VIDAS介绍及检测流程.ppt
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1、IndustrialMicrobiology-Food食品致病菌食品致病菌VIDAS工业工业VIDASIndustry致病菌致病菌VIDASVIDAS系统工业检测项目系统工业检测项目:Salmonella沙门菌 Listeria李斯特菌:单增、李斯特属 E.coli O157大肠杆菌O157Campylobacter弯曲菌Staphylococcus Enterotoxins葡萄球菌肠毒素VIDASIndustryVIDAS数据数据Vidas试剂试剂200750个国家个国家7.6百万条百万条 资料来源:SAM2,截止到Dec 07VIDASIndustryVIDAS市场份额市场份额200715
2、.1%快速检测市场快速检测市场(快速方法占总的市场份额)(快速方法占总的市场份额)9.0%总体市场总体市场(VIDAS占致病菌检测市场份额)占致病菌检测市场份额)转变为快速方法 :VIDAS占60%快速方法市场份额 45百万检测百万检测VIDASIndustryVIDAS系统系统 第一台第一台第一台第一台 全自动化全自动化全自动化全自动化 免疫分析仪器免疫分析仪器免疫分析仪器免疫分析仪器多种致病菌检测多功能应用广泛结果可靠自动化标准化可追溯客观判读结果即时可用试剂可以让您对致病菌的风险作出快速安全的判断可以让您对致病菌的风险作出快速安全的判断VIDASIndustryVIDAS系统系统VIDA
3、S-MINIVIDAS:完整的系统完整的系统 仪器仪器仪器仪器试剂试剂试剂试剂VIDASIndustryVIDAS系统系统一个中央运行单元:键盘键盘,显示屏显示屏,热敏热敏打印机打印机,条码扫描器,条码扫描器一个分析单元:2个独立检测仓,最多可同时检测个独立检测仓,最多可同时检测12个样品个样品miniVIDASVIDASIndustryVIDAS系统系统VIDASPC一个中央处理单元:电脑电脑:PC+屏幕屏幕键盘键盘:打印机打印机UPS:条形码阅读器条形码阅读器一个分析单元:(可扩展为(可扩展为2个分析单元)个分析单元)5个独立检测仓,个独立检测仓,最多可同时检测最多可同时检测30个样品个样
4、品VIDASIndustryVIDAS系统系统即可用的试剂存放在即可用的试剂存放在即可用的试剂存放在即可用的试剂存放在 有有有有1010个微孔的试剂条内个微孔的试剂条内个微孔的试剂条内个微孔的试剂条内特异性强的抗体特异性强的抗体特异性强的抗体特异性强的抗体包被在包被在包被在包被在 SPRSPR內侧內侧內侧內侧VIDAS:一个创新的检测模式一个创新的检测模式SPR:固相容器固相容器(SolidPhaseReceptacle)VIDASIndustryVIDAS系统系统检测反应检测反应酶标记的二抗酶标记的二抗 样本样本前清洗液前清洗液VIDASIndustryVIDAS系统系统抗原检测抗原检测三明
5、治夹心法4甲基伞形酮磷酸盐固相抗体 待测抗原碱性磷酸酶标记的二抗VIDASIndustryVIDAS系统系统 阅读荧光值滤光片滤光片透透镜镜荧 光激 发光电二极管VIDASIndustryVIDAS系统系统免疫反应酶反应循环进出循环进出抗原检测抗原检测酶结合物酶结合物清洗缓冲液清洗缓冲液底物底物样本样本VIDASIndustryVIDAS系统系统每种致病菌检测都设有一个每种致病菌检测都设有一个阈阈值值结果结果:阳性:阳性:检测值高于检测值高于阈阈值值阴性:阴性:检测值检测值低于阈值低于阈值结果客观结果客观!VIDASIndustryVIDAS系统系统VIDAS免疫浓缩免疫浓缩样品量:ICS 8
6、00 l ECO 500 l 免疫浓缩液免疫浓缩液释放液释放液中和缓冲液中和缓冲液前清洗液前清洗液清洗液清洗液底物底物500 l样本样本VIDASIndustryVIDAS系统系统VIDAS免疫浓缩免疫浓缩固相包被的抗体捕获固相包被的抗体捕获目标细菌细胞目标细菌细胞捕获抗原捕获抗原清洗清洗洗洗涤涤程程序序减减少少未未结结合的抗体合的抗体释放释放用用特异特异性性酶酶切割抗切割抗体体以以释放释放活菌細胞活菌細胞VIDASIndustryVIDAS系统系统试剂条试剂条(60or30条条)SPR管管(60or30个个)MLE卡卡1张张阳性质控阳性质控C1(*)阴性质控阴性质控C2(*)标准物标准物S1
7、,稀释液(如有需要)稀释液(如有需要)试剂盒包装试剂盒包装(*)免疫浓缩试剂盒内不含此液免疫浓缩试剂盒内不含此液VIDASIndustryVIDAS系统系统试剂盒保存温度试剂盒保存温度2-8C.试验前试验前30分钟将试剂从冰箱取出使其恢复到室温分钟将试剂从冰箱取出使其恢复到室温妥善处理使用过的试剂条和妥善处理使用过的试剂条和SPR吸头吸头.不同批号试剂盒的试剂不能混用不同批号试剂盒的试剂不能混用.使用无粉尘可处置的乳胶手套避免干扰使用无粉尘可处置的乳胶手套避免干扰不要冷冻不要冷冻确保确保SPR包装袋正确封好包装袋正确封好所所有有的的肉肉汤汤,质质控控,校校准准物物在在放放入入试试剂剂条条前前需
8、需要要在在振振荡荡器器上上混混匀匀操作注意事项操作注意事项VIDASIndustryVidas试剂条试剂条1.条形码代号与条形码对应2.测试简称3.测试名称4.批号5.试剂有效期6.试剂条生产编号7.有色字母数字混合编码:使试剂条与SPR吸头对应2-8CIN VITROSAMPLE I.D.ListeriaVIDASLISC C 5 9 U 2 7 7LOT 060421-0 EXP 21-APR-06 S/N 6834bioMrieux 69200 Marcy lEtoile FRANCE123456LISVIDASIndustryVIDAS系统系统试剂条试剂条每个试剂条有每个试剂条有10个
9、反应孔个反应孔,1st第一个第一个为为加样品孔加样品孔,2-9为试剂孔为试剂孔,最最后后一一个个孔孔为为光光学学检检测测孔孔,(注注意意:取取放放试试剂剂条条时时,不不要要用手接触此用手接触此光学检测孔光学检测孔)试剂条包含所有即可用试剂试剂条包含所有即可用试剂.检测检测VIDASIndustryVIDAS系统系统试剂条试剂条免疫浓缩免疫浓缩每个试剂条有每个试剂条有10个反应孔个反应孔,第四个孔为加第四个孔为加样孔样孔,免疫浓缩结束时,第一个孔存放最终的免疫浓缩液免疫浓缩结束时,第一个孔存放最终的免疫浓缩液最最后后一一个个孔孔为为光光学学检检测测孔孔,(注注意意:取取放放试试剂剂条条时时,不不
10、要要用用手手接触此光学检测孔接触此光学检测孔)试剂条包含所有即可用试剂试剂条包含所有即可用试剂.VIDASIndustryVIDAS系统系统SPR管管(固相容器固相容器)SPR吸头吸头包被有抗体或者抗原包被有抗体或者抗原,同时又是吸液管同时又是吸液管有色字母数字混合编码有色字母数字混合编码:使试剂条与使试剂条与SPR吸头对应吸头对应SPR吸吸头头包包装装袋袋内内有有干干燥燥剂剂,取取用用SPR吸吸头头后后应应立立刻刻封封闭闭包包装袋装袋VIDASIndustryVIDAS系统系统MLE卡卡07714_A30406VIDASLIS 1 AQ8TE5K 2 J21QY3Y 3 6VO6HJ6 4
11、N65CHD 5 JFK355 6 4 7 4G54 8 9 10 11 12 13 14 15 16 CAssay:LIS试剂条试剂条lot:060421-0ControlC1(+)testvaluerange:0.801.20ControlC2(-)testvaluerange:=0.09St和和ard(S1)RFVrange:1750-3400MaxCV13%bioMrieux sa 69280 Marcy lEtoile FranceVIDASIndustryVIDAS系统系统校准校准每每14天或天或28天进行一次校准天进行一次校准C1:阳性质控阳性质控S1:标准物标准物C2:阳性质控
12、阳性质控VIDASIndustryVIDAS系统系统结果结果1.在选择性琼脂上铺上选择性肉汤在选择性琼脂上铺上选择性肉汤(例如例如:直接将直接将Fraser肉汤接肉汤接种种ChromIDOAA平板平板),2.分纯典型菌落分纯典型菌落,3.使用传统方法中提到的生化和血清学试验使用传统方法中提到的生化和血清学试验4.确证试验方法在确证试验方法在说明书中有描述说明书中有描述.所有阳性结果需要做确证所有阳性结果需要做确证试验试验如何做确证试验如何做确证试验?什么是确证试验什么是确证试验?VIDASIndustryVIDAS参数参数内容内容概论VIDAS参数参数沙门菌沙门菌李斯特菌 大肠杆菌O157:H
13、7弯曲菌葡萄球菌肠毒素VIDASIndustryVIDAS沙门菌沙门菌VIDAS提供的试剂和方案提供的试剂和方案3 种试剂盒VIDAS SLMVIDAS SLM30 70230 702VIDAS ICSVIDAS ICSref 30 435ref 30 435=VIDASVIDASSLMSLM2天判定阴性结果=VIDAS=VIDASICS/ICS2ICS/ICS2+平板接种平板接种平板接种平板接种2天判定阴性结果传统方法最少传统方法最少3 3天判定阴性结果天判定阴性结果)VIDAS ICS2VIDAS ICS2ref 30 708ref 30 708=VIDASVIDASICS/ICS2ICS
14、/ICS2+VIDAS+VIDASSLMSLM1天判定阴性结果VIDASIndustryVIDASSLM沙门菌检测试剂盒沙门菌检测试剂盒ref30702名称名称:缩写代写代码:产品品编号号:包装包装:描述描述:检测时间:出出结果果时间:兼容性兼容性:方法方法认证:VIDAS沙沙门菌菌SLM30702,60测试测试,检测食品和环境中的沙门菌检测食品和环境中的沙门菌45分钟分钟,2天判定阴性结果天判定阴性结果ECO和和LIS.AFNOR,AOAC,Emmas,HPBC,DIN,(一共一共8种认证种认证),VIDASIndustryVIDASSLMref30702检测阈值检测阈值结果结果0.23阳性
15、阳性每个试剂盒可作每个试剂盒可作60次检测次检测SPR:包被有抗沙门菌 O 和 H 单克隆抗体,试剂条试剂条:标记:碱性磷酸酶标记的多克隆抗沙门菌抗体,S1 纯化和灭活的沙门菌抗原C1C2:Tris 缓冲盐吐温液MLE卡卡.VIDASIndustryVIDASSLMref30702,AFNOR认可认可BIO12/01-0494符合符合ISO16140VIDASSLMVIDASSLM所有食品与宠物食品所有食品与宠物食品25g样品加至样品加至225mL缓缓冲蛋白胨水冲蛋白胨水16-20小时小时371C取取0.1mL加至加至10mLM肉汤肉汤mL加至加至10mLMKTTn肉汤肉汤mL加至加至10mL
16、RVS肉汤肉汤取取1mL加至加至10mLM肉汤肉汤6-8小时小时1C6-8小时小时371C151min16-20小时小时1C16-20小时小时1C45分钟分钟VIDASIndustryVIDASEasySLMref30702,AFNOR认可认可BIO-12/16-09/05mL加至加至10mL沙门菌沙门菌 SX2SX2肉汤肉汤肉汤肉汤16-22小时小时37C22-26小时小时/41.5C加热加热15min所有食品,动物食品,环境样品所有食品,动物食品,环境样品25g样品加至样品加至225mL缓冲蛋白胨水缓冲蛋白胨水VIDASSLMVIDASSLM符合符合ISO16140改良改良VIDASInd
17、ustryVIDASEasySLMSX2肉汤肉汤提高平板选择性提高平板选择性(更容易分离沙门菌更容易分离沙门菌)AOACRI(2008年第年第3季度)和季度)和OMA(2009年第年第2季度)认证季度)认证正在进行中正在进行中优优点点孵育孵育时间更加灵活时间更加灵活:前增菌时间从 24-26 小时 减少到 16-22 小时增菌时间从24-26 小时减少到 22-26 小时SX2肉汤肉汤货号货号Ref.42121,包装包装:20 x10mL管管,有效期有效期:6个月个月VIDASIndustryVIDASSLMref30702VIDASSLMVIDASSLM151minVIDASSLMVIDAS
18、SLM45minutes所有食物除了生肉所有食物除了生肉加热加热25克样品克样品加入到加入到225mL非选择性非选择性前增菌肉汤前增菌肉汤18-24小时小时351C1mL加入到加入到10mLM肉汤肉汤1mL加入到加入到10mLTetrathionate肉汤肉汤6-8小时小时41-42C6-8小时小时41-42C18-24小时小时41-42C18-24小时小时41-42C45minutes生肉或高微生物含量生肉或高微生物含量食物样品食物样品1mL加入到加入到10mLTetrathionate肉汤肉汤18-24小时小时41-42C25克样品克样品加入到加入到225mL非选择性非选择性前增菌肉汤前增
19、菌肉汤18-24小时小时351C1mL加入到加入到10mLM肉汤肉汤18-24小时小时41-42C6-8 小时小时 41-42C6-8小时小时41-42C151min1mL加入到加入到10mLM肉汤肉汤0.1mL加入到加入到10mLRV肉汤肉汤加热加热0.1mL加入到加入到10mLRV肉汤肉汤1mL加入到加入到10mLM肉汤肉汤VIDASIndustryI ImmunommunoC ConcentrationoncentrationS Salmonellaalmonella免疫浓缩沙门菌免疫浓缩沙门菌免疫浓缩沙门菌免疫浓缩沙门菌VIDASICS:ref30435VIDASICS2:ref307
20、08代替传统选择性增菌过程自动免疫捕获调整沙门菌与相关菌群的平衡2个产品个产品:VIDASICSRef30435VIDASICS2Ref30708VIDASIndustryVIDASICS,VIDASICS2说明说明SPR:抗沙门菌抗沙门菌O抗原抗体抗原抗体抗沙门菌抗沙门菌 H抗原抗体抗原抗体可捕获有动力和无动力沙门菌的特殊抗体可捕获有动力和无动力沙门菌的特殊抗体可捕获有动力和无动力沙门菌的特殊抗体可捕获有动力和无动力沙门菌的特殊抗体800l前增菌肉汤前增菌肉汤(orS1)加入到样本孔加入到样本孔(第第4孔孔)转移至前清洗液转移至前清洗液结合结合(结合沙门菌结合沙门菌)清洗步骤清洗步骤(去除未
21、结合去除未结合)释放过程释放过程(沙门菌沙门菌)中和反应中和反应(酶反应酶反应)从第一孔移取免疫浓缩液从第一孔移取免疫浓缩液VIDASIndustryVIDASICS:ref30435名字名字:免疫免疫浓缩Salmonella沙沙门菌菌 代代码:ICS货号号:30435,包装包装:60检测检测,说明说明:免疫浓缩食品中的沙门氏菌免疫浓缩食品中的沙门氏菌实验时间实验时间:40分钟分钟,出结果时间出结果时间:1天天(ICS+SLM)or2天天(ICS+plate)阴性结果阴性结果,可同时进行可同时进行:ICE,认证认证:AOAC.VIDASIndustryVIDASICS:ref30435VIDA
22、SICS+SLMAOAC认证认证25克样品克样品加入到加入到225mL非选择性非选择性前增菌肉汤前增菌肉汤18-24小时小时361CVIDASICS所有食物所有食物(除了原奶除了原奶)和和宠物食品宠物食品ICS肉汤肉汤151min5-6小时小时411CVIDASSLM45分钟分钟40分钟分钟VIDASIndustryVIDASICS:ref30435VIDASICS+SLMAOAC认证认证VIDASICS所有食物所有食物和和宠物食品宠物食品25克样品克样品加入到加入到225mL非选择性非选择性前增菌肉汤前增菌肉汤18-24小时小时361C40分钟分钟选择性选择性平板平板24小时小时361CVI
23、DASIndustryVIDASICS2:ref30708名字名字:免疫免疫浓缩沙沙门菌菌2代代码:ICS2货号号:30708,包装包装:60检测,说明明:免疫免疫浓缩食品中的沙食品中的沙门氏菌氏菌实验时间:40分分钟出出结果果时间:1天天(ICS2+SLM)or2天天(ICS2+plate)阴性阴性结果果,可同可同时进行行:ICE,认证:AFNOR.VIDASIndustryVIDASICS2:ref30708AFNOR认证认证BIO12/2205/07符合符合ISO16140VIDASICS2所有食物所有食物(除了原奶除了原奶)和和宠物宠物食品食品ICS肉汤肉汤151min5-6小时小时1
24、CVIDASSLM45分钟分钟40分钟分钟25克样品克样品加入到加入到225mLBPW16-20小时小时371CVIDASIndustryVIDASICS2:ref30708AFNOR认证认证BIO12/2305/0716-20小时小时371C40分钟分钟VIDASICS2所有食物所有食物(除了原奶除了原奶)和和宠物食品宠物食品25克样品克样品加入到加入到225mLBPW选择性肉汤选择性肉汤24小时小时371C符合符合ISO16140用于确认的平板用于确认的平板:Chrom ID 沙门菌,XLD,XLT4 适用于高污染的样品如禽肉VIDASIndustry比较比较VIDASICS/VIDASI
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- VIDAS 介绍 检测 流程
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