 259 406 NaOAc/H3BO4 258 353 AlCl3/HCl 273 295sh 357 387示有酚示有酚-OH示为黄酮类化合物示为黄酮类化合物示有糖或苷示有

47、糖或苷示有示有5-OHI为为348nm，示无，示无3-OHI红移红移46nm，示有，示有4-OH无无7-OH无邻二酚无邻二酚-OHI红移，示有红移，示有5-OH例例例例1 1 1 1：2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY IRmaxcm-1：3350(-OH)，1659(C=O)，1603，1490(苯苯)。1HNMR(DMSO-d6 TMS)：ppm 6.3(1H,s)6.7(1H,d,J=2.5)7.0(1H,d,J=2.5)6.8(2H,d,J=8.0)8.1(2H,d,J=8.0)I用酸水解，水解产物为用酸水解，水解产物为II和母液，母液经和母液，母液经PC

48、鉴定为一鼠李糖（鼠李鉴定为一鼠李糖（鼠李糖苷）；糖苷）；II经重结晶，测定其分子式为经重结晶，测定其分子式为C15H10O6，盐酸，盐酸-镁粉、三氯化铁反镁粉、三氯化铁反应阳性，与锆盐应阳性，与锆盐-枸橼酸反应黄色褪去，枸橼酸反应黄色褪去，Molish反应为阴性（无糖基）。反应为阴性（无糖基）。3-H6-H8-H3,5-H2,6-H2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY从黄芩根中分离出成分从黄芩根中分离出成分I的数据如下：的数据如下：浅黄色结晶，浅黄色结晶，mp.300-302(dec)。化学检查：三氯化铁，阳性化学检查：三氯化铁，阳性 盐酸盐酸-镁粉反应，阳性镁粉反

49、应，阳性 Gibbs反应，阴性反应，阴性 氨性氯化锶反应，阴性氨性氯化锶反应，阴性 元素分析元素分析C16H12O6。MS m/z(%)：300(M+,55.6)，285(100)（M-15为基峰，示有为基峰，示有-OCH3），），118(19.4)（B环产生的碎片）。环产生的碎片）。UV（max）：）：MeOH 277 328 NaOAc 284 390 AlCl3/HCl 274 373 NaOMe 284 395示有酚示有酚-OH示为黄酮类化合物示为黄酮类化合物示示C8无无H，即被取代，即被取代示无邻二酚示无邻二酚-OHI为为328nm，示无，示无3-OHII红移，示有红移，示有7-OH

50、示有示有5-OH示有示有4-OH例例例例2 2：2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY IRmaxcm-1：3430，3200(-OH)，1660(C=O)，1610，1580(苯苯)。1HNMR(DMSO-d6)：ppm 3.82(3H,s)6.20(1H,s)6.68(1H,s)6.87(2H,d,J=9)7.81(2H,d,J=9)-OCH36-H 3-H3,5-H2,6-H2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY百蕊草素（百蕊草素（I）的结构测定）的结构测定:浅黄色结晶，浅黄色结晶，mp.190-192 化学检查：三氯化铁，暗褐色化学检