《毒物分析方法概述》PPT课件.ppt

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1、分析方法概述（第一部分）分析方法概述（第一部分）定性分析与定量分析定性分析与定量分析定性分析定性分析目目的的确确定定检检材材是是不不是是某某种种药药毒毒物物，或或确确定定检材中是否含有某种或某几种药毒物。检材中是否含有某种或某几种药毒物。过程过程探查方向探查方向初步判断初步判断确证确证方法要求方法要求灵敏灵敏具有一定的选择性具有一定的选择性定量分析定量分析目目的的确确定定某某种种药药毒毒物物在在检检材材中中的的含含量量和和浓浓度度，或或确确定定某某几几种种药药毒毒物物分分别别在在检检材材中中的的含含量量和浓度。和浓度。需定量的情况需定量的情况医疗中正常用药医疗中正常用药饮食或人体中常有的成分饮

2、食或人体中常有的成分需根据量界定犯罪性质或法律责任的需根据量界定犯罪性质或法律责任的方法要求方法要求灵灵敏敏度度不不一一定定很很高高（能能测测出出即即可可），但但需需具有良好的计量关系。具有良好的计量关系。R/S=f（x）定性与定量的关系定性与定量的关系定性是定量的基础定性是定量的基础界界限限有有些些定定性性方方法法在在定定性性的的同同时时就就有有定定量量关关系系。有有些些定定量量方方法法在在一一定定条条件件下，本身也具有不同程度的定性意义。下，本身也具有不同程度的定性意义。随随着着分分析析科科学学和和技技术术的的迅迅速速发发展展，能能应应用用于于法法医医毒毒物物分分析析并并完完成成毒毒物物的

3、的定定性性鉴鉴别别和和定定量量检检测测任任务务的的分分析析方方法法很很多多，将将主主要要对对以以下下分分析析方方法法，尤尤其其是是仪仪器器分分析析方方法法进进行行重重点介绍。点介绍。分析方法类别分析方法类别方法类别方法类别常用毒物分析方法常用毒物分析方法方法类别方法类别方法原理方法原理方法特点方法特点形态学方法形态学方法利用检材外观形态或显微形态特征进行辨认、利用检材外观形态或显微形态特征进行辨认、比对比对简便、快速，能在一定程简便、快速，能在一定程度上起到筛选和鉴别的作度上起到筛选和鉴别的作用，为侦查或检验提供线用，为侦查或检验提供线索索动物试验法动物试验法利用毒物的毒性及毒理作用机制，通过

4、观察染利用毒物的毒性及毒理作用机制，通过观察染毒试验动物是否死亡或其中毒表现，初步判断毒试验动物是否死亡或其中毒表现，初步判断检材中是否含有剧毒物质或可能含有哪种毒物检材中是否含有剧毒物质或可能含有哪种毒物简便易行，结果直观，可简便易行，结果直观，可初步筛查、判断毒物类别初步筛查、判断毒物类别 免疫分析法免疫分析法利用标记毒物与非标记毒物竞争结合抗体的原利用标记毒物与非标记毒物竞争结合抗体的原理检测毒物理检测毒物操作简便，检测省时，灵操作简便，检测省时，灵敏度高，选择性强，耗材敏度高，选择性强，耗材少，但需专用试剂盒，且少，但需专用试剂盒，且试剂都有一定的时效试剂都有一定的时效理化分析法理化分

5、析法利用毒（药）物的各种理化性质进行鉴别检测，利用毒（药）物的各种理化性质进行鉴别检测，如理化常数的测定，显色反应，沉淀反应等如理化常数的测定，显色反应，沉淀反应等操作简单，对设备要求不操作简单，对设备要求不高，结果直观，但选择性高，结果直观，但选择性差，准确度低，往往用作差，准确度低，往往用作筛查试验或预试验筛查试验或预试验形态学方法形态学方法外观性状鉴别外观性状鉴别通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别形状形状：根、茎、叶、花、果实、种子等：根、茎、叶、花、果实、种子等大小大小：大小、长短、粗细等：大小、长短、粗细等颜色颜色：表面和内部的色泽：表面和内

6、部的色泽表面特征表面特征：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、毛茸等毛茸等质地质地：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉性等：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉性等折断面折断面：平整粗糙、致密疏松、断面纹路及颜色。：平整粗糙、致密疏松、断面纹路及颜色。形态学方法形态学方法显微形态鉴别显微形态鉴别 利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行。含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行。细胞种类细胞种类:纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等。纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞

7、等。后含物后含物:如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。动物试验动物试验(animaltest)大多毒性大，且具大多毒性大，且具有较强的生理活性和特有较强的生理活性和特殊的中毒症状。殊的中毒症状。体外检材充裕、新鲜体外检材充裕、新鲜时，可用动物作急性毒时，可用动物作急性毒性试验或毒效试验，以性试验或毒效试验，以预试是否有剧毒或有某预试是否有剧毒或有某类毒物存在。类毒物存在。青蛙毒性试验青蛙毒性试验 动物试验动物试验(animaltest)免疫分析法免疫分析法机理：抗原抗体特异性结合方法机理：抗原抗体特异性结合方法酶免疫法（酶免疫法（enzyme

8、 immunoassay,EIA)enzyme immunoassay,EIA)放射免疫法（放射免疫法（radio immunoassay,RIA)radio immunoassay,RIA)荧光免疫法（荧光免疫法（luoro immunoassay,FIA)luoro immunoassay,FIA)薄层免疫法（薄层免疫法（thinlayer immunoassay,TIA)thinlayer immunoassay,TIA)特点：简便、快速、灵敏，种类有限，试剂较贵。特点：简便、快速、灵敏，种类有限，试剂较贵。应用应用 ：吸毒者和运动员尿液中毒品或兴奋剂的筛查。：吸毒者和运动员尿液中毒品或

9、兴奋剂的筛查。尿样滴入尿样滴入S S孔内，孔内，样品在毛细效应作用下样品在毛细效应作用下向前迁移。尿样中无吗向前迁移。尿样中无吗啡存在或吗啡浓度低于啡存在或吗啡浓度低于阈值浓度时，因胶体金阈值浓度时，因胶体金抗体全部或部分与被固抗体全部或部分与被固定在板上的吗啡偶联物定在板上的吗啡偶联物结合，使测试区（结合，使测试区（T T）内）内出现一条紫红色的条带。出现一条紫红色的条带。当吗啡高于阈值浓度时，当吗啡高于阈值浓度时，胶体金抗体全部与样品胶体金抗体全部与样品中的吗啡结合，未与吗中的吗啡结合，未与吗啡偶联物结合，因此，啡偶联物结合，因此，在测试区不出现紫红色在测试区不出现紫红色条带。质控区未出现

10、红条带。质控区未出现红色线条，说明操作有误色线条，说明操作有误或试剂盒失效，结果无或试剂盒失效，结果无效。尿样中吗啡检测阈效。尿样中吗啡检测阈值浓度为值浓度为300ng/ml300ng/ml。测试区（T）吗啡偶联物和被胶体金标记的抗吗啡单克隆抗体质控区（C）加样孔（S）颜色和沉淀反应颜色和沉淀反应机理机理 大多为生物碱，能大多为生物碱，能与具有氧化性质的与具有氧化性质的酸性试剂反应生成酸性试剂反应生成有色物质；或与某有色物质；或与某些试剂生成沉淀，些试剂生成沉淀，甚至特殊晶体。甚至特殊晶体。方法方法 颜色反应颜色反应:点滴板点滴板 沉淀或结晶反应：沉淀或结晶反应：载玻片载玻片 显微镜显微镜选用

11、原则选用原则 选择性和实用性选择性和实用性鸦片生物碱的颜色和结晶反应鸦片生物碱的颜色和结晶反应吗啡吗啡 碘碘化镉钾碘碘化镉钾 马尾松状结晶马尾松状结晶用于可疑毒品的预试。用于可疑毒品的预试。理化方法理化方法常用毒物分析方法常用毒物分析方法方法类别方法类别方法原理方法原理方法特点方法特点仪器分析法仪器分析法主要包括利用毒物光学性质的光谱分析法主要包括利用毒物光学性质的光谱分析法（spectralanalysis）利用毒物色谱行为差别的色谱分析法利用毒物色谱行为差别的色谱分析法（chromatography）根据物质分子量、断裂碎片质量大小及结构特征根据物质分子量、断裂碎片质量大小及结构特征信息的

12、质谱分析法信息的质谱分析法（massspectrographicanalysis）常用的有紫外分光光度法常用的有紫外分光光度法（ultravioletspectrophotometry）原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法（atomicabsorptionspectrophotometry）气相色谱法气相色谱法（gaschromatography）高效液相色谱法高效液相色谱法（highperformancechromatography）薄层色谱法（薄层色谱法（thinlayerchromatography）毛细管电泳法（毛细管电泳法（capillaryelectrophoresis）各类质谱法

13、及多级色质联用法各类质谱法及多级色质联用法灵敏，准确，自动化程度灵敏，准确，自动化程度高，适用范围广，但仪器高，适用范围广，但仪器设备昂贵，对使用人员要设备昂贵，对使用人员要求较高，可因使用不当或求较高，可因使用不当或仪器失准而得出错误结果仪器失准而得出错误结果紫外分光光度法紫外分光光度法（ultravioletspectrophotometry）荧光分光光度法荧光分光光度法（fluorescencespectrophotometry）红外分光光度法红外分光光度法（infraredspectrophotometry）原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法（atomicabsorptionspec

14、trophotometry）成分大多结构复杂，一般具有紫外成分大多结构复杂，一般具有紫外吸收或荧光。吸收或荧光。现场收缴纯品药物制剂或较纯的毒现场收缴纯品药物制剂或较纯的毒品可直接用光谱法检验。品可直接用光谱法检验。植物、掺假毒品、生物检材，因成植物、掺假毒品、生物检材，因成分复杂，一般需与色谱联用。分复杂，一般需与色谱联用。母体结构母体结构成酯结构成酯结构药物名称药物名称特征吸收特征吸收古柯碱古柯碱优卡因优卡因max=234nmmin=275nm异戊卡因异戊卡因光光谱谱法法咖啡因的紫外光谱图咖啡因的紫外光谱图气相色谱法气相色谱法（gaschromatographyGC）高效液相色谱法高效液相

15、色谱法（highperformancechromatographyHPLC）薄层色谱法薄层色谱法（thinlayerchromatographyTLC）毛细管电泳法毛细管电泳法（capillaryelectrophoresisCE）色色谱谱法法Diagram of ChromatographA：全谱扫描方式总离子流图：全谱扫描方式总离子流图；B：毒鼠强的质量碎片图；：毒鼠强的质量碎片图；根据物质分根据物质分子量、断裂子量、断裂碎片质量大碎片质量大小及结构特小及结构特征信息的质征信息的质谱分析法。谱分析法。各类质谱法各类质谱法及多级色质及多级色质联用法联用法质谱分析法质谱分析法（massspec

16、trometryMS）Mass Spectrometry:Mass Spectrometry:A Tool with Increasing Analytical PotentialsA Tool with Increasing Analytical PotentialsSampleIntroductionIonSourceMassAnalyzer+SampleIntroduction:GasPhase(GC)LiquidPhase(LC)SolidIonSource:EICIESIFABSIMSAPCIMALDIAnalyzers:QuadrupolesSectorsIonTrapFTMSTO

17、F海洛因海洛因O3-单乙酰吗啡单乙酰吗啡O6-单乙酰吗单乙酰吗啡啡乙酰可待因乙酰可待因海洛因及其相关药物质谱图海洛因及其相关药物质谱图各类分析方法的效用各类分析方法的效用上上述述各各类类分分析析方方法法由由于于所所依依据据的的原原理理不不同同，实实行行的的操操作作方方法法不不同同，以以及及应应用用的的场场合合不不同同，不不同同的的作作用用和和效效果果。主主要要有有以下两类效用。以下两类效用。毒物分析可靠性控制毒物分析可靠性控制事事先先熟熟练练地地掌掌握握检检测测方方法法。应应该该对对所所用用检检测测方方法法的的适适用用场场合合、操操作作中中的的细细节节、正正常常与与不不正正常常现现象象的的辨辨

18、认认和和处处理理、结结果果正正确确性性的的辨辨析析等等方方面面，都都有有充充分分把把握握。这这就就必必须须有有一一些些措措施施能能保保证证所所做做分分析析工工作的可靠性作的可靠性检检验验工工作作不不应应临临时时照照搬搬书书籍籍刊刊物物上上记记载载的的方方法法，因因为为其其中中有有些些方方法法并并不不切切合合实实用用。而而对对其其中中可可适适用用于于实实际际工工作作的的方方法法，若若没没有有亲亲身身体体验验也也是是难难以以把把握握的的。在在建建立立一一种种新新的的分分析析方方法法时时，尤尤其其应应该该对对方方法的效能进行验证。法的效能进行验证。另另外外法法医医毒毒物物分分析析工工作作中中涉涉及及

19、的的一一些些组组成成复复杂杂检检材材中中的的毒毒物物，常常需需经经分分离离净净化化等等处处理理，容容易易使使分分析析结结果果产产生生较较大大误误差差，所所以以验验证证其其可可靠靠性性尤尤为为必必要要。方方法法认认证证有其具体的内容和实施办法。有其具体的内容和实施办法。作作为为提提供供科科学学证证据据的的法法医医毒毒物物分分析析的的检检验验结结果果和和鉴鉴定定结结论论，必必须须保保证证其其科科学学性性、公公证证性性和和权权威威性性。除除了了需需对对分分析析方方法法进进行行认认证证而而外外，还还需需实实施施毒毒物物分分析析实实验验室室的规范化管理和质量控制建设。的规范化管理和质量控制建设。认证分析

20、方法的主要项目认证分析方法的主要项目法医毒物分析对方法的要求主要是准确法医毒物分析对方法的要求主要是准确和灵敏。对于组分复杂的检材，首先要和灵敏。对于组分复杂的检材，首先要求有良好的分离净化效能。（下一学时）求有良好的分离净化效能。（下一学时）法法医医毒毒物物分分析析工工作作所所出出具具的的检检验验结结果果或或鉴鉴定定结结论论必必须须科科学学、公公正正和和权权威威。而而鉴鉴定定工工作作涉涉及及的的检检材材复复杂杂，且且待待检检物物未未知知，含含量量低低微微，所所以以分分析析质质量量控控制制尤尤为为重重要要。除除了了对对分分析析方方法法进进行行认认证证而而外外，对对毒毒物物分分析析实实验验室室的

21、的规规范范化化建建设设，建建立立有有效效的的技技术术和和质质量量管管理理体体系系也非常重要。也非常重要。毒物分析实验室规范管理毒物分析实验室规范管理和分析质量控制基本框架和分析质量控制基本框架认证分析方法的主要项目认证分析方法的主要项目纯度和收得率纯度和收得率 方法的准确性方法的准确性分析方法的灵敏性分析方法的灵敏性线性与检测范围线性与检测范围专属性专属性耐用性耐用性论证的实施方法论证的实施方法模拟试验模拟试验 空白试验空白试验 已知对照试验已知对照试验 随行参比法随行参比法国国际际标标准准化化组组织织（internationalstandardorganization，ISO）对对行行业业实

22、实验验室室有有国国际际化化的的认认可可准准则则。1991年年法法庭庭毒毒物物学学协协会会（society of forensic toxicology，SOFT）和和美美国国法法庭庭科科学学协协会会（Americanassociationofforensicscience,AAFS）曾曾共共同同发发布布了了法法庭庭毒毒物物学学实实 验验 室室 准准 则则 （forensic toxicology laboratoryguidelines），2002年年又又在在该该准准则则基基础础上上进进行行了了修修改改和和完完善善，为为毒毒物物分分析析实实验验室室的的规规范范化化提提供供了了技技术术和和管管理

23、要求。理要求。毒物分析实验室规范管理毒物分析实验室规范管理和分析质量控制基本框架和分析质量控制基本框架 质质量量控控制制应应贯贯穿穿毒毒物物分分析析实实验验室室接接受受和和实实施施毒毒物物检检测测的的各各个个环环节节，主主要要包包括括人人员员综综合合素素质质，环环境境设设施施条条件件，仪仪器器设设备备验验收收、使使用用、保保管管、降降级级及及报报废废制制度度，合合格格的的实实验验动动物物，合合格格的的标标准准对对照照品品、基基 准准 物物 质质，标标 准准 操操 作作 步步 骤骤（standard standard operating operating proceduresprocedures，SOPSOP），检检材材的的采采集集及及保保护护链链，分分析析步步骤骤，报报告告结结果果和和资资料料归归档档等等内内容容。最最终终的的检检验验报报告告和和鉴鉴定定结结果果应应有有行行业业质质量量控控制制专专职人员进行质量分析和核查。职人员进行质量分析和核查。毒物分析实验室规范管理毒物分析实验室规范管理和分析质量控制基本框架和分析质量控制基本框架