《色谱分析》PPT课件.ppt

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1、色谱分析色谱分析 气相色谱气相色谱 液相色谱液相色谱提纲提纲仪器结构及原理仪器结构及原理载气系统载气系统进样系统进样系统色谱柱色谱柱检测器检测器气相色谱分析流程示意图1 载气钢瓶；2 减压阀；3 干燥管；4 针形阀；5 流量计；6 压力表；7 进样器；9 色谱室；10 检测器；11 记录仪记录系统记录系统利用被测样品（气利用被测样品（气-液和气液和气-固）加热平衡后，取其固）加热平衡后，取其挥发气体部分进入气相色谱仪分析。挥发气体部分进入气相色谱仪分析。静态顶空萃取静态顶空萃取进样方式进样方式 固相微萃取固相微萃取 液体直接进样液体直接进样目前GC的主流主要为开管柱 open tubular

2、column管内壁涂渍固定液，无载体空心管主要特点分离能力强分析时间快柱容量小适用更复杂对象高载气流速进样量小/分流毛细管色谱柱的特点毛细管色谱柱的特点分流比常20:1原因：柱容量小原因：柱容量小分流技术分流技术毛细管柱进样量必须极小（一般液样10-210-3微升，气样约1微升）何时不用分流？建立方法的步骤建立方法的步骤1-1-选择检测器选择检测器热导检测器氢火焰离子检测器电子捕获检测器火焰光度检测器质谱检测器TCD thermal conductivity detectorFPD flame photometric detectorFID hydrogen flame ionization

3、detectorMSD mass spectrum detectorECD electron capture detector商品名:HP-INNOWax聚乙二醇:极性强商品名:HP-1二甲基聚硅氧烷:弱极性乙苯/对/间/邻二甲苯分成4峰乙苯/对间/邻二甲苯只有3峰固定液极性建立方法的步骤建立方法的步骤2-2-固定相的性质固定相的性质 由图可见存在最佳流速（uopt）。实际流速通常稍大于最佳流速，以缩短分析时间。建立方法的步骤建立方法的步骤3-3-载气流速载气流速 准确控制分离需要的准确控制分离需要的准确控制分离需要的准确控制分离需要的温度。当试样复杂时，温度。当试样复杂时，温度。当试样复杂时

4、，温度。当试样复杂时，分离室温度需要按一定分离室温度需要按一定分离室温度需要按一定分离室温度需要按一定程序控制温度变化，各程序控制温度变化，各程序控制温度变化，各程序控制温度变化，各组分在最佳温度下分离；组分在最佳温度下分离；组分在最佳温度下分离；组分在最佳温度下分离；建立方法的步骤建立方法的步骤4-4-温度选择温度选择保证液体试样瞬间气化；保证液体试样瞬间气化；保证液体试样瞬间气化；保证液体试样瞬间气化；保证被分离后的组分通过时不在此冷凝；保证被分离后的组分通过时不在此冷凝；保证被分离后的组分通过时不在此冷凝；保证被分离后的组分通过时不在此冷凝；气化室气化室气化室气化室检测器检测器检测器检测

5、器色谱柱色谱柱色谱柱色谱柱低于固定液使用温度低于固定液使用温度低于组分沸点低于组分沸点能低则低！能低则低！分流比的定义？分流比的定义？问什么要采用分流技术？问什么要采用分流技术？主要影响因素主要影响因素3-3-分流比分流比气相色谱常见问题气相色谱常见问题气相色谱常见问题气相色谱常见问题确定待测样是否符合GC要求沸点低，沸点低，350350o oC,C,易挥易挥发，热稳定发，热稳定浓度尽可能低：小于10ppm待测样不能含有水份(特殊柱：水样)溶剂沸点尽可能低，尽量不选用丙酮实验注意事项实验注意事项柱温要低于固定液使用温度样品必须经过或的滤膜过滤气相色谱气相色谱 提纲提纲液相色谱液相色谱仪器结构仪

6、器结构进样口检测器色谱图色谱柱溶剂泵混合器六通阀与定量环六通阀与定量环 建立液相色谱法的一般步骤建立液相色谱法的一般步骤反相反相HPLC 极性极性:固定相固定相 流动相流动相 固定相固定相-极性强极性强 流动相流动相(己烷己烷,庚烷庚烷)-极性弱极性弱 极性物质后出峰极性物质后出峰正相色谱正相色谱 20%反相色谱反相色谱80%正相色谱正相色谱 20%反相色谱反相色谱80%与固定相与固定相极性相近极性相近tR长长主流建立液相色谱法的步骤建立液相色谱法的步骤1 1类型类型性质性质色谱分离方式色谱分离方式烷基C8非极性反相、离子对烷基C18非极性反相、离子对苯基非极性反相芳硝基弱极性反相或正相氰基极

7、性正相（反相）氨基极性正相（反相、阴离子交换）色谱柱的类型及适用范围色谱柱的类型及适用范围建立液相色谱法的步骤建立液相色谱法的步骤2-2-色谱柱色谱柱甲醇甲醇-水的比例？水的比例？流动相的流速？流动相的流速？建立液相色谱法的步骤建立液相色谱法的步骤3-3-流动相（反相）流动相（反相）液相色谱法的常见问题液相色谱法的常见问题液相色谱法的常见问题液相色谱法的常见问题进样前，必须检测样品进样前，必须检测样品pH值，允许范围值，允许范围27样品必须经过或的样品必须经过或的滤膜过滤滤膜过滤实验注意事项实验注意事项-样品样品进进HPLC的样品需要严格控制样品的浓度范围，防止系统污的样品需要严格控制样品的浓

8、度范围，防止系统污染及平头峰的出现。染及平头峰的出现。实验注意事项实验注意事项-色谱柱色谱柱尽量用自己的色谱柱尽量用自己的色谱柱-防止相互污染防止相互污染 连接色谱柱时，应注意连接方向，防止反接、反冲色谱柱。连接色谱柱时，应注意连接方向，防止反接、反冲色谱柱。每次实验结束时，应使色谱柱内充满纯有机溶剂。每次实验结束时，应使色谱柱内充满纯有机溶剂。实验注意事项实验注意事项-流动相流动相HPLC流动相的所有溶剂至少需经过流动相的所有溶剂至少需经过G4砂芯漏斗的过滤，砂芯漏斗的过滤，且需要超声脱气且需要超声脱气 HPLC流动相的溶剂至少应为流动相的溶剂至少应为HPLC级级/色谱级并与填料相色谱级并与

9、填料相匹配，水应为高纯水（在夏季应每天更换）匹配，水应为高纯水（在夏季应每天更换）严禁长时间以纯水作为流动相严禁长时间以纯水作为流动相 最好用流动相溶样最好用流动相溶样实验注意事项实验注意事项-流动相流动相缓冲液的缓冲液的pH值，在填料的允许范围（一般为值，在填料的允许范围（一般为pH2-8）内）内若需要使用缓冲液，也应控制浓度，一般使用若需要使用缓冲液，也应控制浓度，一般使用0.1%的磷酸或的磷酸或甲酸溶液。甲酸溶液。每次使用缓冲液后，需先使用大量水冲洗管路，再用纯有机每次使用缓冲液后，需先使用大量水冲洗管路，再用纯有机溶剂长时间冲洗管路及色谱柱，以免对系统造成腐蚀。溶剂长时间冲洗管路及色谱柱，以免对系统造成腐蚀。做样前和做样后要记录柱压，确保要基本一致。做样前和做样后要记录柱压，确保要基本一致。今日关键词气相色谱的仪器结构与实验注意事项液相色谱的仪器结构与方法建立总结总结 谢谢各位！