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1、第第11 11讲讲 免疫学检测技术免疫学检测技术 的基本原理的基本原理免疫学检测方法:免疫学检测方法:依据依据免疫学理论免疫学理论设计的设计的测定测定抗原、抗体、免疫细胞及细胞因子抗原、抗体、免疫细胞及细胞因子的的实验方法实验方法。一、基本原理一、基本原理抗原与相应抗体特异性结合,抗原与相应抗体特异性结合,并呈现某种反应现象,如凝集并呈现某种反应现象,如凝集或沉淀,以此检测抗原或抗体。或沉淀,以此检测抗原或抗体。抗原抗体反应的特点抗原抗体反应的特点 1.抗原抗体结合的特异性 抗原抗体结合除抗原抗体结合除空间构型空间构型互补外,还以互补外,还以氢键氢键、静电引力静电引力、范、范德华力德华力和和疏
2、水键疏水键等非共价方式等非共价方式结合,结合,一定条件下一定条件下复合物可复合物可解离解离成游离状态,成游离状态,且仍且仍保持原有性质保持原有性质。2.抗原抗体结合的可逆性 复合物复合物解离度解离度主要取决于特异性抗体主要取决于特异性抗体超变区超变区与相应与相应抗原表位抗原表位三维空间构型的三维空间构型的互补程度互补程度,互补程度越高,分子间距越小,作用力越大,互补程度越高,分子间距越小,作用力越大,两者结合越牢固,不易解离;反之,则容易两者结合越牢固,不易解离;反之,则容易发生解离。发生解离。3.抗原抗体结合的比例与浓度 抗原与抗体结合抗原与抗体结合比例合适比例合适,则可形成,则可形成肉眼可
3、见的肉眼可见的大结合物大结合物;反之形成肉眼;反之形成肉眼不可见不可见的的小结合物。小结合物。4.抗原抗体反应的阶段性 第二阶段:第二阶段:可见反应阶段。可见反应阶段。数分钟、数小时至数日,因素影响多。数分钟、数小时至数日,因素影响多。第一阶段:第一阶段:特异结合阶段。特异结合阶段。仅几秒到几分钟、尚无可见反应;仅几秒到几分钟、尚无可见反应;抗原抗体反应的主要影响因素抗原抗体反应的主要影响因素1.1.抗原和抗体浓度、比例抗原和抗体浓度、比例2.2.电解质电解质3.3.温度温度 4.4.酸碱度酸碱度二、血清学反应的种类二、血清学反应的种类 1.1.凝集反应凝集反应细菌、细胞等颗粒性抗原与相应的抗
4、体,或表面包被抗原的颗粒状物质与相应的抗体在电解质存在的条件下结合,出现肉眼可见的凝集团现象。2.2.沉淀反应沉淀反应毒素、组织浸液以及血清中的蛋白等可溶性抗原与相应抗体反应后,出现肉眼可见的沉淀物。3.3.免疫标记技术免疫标记技术用酶、荧光素、同位素等物质标记抗体或抗原进行抗原抗体反应,检测抗原或抗体的技术。如免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫测定。第一抗体第一抗体第一抗体第一抗体抗原抗原抗原抗原第一抗体第一抗体第一抗体第一抗体抗原抗原抗原抗原第二抗体第二抗体第二抗体第二抗体生物酶生物酶生物酶生物酶第一抗体第一抗体第一抗体第一抗体抗抗抗抗原原原原-第二抗体第二抗体第二抗体第二抗体显色显色免疫
5、细胞的检测:免疫细胞的检测:检测检测T T细胞、细胞、B B细胞和吞噬细胞等。细胞和吞噬细胞等。第第12 12讲讲 免疫学防治免疫学防治 这部分是这部分是“国防建设国防建设”。免疫学防治:应用免疫学理论预防和治疗疾病,包括免疫预防和免疫治疗。一、免疫预防一、免疫预防1.1.疫苗疫苗基本要求:安全、有效、实用基本要求:安全、有效、实用疫苗应用:抗感染、抗肿瘤、计划生育疫苗应用:抗感染、抗肿瘤、计划生育 防止免疫病理损伤防止免疫病理损伤死疫苗与活疫苗细菌外毒素经0.3-0.4%甲醛处理,使其毒性减弱而保留其免疫原性。亚单位疫苗。亚单位疫苗。合成肽疫苗合成肽疫苗 基因工程疫苗基因工程疫苗类毒素(Toxid)新型疫苗人工主动免疫人工主动免疫:给机体接种:给机体接种抗原性抗原性物质物质如疫苗,类毒素等,刺激如疫苗,类毒素等,刺激机体机体免疫系统免疫系统产生特异性免疫力产生特异性免疫力的方法。的方法。2.2.人工主动免疫和人工被动免疫人工主动免疫和人工被动免疫人工被动免疫人工被动免疫:给人体注射含特异:给人体注射含特异性性抗体抗体的免疫血清或的免疫血清或细胞因子细胞因子等制等制剂,使剂,使受者迅速受者迅速获得获得特异性免疫力特异性免疫力的方法。的方法。3.3.计划免疫计划免疫
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