实验一实验基本知识及溶液的配制.ppt

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1、实验一实验一实验基本知识及缓冲溶液的配制实验基本知识及缓冲溶液的配制v实验目的v了解生化实验室的实验操作规则；v掌握溶液的配制方法一一生化实验室规则生化实验室规则1.每个同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。2.实验前认真预习实验内容，熟悉本次实验的目的，基本原理，操作步骤，懂得每一步操作的意义和了解所用仪器的使用方法，上交预习实验报告，否则不能开始实验。3.实验时要听从指导老师的指导，严格认真地按规程进行实验，并注意与同组同学的配合。4实验数据和现象应随时记录在专用的实验记录本上。实验结束时，实验记录必须送指导老师审阅后方可离开实验室；实验报告应该在下次实验开

2、始前交给辅导老师。5.精心爱护各种仪器。完成实验后应将仪器洗净，试管仪器倒置于实验柜中并排列整齐。如有损坏须说明原因，经指导老师同意后方可补领。6.精密贵重仪器每次使用后应登记姓名并记录使用情况。要随时保持仪器的清洁。如发生故障，应立即停止使用并报告指导老师。7.按需要量取药品及蒸馏水等各种物品，注意节约。8.公用仪器，药品用后放回原处。不得用个人的吸管量取公用药品，多取的药品不得重新倒入原试剂瓶内。公用试剂瓶的瓶塞要随开随盖，不得混淆。9.交指导老师保存的样品，药品及其他物品都应加盖，并标注自己的姓名，班级，日期及内容物。10.保持台面，地面，水槽内及室内整洁，含强酸，碱及有毒废液应倒入废液

3、缸。书包及实验不需之物品放在规定处。11.不得将含易燃溶剂的溶液近火。煤气灯应随用随关，严格做到：人在火在，人走火灭。漏电的设备一律不得使用。离开实验室前应该检查水电煤气是否关严。严禁用口吸或用皮肤接触有毒药品与试剂。二二溶液的配制步骤溶液的配制步骤（一）计算百分比浓度计算：G/V比；V/V比；G/G比。摩尔浓度的计算混合溶液配制的计算 （二）标量 复习电子天平的使用（三）溶解1选择溶剂2只能用烧杯溶解。注意加入溶剂只能加入总体积的2/3左右，剩余溶剂洗涤烧杯三次左右，直到洗涤干净（相似相溶原理）。配制酸碱两性物质（氨基酸，蛋白质，核苷酸等）时，如果溶解性不好，可以用稀酸或稀碱促进溶解，但pH

4、应在被要求的范围内。加热可以促进溶解，但注意应该在配制的范围内。（四）定容1固体：先于小烧杯中加少量溶剂溶解，不溶时可稍加热（前提是溶质耐热），冷却后移到容量瓶中，用玻璃棒引流或用小漏斗，将小烧杯多洗几次。用溶剂加入到将容量瓶2/3时，将容量瓶水平方向摇动几周（勿倒置），使溶液大体混匀。在慢慢加溶剂到标线1cm左右，等1-2分钟，然后用滴官伸入瓶颈接近液面处，眼睛平视标线，加溶剂至液体凹与标线相切，盖瓶塞倒转，使气泡升到顶，将瓶震荡数次，再倒置，重复操作10次以上，才能混合均匀2液体稀释：用移液管移取一定体积的溶液于容量瓶中，再按上法进行。如果稀释时产生热量，可先于小烧杯中加少量溶剂溶解，冷却

5、后移到容量瓶中，再按上法进行。（五）装瓶 用容量瓶定容后，装入试剂瓶，帖上标签。标签应注明以下内容：药品浓度，名称，配制人和日期等。三三缓冲溶液的配制缓冲溶液的配制 1概念概念：由一定物质组成的溶液，在加入一定量的酸或碱时，其氢离子浓度改变甚微或基本不变，此种溶液称为缓冲溶液缓冲溶液；这种作用称为缓冲作用缓冲作用；其溶液内所含物质称为缓冲剂缓冲剂，调节缓冲剂的比例可以配置成各种pH的缓冲液。缓冲剂的组成，多为弱酸及这种弱酸与强碱所组成的盐，或弱碱及这种弱碱与强酸所组成的盐。调节二者的比例可以配制成各种pH的缓冲液。例如：某一缓冲液由弱酸（HA）及其盐(BA)所组成，它的解离方程式如下：HAHA

6、BABA若向缓冲液中加入碱（NaOH）,则HANaOHNaA+H2O弱酸盐若向缓冲液中加入酸（HCl）,则BAHClBClHA弱酸由此可见，向缓冲液中加酸或碱，主要的变化就是溶液内弱酸（HA）的增加或减少。由于弱酸（HA）的解离度很小，所以它的增加或减少对溶液内氢离子浓度改变不大，因而起到缓冲作用。实例：磷酸氢二钠实例：磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液磷酸二氢钠缓冲液 原理原理：加入盐酸溶液，其缓冲作用：NaH2PO4+Na2HPO4+HCl2NaH2PO4+NaCl加入氢氧化钠溶液，其缓冲作用：NaH2PO4+Na2HPO4+NaOH2Na2HPO4+H2O 缓冲溶液：缓冲溶液：磷酸氢二钠-磷酸

7、二氢钠溶液 缓冲剂：缓冲剂：磷酸氢二钠和磷酸二氢钠 2 配制100ml0.2mol/lNa2HPO4溶液，100ml0.2mol/lNaH2PO4溶液和100ml0.2mol/lNa2HPO4-NaH2PO4缓冲液：(1)计算NaH2PO42H2O:156.030.10.2=3.1206(g)Na2HPO412H2O:358.220.10.2=7.1644(g)(2)分别配制0.2mol/lNa2HPO4和0.2mol/lNaH2PO4各100ml，定容于容量瓶之后。注意：在容量瓶上帖标签。(3)按照一定的比例分别量取按照一定的比例分别量取0.2 mol/l Na2HPO4和和0.2 mol/

8、lNaH2PO4溶液，混合溶液，混合后装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：后装入试剂瓶，贴上标签，标签应注明以下内容：pH值，药品浓度，名称，配值，药品浓度，名称，配制人和日期等。制人和日期等。(4)磷酸氢二钠磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/l）的检验：）的检验：取一滴所配置的缓冲溶液于精密取一滴所配置的缓冲溶液于精密pH试纸上，检测其试纸上，检测其pH值。值。v小组一（A):v10%NaOH溶液 500ml;（戴手套）v1%CuSO4溶液 100mlv0.5%甘氨酸溶液 250mlv1mol/l 醋酸溶液 250mlv（醋酸：物质的量浓度）v小组二（B)

9、v醋酸溶液 250mlv3%硝酸银溶液 100mL（戴手套）v5%三氯乙酸溶液 250mLv碳酸钠溶液 250mLv小组三v醋酸溶液 250mlv饱和硫酸铵溶液 250mLv茚三酮水溶液茚三酮水溶液250毫升毫升v酪蛋白的醋酸钠溶液酪蛋白的醋酸钠溶液500毫升；毫升；v(2克酪蛋白，加少量水在研钵里仔细研磨，将所得到的悬浊液移入到克酪蛋白，加少量水在研钵里仔细研磨，将所得到的悬浊液移入到200毫升锥毫升锥形瓶中，加形瓶中，加50的温水洗涤研钵，转入到锥形瓶内。在锥形瓶内加入的温水洗涤研钵，转入到锥形瓶内。在锥形瓶内加入50毫升的毫升的1.0mol/L醋酸钠溶液，并且置于醋酸钠溶液，并且置于50

10、的温水浴，小心晃动锥形瓶，充分溶解。最的温水浴，小心晃动锥形瓶，充分溶解。最好定容到好定容到500毫升。毫升。)v（醋酸：物质的量浓度）v小组四v塞氏试剂 500毫升v克间苯二酚溶解到150毫升浓盐酸，加水定容到500毫升v本尼迪特试剂本尼迪特试剂 500毫升v甲 柠檬酸钠克,碳酸钠50克，加300毫升水中加热溶解，定容到425毫升；v乙 克硫酸铜，溶解到50毫升热水，定容到75毫升；v将乙 缓慢加入到甲中，边加边搅拌，混匀，如果有沉淀，过滤，可以长期保存；v费林试剂费林试剂v甲 克硫酸铜，溶解到250毫升水中毫升水中；v乙 克氢氧化钠，克酒石酸钾钠，溶解到250毫升中毫升中；小组五v莫氏试剂 100毫升v1%葡萄糖溶液 500毫升v1%蔗糖溶液 500毫升v1%淀粉溶液 500毫升