《细菌细胞结构》PPT课件.ppt
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1、六、细菌细胞结构六、细菌细胞结构一般构造一般构造:如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质:如细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体、核糖体等,是所有细菌都有的构造体、核糖体等,是所有细菌都有的构造特殊构造特殊构造:主要有鞭毛、菌毛、性菌毛、荚膜:主要有鞭毛、菌毛、性菌毛、荚膜和芽孢等,并非所有细菌都有的构造和芽孢等,并非所有细菌都有的构造Schematic diagram of a typical procaryotic cell.Minimally,a procaryote is composed of a cell wall and plasma membrane that surrounds its c
2、ytoplasm containing a chromosome,ribosomes,enzymes,several classes of RNA,and small molecules(precursors).(一)细胞壁(一)细胞壁cell cell wall:wall:细胞壁的观察方法:细胞壁的观察方法:质壁分离染色质壁分离染色 电镜观察电镜观察G G与与G G-细菌细菌cwcw的模式结构的模式结构共有组分共有组分肽聚糖肽聚糖特有组分特有组分GG磷壁酸磷壁酸 G G脂多糖脂多糖细胞壁是位于菌体的外层,细胞壁是位于菌体的外层,内侧紧贴细胞膜的一层无色内侧紧贴细胞膜的一层无色透明,坚韧而有弹
3、性的结构。透明,坚韧而有弹性的结构。细胞壁约占细胞干重的细胞壁约占细胞干重的10%-10%-25%25%。Electron micrograph of a G+cell wall.Electron micrograph of a G-cell wall.细胞壁细胞壁cell wall:Gram PositiveGram Negative概念:肽聚糖是由概念:肽聚糖是由N-N-乙酰胞乙酰胞壁酸(壁酸(NAMNAM)和)和N-N-乙酰葡糖乙酰葡糖胺(胺(NAGNAG)以及短肽链(主)以及短肽链(主要是四肽)组成的亚单位聚要是四肽)组成的亚单位聚合而成的大分子聚合物。合而成的大分子聚合物。(1)CW
4、(1)CW的基本骨架的基本骨架肽聚糖肽聚糖(共有成分共有成分)肽聚糖网格状结构G+菌肽聚糖单体A comparison of L and D amino acids.Note that while the structure is identical,it is impossible to superimpose them.NAGNAG与与NAMNAM残基以残基以-1,4-1,4糖苷键交替连接,形成聚糖苷键交替连接,形成聚糖的骨架糖的骨架(主链主链);一组相同的短肽侧链接于;一组相同的短肽侧链接于NAMNAM上;上;相连主链上的短肽侧链通过一条肽桥、或直接相连,相连主链上的短肽侧链通过一条肽桥
5、、或直接相连,从而形成网状分子结构。从而形成网状分子结构。肽聚糖单体肽聚糖单体网状结构网状结构G+菌肽聚糖单体G菌肽聚糖单体Schematic diagram of the peptidoglycan sheet of Staphylococcus aureus.G=N-acetyl-glucosamine;M=N-acetyl-muramic acid;L-ala=L-alanine;D-ala=D-alanine;D-glu=D-glutamic acid;L-lys=L-lysine.This is one type of murein found in Gram-positive ba
6、cteria.Compared to the E.coli peptidoglycan there is L-lys in place of DAP(diaminopimelic acid)in the tetrapeptide.The free amino group of L-lys is substituted with a glycine pentapeptide(gly-gly-gly-gly-gly-)which then becomes an interpeptide bridge forming a link with a carboxy group from D-ala in
7、 an adjacent tetrapeptide side chain.Gram-positive peptidoglycans differ from species to species,mainly in regards to the amino acids in the third position of the tetrapeptide side chain and in the amino acid composition of the interpeptide bridge.肽聚糖的特点肽聚糖的特点:1)1)为原核生物所特有为原核生物所特有(古细菌例外古细菌例外)2)D-2)D
8、-型氨基酸和型氨基酸和DAPDAP在真核细胞中未发现在真核细胞中未发现 3)3)个别菌中个别菌中DAPDAP(二氨基庚二酸)可为(二氨基庚二酸)可为Lys Lys 代替代替 革兰氏阳性细菌与阴性细菌肽桥的类型革兰氏阳性细菌与阴性细菌肽桥的类型注:第四型肽桥为Corynebacterium poinsettiae(猩猩木棒杆菌)所特有(2)G(2)G+菌的细胞壁菌的细胞壁细胞壁厚度细胞壁厚度 较厚,较厚,20-30nm20-30nm细胞壁分层细胞壁分层 不分层不分层肽聚糖含量肽聚糖含量 含量高含量高(30-70)(30-70)肽聚糖层数肽聚糖层数 层数多层数多交联度交联度 交联度高交联度高磷壁酸
9、磷壁酸 有有脂多糖脂多糖 无无DAP DAP 无无肽聚糖肽聚糖(peptidoglycan)磷壁酸磷壁酸(teichoic acid)磷壁酸磷壁酸teichoic acid(垣酸垣酸)占壁干重占壁干重40-50%40-50%。是以。是以磷酸多元醇磷酸多元醇分子的重复结构单位为主分子的重复结构单位为主链(骨架)的阴离子多聚物。在多数情况下,磷壁酸分子中的链(骨架)的阴离子多聚物。在多数情况下,磷壁酸分子中的磷酸多元醇是磷酸甘油,或磷酸核糖醇,因此,磷酸多元醇是磷酸甘油,或磷酸核糖醇,因此,根据主链组成根据主链组成不同不同可以将磷壁酸分为两大类:可以将磷壁酸分为两大类:磷酸甘油型磷壁酸磷酸甘油型磷
10、壁酸核糖醇型磷壁酸核糖醇型磷壁酸磷酸甘油型磷壁酸磷酸甘油型磷壁酸根据结合部位的不同分为:根据结合部位的不同分为:壁磷壁酸壁磷壁酸:含量多,通过共价键与肽聚糖分子结含量多,通过共价键与肽聚糖分子结合合,并延伸到肽聚糖分子表面并延伸到肽聚糖分子表面,带有负电荷。带有负电荷。膜磷壁酸膜磷壁酸:与菌细胞原生质膜的脂类结合。与菌细胞原生质膜的脂类结合。磷壁酸的功能协助肽聚糖加固细胞壁;协助肽聚糖加固细胞壁;增强细胞膜的稳定性;增强细胞膜的稳定性;提高膜结合酶的能力提高膜结合酶的能力(使细胞壁形成负电荷环使细胞壁形成负电荷环 境境,以利于吸附镁离子以利于吸附镁离子,维持酶活维持酶活)构成噬菌体的吸附位点构
11、成噬菌体的吸附位点;形成表面形成表面抗原决定簇抗原决定簇的主要成分。的主要成分。保证某些革兰氏阳性致病菌与其保证某些革兰氏阳性致病菌与其宿宿主间的粘主间的粘连连,如双歧杆菌可通过如双歧杆菌可通过磷壁酸磷壁酸与肠上皮细胞表面与肠上皮细胞表面受体结合等。受体结合等。(3)G的细胞壁细胞壁厚度细胞壁厚度 较薄较薄10-15nm10-15nm细胞壁分层细胞壁分层 分层:分层:外壁层外壁层 6-10nm 6-10nm 内壁层内壁层2-3nm2-3nm肽聚糖含量肽聚糖含量 只占组分的只占组分的5-10%5-10%肽聚糖层数肽聚糖层数 低,一般低,一般1-21-2层层肽聚糖交联度肽聚糖交联度 较低较低磷壁酸
12、磷壁酸 少少(在外膜层在外膜层,5)脂多糖脂多糖 无无 抗原决定因子抗原决定因子 O-O-抗原抗原 蛋白质蛋白质Muramic acid subunit of the peptidoglycan of Escherichia.coli.This is the type of peptidoglycan found in most Gram-negative bacteria.The glycan backbone is a repeat polymer of two amino sugars,N-acetylglucosamine(GlNAc)and N-acetylmuramic acid(
13、MurNAc).Attached to the MurNAc is a tetrapeptide consisting of L-ala-D-glu-DAP-D-ala.In the polymeric form of the molecule,nearby tetrapeptide side chains may be linked to one another by an interpeptide bond between DAP on one chain and D-ala on the other.Schematic illustration of the outer membrane
14、,cell wall and plasma membrane of a Gram-negative bacterium.Note the structure and arrangement of molecules that constitute the outer membrane.脂多糖(LPS,lipopolysaccharide):LPSLPS分子一般都是由三部分(区段)组成分子一般都是由三部分(区段)组成G G-菌菌的的脂脂多多糖糖具具毒毒性性,且且与与细细菌菌表表面面紧紧密密结结合合,仅仅在在菌菌体裂解时才被释放出来,故称为体裂解时才被释放出来,故称为内毒素(内毒素(endotox
15、in)。脂质脂质A A:为一为一种糖磷脂,由种糖磷脂,由N-N-乙酰匍糖胺乙酰匍糖胺双糖、磷酸与双糖、磷酸与多种长链脂肪多种长链脂肪酸组成,它是酸组成,它是细菌细菌内毒素的内毒素的主要成分主要成分。核核心心多多糖糖:由由2-2-酮酮-3-3-脱脱氧氧辛辛糖糖酸酸(KDO)KDO)、L-L-甘甘油油-D-D-甘甘露露庚庚糖糖、半半乳乳糖糖及及匍匍糖糖胺胺这这样样一一组组糖糖类类组组成成。它它一一边边通通过过KDOKDO残残基基连连接接在在脂脂类类A A上上,另另一一边边通通过过葡葡萄萄糖糖残残基基与与O-O-侧链相连。侧链相连。O-O-侧链:侧链:是由多糖组成是由多糖组成的重复单位,位于菌体的重
16、复单位,位于菌体的外表面,又称菌体抗的外表面,又称菌体抗原。原。由于各种由于各种G G-菌多糖菌多糖链的种类、排列顺序和链的种类、排列顺序和空间构型都不同空间构型都不同,造成,造成G G-菌的菌的O-O-抗原有不同的抗原有不同的特异性。特异性。注:注:Gal:galactose,半乳糖;Gln:N-acetylglucosamine;Rha:Rhamnose,鼠李糖;Abe:abequosea阿比可糖;Man:mannoheptose 甘露庚糖 LPSLPS层的主要功能层的主要功能构成某些革兰氏阴性细菌致病物质构成某些革兰氏阴性细菌致病物质内内毒素的物质基础;毒素的物质基础;起细菌自我保护作用
17、,它可以阻止溶菌起细菌自我保护作用,它可以阻止溶菌酶、抗生素和染料等侵入菌体,也可以阻酶、抗生素和染料等侵入菌体,也可以阻止周质空间中的酶外漏;止周质空间中的酶外漏;作为重要的抗原因子决定了革兰氏阴性作为重要的抗原因子决定了革兰氏阴性菌抗原的多样性;菌抗原的多样性;是许多噬菌体吸附的受体。是许多噬菌体吸附的受体。成分成分 占细胞壁干重的占细胞壁干重的%革兰氏阳性细菌革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌革兰氏阴性细菌肽聚糖肽聚糖磷壁酸磷壁酸类脂质类脂质蛋白质蛋白质含量很高含量很高(30(3095)95)含量较高含量较高(50)(50)一般无一般无(2)(2)无无含量很低含量很低(5(520)20)少少(
18、在外膜层在外膜层,5 5)含量较高含量较高(20)20)含量较高含量较高(4)(4)革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁细胞壁成分比较成分比较Correlation of Grams stain with other properties of Bacteria 功能与真细菌相似功能与真细菌相似 ,但不含真正的肽聚糖,而,但不含真正的肽聚糖,而含假肽聚糖、糖蛋白或蛋白质。含假肽聚糖、糖蛋白或蛋白质。假肽聚糖:假肽聚糖:由由N-N-乙酰葡萄糖胺和乙酰葡萄糖胺和N-N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸通过乙酰塔罗糖胺糖醛酸通过-1-1,3 3糖苷键交替连接而成。糖苷键交替连接而成。
19、肽尾:肽尾:由由L-GluL-Glu、L-AlaL-Ala和和L-Lys3L-Lys3个个L L型氨基酸组成。型氨基酸组成。肽桥:肽桥:由由L-Glu 1L-Glu 1个氨基酸组成。个氨基酸组成。古生菌细胞壁古生菌细胞壁(5)(5)细胞壁的功能细胞壁的功能:1 1、决定了、决定了革兰氏染色革兰氏染色的性质;的性质;2 2、决定细菌的基本形态;、决定细菌的基本形态;3 3、决定细胞的抗膨压(保护细胞免受渗透、决定细胞的抗膨压(保护细胞免受渗透压变化的破坏)压变化的破坏)4 4、决定对、决定对溶菌酶溶菌酶的敏感性;的敏感性;5 5、决定了对、决定了对青霉素青霉素的抗性;的抗性;6 6、为鞭毛运动提
20、供支点;、为鞭毛运动提供支点;7 7、决定细胞的抗原性;、决定细胞的抗原性;8 8、决定细菌的毒性(致病性)、决定细菌的毒性(致病性)革兰氏染色步骤及原理:革兰氏染色步骤及原理:第一步:第一步:结晶紫使菌体着上紫色结晶紫使菌体着上紫色第二步:第二步:碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物,分子大,能被细胞壁阻留在细胞内。物,分子大,能被细胞壁阻留在细胞内。第三步:第三步:酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,酒精脱色,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应。出现不同的反应。第四步:第四步:沙黄复染,增加脱色菌与背景的反沙黄复染,增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌。差并区别于
21、未脱色菌。G G菌菌:细胞壁厚,肽聚糖网细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫碘复合物在细胞膜上。呈紫色。色。G G-菌:菌:肽聚糖层薄,交联松肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高收缩,其脂含量高,乙醇将脂乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫溶解,缝隙加大,结晶紫-碘碘复合物溶出细胞壁,沙黄复复合物溶出细胞壁,沙黄复染后呈红色。染后呈红色。溶菌酶对细胞壁的作用溶菌酶对细胞壁的作用可切断可切断NAMNAM和和
22、NAGNAG之间的之间的-1-1,4 4糖苷糖苷键,引起细菌裂解键,引起细菌裂解 对对GG菌,在菌,在EDTAEDTA存在下,受溶菌酶存在下,受溶菌酶作用。作用。溶菌酶处理后的溶菌酶处理后的菌细胞应保存在弱菌细胞应保存在弱高渗()蔗糖液中。高渗()蔗糖液中。在在EDTAEDTA存在下,对存在下,对GG菌受溶菌酶作用的菌受溶菌酶作用的原因:原因:G G菌含有较多的菌含有较多的LPSLPS,LPSLPS具有阻拦溶菌酶、具有阻拦溶菌酶、抗生素、去污剂合某些染料等较大分子进入细抗生素、去污剂合某些染料等较大分子进入细胞。要维持胞。要维持LPSLPS结构的稳定性,必须有足够的结构的稳定性,必须有足够的C
23、aCa2 2存在。如果用存在。如果用EDTAEDTA等螯合剂驱除等螯合剂驱除CaCa2 2合降低合降低离子键强度,可使离子键强度,可使LPSLPS解体,这时,内层的肽聚解体,这时,内层的肽聚糖分子就会暴露出来,因而容易被溶菌酶水解。糖分子就会暴露出来,因而容易被溶菌酶水解。青霉素对细菌细胞壁的作用青霉素对细菌细胞壁的作用 Penicillium与转肽酶结合,而使该酶失活,抑制了侧与转肽酶结合,而使该酶失活,抑制了侧链末端的丙氨酸与五肽桥的连接,破坏了细菌细胞壁的链末端的丙氨酸与五肽桥的连接,破坏了细菌细胞壁的完整性,因此,完整性,因此,Penicillium仅对正在生长着的细菌仅对正在生长着的
24、细菌,且主且主要是对要是对G G+菌菌有效有效。(6)(6)周质空间周质空间(periplasmic space)又称壁膜空间。指位于细胞壁与细胞膜之间的又称壁膜空间。指位于细胞壁与细胞膜之间的狭窄间隙,革兰氏阳性细菌与阴性细菌均有。狭窄间隙,革兰氏阳性细菌与阴性细菌均有。内中含有多种蛋白质,例如蛋白酶、核酸酶等内中含有多种蛋白质,例如蛋白酶、核酸酶等各种解聚酶,运送某些物质进入细胞的结合蛋各种解聚酶,运送某些物质进入细胞的结合蛋白,以及受体蛋白等。白,以及受体蛋白等。Representative periplasmic proteins in E.coli.Binding proteins
25、For amino acids(e.g.histadine,arginine)For sugars(e.g.glucose,maltose)For vitamins(e.g.thiamine,vitamin B12)For ions(e.g.phosphate,sulfate)Biosynthetic enzymes For murein assembly(e.g.transglycosylases,carboxypeptidases,transpeptidases)Degradative enzymes phosphatases proteases Detoxifying enzymes B
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