型溶栓剂纳豆激酶的制备和发展前景.ppt

《型溶栓剂纳豆激酶的制备和发展前景.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《型溶栓剂纳豆激酶的制备和发展前景.ppt（19页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、L/O/G/O 新新 型型 溶溶 栓栓 剂剂 纳豆酶素纳豆酶素成成员员：姚廷燕、魏世：姚廷燕、魏世强强、贾贾俊超、俊超、汶文瑾汶文瑾目录目录纳豆激酶的介绍纳豆激酶的介绍纳豆激酶的反应机理纳豆激酶的反应机理纳豆激酶的生产工艺流程纳豆激酶的生产工艺流程纳豆激酶的发展与展望纳豆激酶的发展与展望 是什么导致了这些疾病是什么导致了这些疾病？血栓血栓血栓是血流在血栓是血流在心血管系统血心血管系统血管内面剥落处管内面剥落处或修补处的表或修补处的表面所形成的小面所形成的小块块。由不溶性由不溶性纤维蛋白纤维蛋白,沉积沉积的血小板的血小板,积聚积聚的白细胞和陷的白细胞和陷入的红细胞组入的红细胞组成。成。目前市面上

2、治疗血栓的药物目前市面上治疗血栓的药物 易导致各种出血，早期表现有瘀斑、紫癜、牙龈出血、伤口出血经久不愈甚至还会导致月经量过多等。出血可发生在任何部位，特别是泌尿和消化道。而且还会出现双侧乳房坏死，微血管病或溶血性贫血以及大范围皮肤坏疽等。半衰期长，给药57日后疗效才可稳定，维持量的足够与否观察57日后方能作定论。新型溶栓剂新型溶栓剂纳豆酶素纳豆酶素美国美国Doctors BestDoctors Best纳豆激酶素食胶囊纳豆激酶素食胶囊 中奇中奇纳豆激酶片纳豆激酶片纳豆酶素与现有溶栓药物相比：纳豆酶素与现有溶栓药物相比：纤溶能力是血纤维纤溶能力是血纤维蛋白溶酶的蛋白溶酶的4倍以上倍以上半衰期则

3、长达半衰期则长达8h不易引起出血不易引起出血对纤维蛋白选择对纤维蛋白选择性低性低半衰期短，只有半衰期短，只有230min易产生全身性出易产生全身性出血的倾向血的倾向作用机理：作用机理：直接溶直接溶栓栓间接溶间接溶栓栓刺激血管内刺激血管内皮产生内源皮产生内源性纤溶酶原性纤溶酶原激活剂激活剂t-PAt-PA激活肾脏激活肾脏产生尿激产生尿激酶原酶原，进，进而激活尿而激活尿激酶激酶溶解纤维蛋白，溶解纤维蛋白，产生小肽、氨产生小肽、氨基酸和尿激酶基酸和尿激酶原原纳豆激酶纳豆激酶再由再由t-PAt-PA将将纤溶酶原激纤溶酶原激活为纤溶酶活为纤溶酶 溶解纤维蛋溶解纤维蛋 白白纳豆激酶的生产基本工艺流程纳豆激

4、酶的生产基本工艺流程灌装种子灌装种子菌种菌种摇瓶种子摇瓶种子12发酵罐发酵罐培养培养43纳豆的激酶粗纳豆的激酶粗品分离与纯化品分离与纯化5菌种的菌种的选选育育采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略，从日本传统食品纳豆中筛选获得高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株。摇摇瓶种子的制瓶种子的制备备3737培养培养18h18h3737、200r/min 200r/min 培养培养12h12h将甘油冻存菌种转将甘油冻存菌种转接至斜面培养基接至斜面培养基接接入入装有装有2mL 2mL 种子培养基的种子培养基的试管试管，放到，放到恒温水浴震荡器恒温水浴震荡器将该种子液将该种子液2mL 2mL 转入装有转入装有100

5、mL 100mL 种子培养基的摇瓶种子培养基的摇瓶3737、200r/min 200r/min 培养培养12h12h灌装种子的制灌装种子的制备备将培养好的摇瓶种子液将培养好的摇瓶种子液将培养好的摇瓶种子液将培养好的摇瓶种子液100mL 100mL 100mL 100mL 在火焰保护在火焰保护在火焰保护在火焰保护下倒入下倒入下倒入下倒入10L 10L 10L 10L 种子罐中种子罐中种子罐中种子罐中，罐中有，罐中有，罐中有，罐中有5L5L5L5L培养液培养液培养液培养液转速转速转速转速260r/min260r/min260r/min260r/min温度温度温度温度37373737空气流量空气流量

6、空气流量空气流量24L/min24L/min24L/min24L/min动态动态动态动态监控监控监控监控发发酵罐培养酵罐培养将培养好的种子液将培养好的种子液5L 5L 经过管道压入到经过管道压入到300L300L罐中，发酵罐中装有罐中，发酵罐中装有200L 200L 发酵培养基发酵培养基。发。发酵酵36h36h。转速转速500r/min500r/min温度温度3737PHPH：7 716 h16 h补料补料纳纳豆激豆激酶酶粗品的分离与粗品的分离与纯纯化化发酵液离心发酵液离心除菌，上清除菌，上清液用液用20206060饱和饱和度的硫酸铵度的硫酸铵分级沉淀分级沉淀所得沉淀所得沉淀用用/L，pH 6

7、.4 的磷酸缓冲的磷酸缓冲液溶解后，液溶解后，进行进行Sephadex G-Sephadex G-75 75 凝胶层析凝胶层析收集的活性收集的活性部分进行部分进行 Sepharose CM Fast Flow 离子离子交换层析，交换层析，采用梯度洗采用梯度洗脱方法进行脱方法进行洗脱洗脱所得的活性回收液中纳豆激酶的纯度很高所得的活性回收液中纳豆激酶的纯度很高纳纳豆激豆激酶酶酶酶粉制粉制备备取纳豆激酶粗品澄清液加入冻力220 的明胶溶液,使得酶液中的终浓度0.5%（W/V）；分装在安培瓶中，在真空冻干机中冻干，随后冻干,即得纳豆激酶的发展与展望纳豆激酶的发展与展望1998年世界上第一代富含纳豆激酶

8、世界上第一代富含纳豆激酶的营养食品由日本生物科学的营养食品由日本生物科学研究所研制成功并生产上市研究所研制成功并生产上市2001年去除了产品中的纳豆臭味去除了产品中的纳豆臭味2006年日本生物科学研究所取得了纳豆激酶的物质与制法的日本生物科学研究所取得了纳豆激酶的物质与制法的日本专利日本专利(第第38814943881494号号)和美国专利和美国专利(US6,703,504)(US6,703,504)1980年从事溶解血栓药物研究工作从事溶解血栓药物研究工作的日本心脑血管专家的日本心脑血管专家须见洋须见洋行行博士博士在著名的两点半实验在著名的两点半实验中发现了纳豆激酶中发现了纳豆激酶2007年

9、取得了纳豆发酵中维生素取得了纳豆发酵中维生素K2K2的回收方法专利的回收方法专利(第第39112823911282号号)现在 已经推出了第三代天然超级纳豆激酶产品已经推出了第三代天然超级纳豆激酶产品目前全球纳豆激酶生产公司分布目前全球纳豆激酶生产公司分布纳豆激酶协纳豆激酶协会会纳豆激酶行业成长空间纳豆激酶行业成长空间其他作用，如治疗高血压，处理皮其他作用，如治疗高血压，处理皮毛、木纤维等毛、木纤维等纳豆激酶的生产工艺还有代优化提纳豆激酶的生产工艺还有代优化提高高血栓患者数量居高不下，纳豆激酶血栓患者数量居高不下，纳豆激酶相对其他药物有良好的效果。相对其他药物有良好的效果。目前纳豆激酶产品的质量参差不齐，目前纳豆激酶产品的质量参差不齐，最终会淘汰一大部分，剩下的才有最终会淘汰一大部分，剩下的才有资格瓜分这个市场资格瓜分这个市场L/O/G/O 3 Q