分光光度法 (2)精.ppt
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1、分光光度法1第1页,本讲稿共48页吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸光光度法是基于被测物质的分子对光具有选择性吸收的特性而建立起来的分析方法。吸收的特性而建立起来的分析方法。化学分析与仪器分析方法比较化学分析与仪器分析方法比较化学分析化学分析:常量组分:常量组分(1%),Er0.1%0.2%依据化学反应依据化学反应,使用玻璃仪器使用玻璃仪器准确度高准确度高仪器分析仪器分析:微量组分:微量组分(105为高灵敏度为高灵敏度;10104 4。*反应生成的有色化合物反应生成的有色化合物组成恒定,稳定组成恒定,稳定。*显色剂在测定波长处无明显吸收。显色剂在测定波长处无明显吸收。对照性好对照性
2、好,maxmax60 nm.60 nm.*显色条件易于控制,显色条件易于控制,重现性好重现性好。10.3 光度分析法的设计23第23页,本讲稿共48页2.显色剂显色剂CH3CCCH3 HON NOH NNOHCOOHSO3HOO型:NNNOH OHON型:PAR(4-(2-吡啶偶氨)-间苯二酚)NH NHNSNS型:双硫腙NN型:丁二酮肟邻二氮菲磺基水杨酸24第24页,本讲稿共48页3.显色条件的确定显色条件的确定1.显色反应酸度显色反应酸度(c(M)、c(R)一定)一定)pH1pHpH2pH25第25页,本讲稿共48页c(R)c(R)c(R)Mo(SCN)32+浅红浅红Mo(SCN)5 橙红
3、橙红Mo(SCN)6-浅红浅红Fe(SCN)n3-n2.显色剂用量显色剂用量(c(M)、pH一定)一定)26第26页,本讲稿共48页3.显色温度及显色时间另外,还有介质条件、有机溶剂、另外,还有介质条件、有机溶剂、表面活性剂等表面活性剂等T1()T2()t(min)A27第27页,本讲稿共48页6.6.干扰及消除干扰及消除1.1.控制酸度法控制酸度法 测Fe3:(控制pH)Fe3+,Cu2+FeSS(紫红)Cu2+pH 2.5SS28第28页,本讲稿共48页测测Co2(含含Fe3+):(掩蔽法掩蔽法)Co2,Fe3+Co2+FeF63-Co(SCN)2(蓝)NaFSCNCo2+Fe2+,Sn4
4、+(2)Sn2+Co(SCN)2SCN2.2.掩蔽剂掩蔽法掩蔽剂掩蔽法3.3.氧化还原掩蔽法氧化还原掩蔽法 29第29页,本讲稿共48页4.4.利用校正系数。利用校正系数。5.5.利用参比溶液消除显色剂和某些共存有色利用参比溶液消除显色剂和某些共存有色离子的干扰离子的干扰Al3+,Co2,Ni2+Co2Ni2+AlF63-参比F-2.其他显色剂和试剂30第30页,本讲稿共48页6、选择适当的测定波长选择适当的测定波长515655415500钍-偶氮砷III 钴-亚硝基红盐 AA络合物络合物试剂试剂31第31页,本讲稿共48页10.4吸光光度分析及误差控制吸光光度分析及误差控制1.测量波长的选择
5、(测量波长的选择(吸收最大,干扰最小吸收最大,干扰最小)一般来说,选择一般来说,选择 max;如;如 max处有干扰,则选择无处有干扰,则选择无干扰处的干扰处的 进行测定进行测定2.吸光度范围的选择(吸光度范围的选择(0.20.8)10.4.1测量波长和吸光度范围的选择32第32页,本讲稿共48页 1.1.试液与显色剂均无色时,可用试液与显色剂均无色时,可用蒸馏水蒸馏水作参比。作参比。2.2.显色剂为无色,而被测试液中存在其他有色显色剂为无色,而被测试液中存在其他有色 离子,离子,可用可用不加显色剂的被测试液不加显色剂的被测试液作参比。作参比。3.3.显色剂有颜色,可选显色剂有颜色,可选试剂空
6、白试剂空白作参比作参比4.4.干扰组分与显色剂有反应干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时:又无法掩蔽消除时:1 1)掩蔽被测组分掩蔽被测组分,再加入显色剂,作参比,再加入显色剂,作参比.2 2)加入等量干扰组分加入等量干扰组分到空白溶液中到空白溶液中,作参比作参比.3.3.参比溶液的选择参比溶液的选择33第33页,本讲稿共48页 0 1 2 3 4 mg/mlA。*0.80.60.40.20溶液浓度的测定溶液浓度的测定A bc工作曲线法工作曲线法(校准曲线校准曲线)6.2.5 朗伯-比尔定律的分析应用(p229)34第34页,本讲稿共48页10.4.2对朗伯对朗伯-比尔定律的偏离比尔定律的
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