实验七培养基的制备与灭菌.ppt

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1、实验七_培养基的制备与灭菌实验目的了解培养基的制备基本过程掌握灭菌的基本方法和灭菌锅的使用掌握实验器皿的基本包扎方法实验原理培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。一般来说，培养基包括有水份、碳源、氮源、无机盐类以及生长因子等营养成份。此外还要有适宜的PH值，一定的渗透压（即盐浓度）以及氧化还原电位等。原则目的明确营养协调物化条件适合节约据组成成分可分为据组成成分可分为:1.合成培养基合成培养基 2.天然培养基天然培养基 3.半合成培养基半合成培养基从培养基的物理状态可分为从培养基的物理状态可分为 1.液体培养基液体培养基 2.固体培养基固体培养基 3.半

2、固体培养基半固体培养基据用途可分为：据用途可分为：1.基础培养基基础培养基 2.加富培养基加富培养基 3.选择培养基选择培养基 4.鉴别培养基鉴别培养基实验基本流程实验基本流程原料称量、溶解原料称量、溶解调节调节pH 分装分装（过滤澄清（过滤澄清）灭菌灭菌 塞棉塞和包扎塞棉塞和包扎 设计，计算，准备设计，计算，准备（摆斜面）（摆斜面）培养基成份的换算与称量样品的溶解（淀粉等高分子物质应单独加热溶解，至澄清，再与其它组份混合）如果培养基中存在能反应的物质应分别单独灭菌后，使用时按规定的量混合不耐热的物质应单独过滤除菌补齐剩余的水粗调pH（对液体培养基直接调节到规定数值，固体培养基应待加热至琼脂完

3、全溶解时再调一次pH）注意事项实验内容牛肉膏蛋白胨固体培养基：3L 1组牛肉膏蛋白胨固体培养基：1L 2组90ml水/瓶，共6瓶9ml水/支试管，30支高氏一号固体培养基：1.2L 3组葡萄糖蛋白胨水液体培养基：3ml/支试管60支马丁氏固体培养基：1.2L 4组蛋白胨水液体培养基：3ml/支试管，60支淀粉水解固体培养基：1.2L 5组9ml水/支试管，30支P111培养基的分装、包扎培养基的灭菌灭菌的方法干热灭菌：180度23小时（对器皿的灭菌）火焰灼烧：对金属器皿的灭菌间歇灭菌：对不耐热培养基加压灭菌(湿热)：121度30分钟（射线）紫外线杀菌：紫外线照射20分钟以上，对空气杀菌作业1000ml三角瓶三角瓶15ml试管试管 培养基配制的化学药品和琼脂培养基配制的化学药品和琼脂棉花棉花报纸报纸10ml移液管，移液管，100ml量筒，量筒，500ml量筒，量筒，1000ml量筒各量筒各2个个12个培养皿，个培养皿，1ml移液管移液管5根根FeSO4.7H2O 溶液溶液10N NaOH孟加拉红水溶液孟加拉红水溶液，重铬酸钾溶液，重铬酸钾溶液pH试纸试纸，电炉，标签纸，电炉，标签纸，玻棒，铝锅，玻棒，铝锅，天平，天平 材料材料