《HIV检测技术》PPT课件.ppt

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1、HIV检测技术检测技术艾滋病实验诊断技术艾滋病实验诊断技术n n HIV抗体测定n n 抗原测定n n 核酸测定n n 病毒分离n n CD4淋巴细胞计数急性期急性期潜伏期潜伏期窗口期窗口期HIV感染以后的血清学动态感染以后的血清学动态Anti-P24Anti-gp41/120(anti-gp36)HIV RNAAnti-Ag感染感染 1周周 2周周 3周周 4周周.1年年 2年年 3年年.10年年.艾滋病期艾滋病期Anti-Ab浓浓度度 HIV抗体检测的目的和要点n n HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等。n n以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况，包括临床检测、自愿咨询检

2、测、根据特殊需要进行的体检等。n n以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV，包括献血员筛查和原料血浆筛查。n n以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。初筛实验室设备条件n独立实验室用房，建筑设备和仪器建筑设备和仪器要符合要求要符合要求II级生物安全实验室级生物安全实验室n酶标仪，洗板机，精确移夜管，专用冰箱，离心机，水浴箱，温箱等n消毒和污染处理设施n安全防护设施艾滋病检测方法的意义艾滋病检测方法的意义n nHIVHIV抗体筛查检测抗体筛查检测抗体筛查检测抗体筛查检测 HIV/AIDSHIV/AIDS的筛查，但初筛阳性结果不能

3、做为艾滋病诊断依据，需将的筛查，但初筛阳性结果不能做为艾滋病诊断依据，需将该标本送确证实验室进行确证。该标本送确证实验室进行确证。n nHIVHIV抗体确认检测（免疫印迹试验）抗体确认检测（免疫印迹试验）抗体确认检测（免疫印迹试验）抗体确认检测（免疫印迹试验）-HIV/AIDS-HIV/AIDS诊断的诊断的唯一唯一唯一唯一依据依据 -艾滋病确认实验室负责艾滋病确认实验室负责n nHIVHIV核酸检测核酸检测核酸检测核酸检测 辅助诊断辅助诊断：在特殊情况下，如出现某些非典型的抗体反应，特别是：在特殊情况下，如出现某些非典型的抗体反应，特别是不确定反应时，不确定反应时，RNARNA的测定可提供有用

4、的证据。的测定可提供有用的证据。感染早期：在感染早期：在HIVHIV感染的窗口期，无法使用抗体检测进行诊断，此时感染的窗口期，无法使用抗体检测进行诊断，此时RNARNA的测定具有特殊的意义，提示是否有感染的可能，但仍需追踪的测定具有特殊的意义，提示是否有感染的可能，但仍需追踪检测检测HIVHIV抗体，最终根据抗体的检测情况做出诊断。抗体，最终根据抗体的检测情况做出诊断。病程监控：帮助确定疾病发展的阶段。病程监控：帮助确定疾病发展的阶段。指导治疗方案及疗效测定。指导治疗方案及疗效测定。预测疾病进程预测疾病进程 。抗体检测 根据检测根据检测根据检测根据检测HIVHIV感染后产生的感染后产生的感染后

5、产生的感染后产生的HIVHIV抗体的间接指标而抗体的间接指标而抗体的间接指标而抗体的间接指标而 发展起来的血清学诊断技术，分为发展起来的血清学诊断技术，分为发展起来的血清学诊断技术，分为发展起来的血清学诊断技术，分为初筛试验初筛试验初筛试验初筛试验和和和和确认确认确认确认试试试试 验验验验。初筛试验初筛试验初筛试验初筛试验 用于对检测对象感染情况的初步筛查，检测结果可能用于对检测对象感染情况的初步筛查，检测结果可能用于对检测对象感染情况的初步筛查，检测结果可能用于对检测对象感染情况的初步筛查，检测结果可能会有假阳性，不能发抗体阳性报告会有假阳性，不能发抗体阳性报告会有假阳性，不能发抗体阳性报告

6、会有假阳性，不能发抗体阳性报告确认试验确认试验确认试验确认试验 确定检测对象是否有确定检测对象是否有确定检测对象是否有确定检测对象是否有HIVHIV抗体，可发抗体阳性报告抗体，可发抗体阳性报告抗体，可发抗体阳性报告抗体，可发抗体阳性报告 酶联免疫试验(ELISA)最早用于检测血清中最早用于检测血清中HIV抗体的有效筛抗体的有效筛检方法检方法很高的敏感性和特异性很高的敏感性和特异性根据检测方法，可分成根据检测方法，可分成4类间接法、双类间接法、双抗原夹心法、竞争法和捕获法抗原夹心法、竞争法和捕获法 HIV抗体检测试剂根据其抗原的来源和抗体检测试剂根据其抗原的来源和检测方式可分为四代检测方式可分为

7、四代 筛查试验筛查试验筛查试剂n n经国家食品药品监督管理局注册批准n n在试剂有效期内n n酶联免疫试剂应批批检合格n n临床质量评估敏感性和特异性高第一代ELISA试剂包被抗原：全病毒裂解抗原包被抗原：全病毒裂解抗原窗口期：窗口期：6-8星期星期优点：灵敏度高，可检出各种抗体优点：灵敏度高，可检出各种抗体缺点：制备麻烦，成本高，假阳性缺点：制备麻烦，成本高，假阳性1985年，年，FDA批准第一个批准第一个HIV抗体筛抗体筛选试剂选试剂第二代ELISA试剂包被抗原：重组抗原、合成多肽包被抗原：重组抗原、合成多肽 窗口期：窗口期：4-5星期星期优点：重组抗原可消除优点：重组抗原可消除HLA（人

8、类白细（人类白细胞抗原）所致的抗体假阳性，生产成本胞抗原）所致的抗体假阳性，生产成本低，不使用低，不使用HIV病毒颗粒，较为安全，病毒颗粒，较为安全，敏感性特异性较高敏感性特异性较高缺点：仍有一定的假阳性缺点：仍有一定的假阳性1990年，年，FDA批准第一个重组抗原筛批准第一个重组抗原筛选试剂选试剂第三代ELISA试剂包被抗原：重组抗原加合成多肽包被抗原：重组抗原加合成多肽包被抗原：重组抗原加合成多肽包被抗原：重组抗原加合成多肽合成多肽抗原合成多肽抗原合成多肽抗原合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工是抗原决定簇的氨基酸序列人工是抗原决定簇的氨基酸序列人工是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多

9、肽片段。一般只含有一个抗原决定簇，合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇，合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇，合成的多肽片段。一般只含有一个抗原决定簇，纯度高，特异性也高纯度高，特异性也高纯度高，特异性也高纯度高，特异性也高窗口期：窗口期：窗口期：窗口期：3 3星期左右星期左右星期左右星期左右优点：可检测所有不同种类的抗体，增加了试优点：可检测所有不同种类的抗体，增加了试优点：可检测所有不同种类的抗体，增加了试优点：可检测所有不同种类的抗体，增加了试剂的敏感性和特异性剂的敏感性和特异性剂的敏感性和特异性剂的敏感性和特异性19941994年发展了双抗原夹心法，酶标物由抗人年发展了双抗原夹

10、心法，酶标物由抗人年发展了双抗原夹心法，酶标物由抗人年发展了双抗原夹心法，酶标物由抗人IgGIgG改变为特异性改变为特异性改变为特异性改变为特异性HIVHIV抗原抗原抗原抗原第四代ELISA试剂包被物：重组或多肽抗原包被物：重组或多肽抗原+重组抗体重组抗体窗口期：窗口期：2星期左右星期左右优点：同时检测优点：同时检测HIV抗原抗体，缩短窗抗原抗体，缩短窗 口期口期注意：抗原检测敏感性低于单独抗原试注意：抗原检测敏感性低于单独抗原试 剂剂(5070pg/ml,510pg/ml)1998年第四代试剂首次上市年第四代试剂首次上市HIV抗体试剂盒进展抗体试剂盒进展代次代次抗原抗原方法方法检测时间检测时

11、间1 1全病毒全病毒间接间接 2 2个月个月2 2 重组或多肽重组或多肽 间接间接3-4 3-4 周周3 3 重组重组+多肽多肽夹心夹心2-3 2-3 周周4 4抗原抗原+抗体抗体夹心夹心2 2周左右周左右Closing the window4th gen3rd gen=1st-2nd genHIV antigenIgM abIgG abDetection limit1ng/ml水平上,因此要尽量避免标本间的污染。n n标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时，应离心沉淀后取上清检测。ELISA试验中可能出现的问题试验中可能出现的问题及原因分析及原因分析问题问题可能的原因（非试剂盒本身的

12、原因）可能的原因（非试剂盒本身的原因）弱阳性质控样本检测不出弱阳性质控样本检测不出 温育的时间或温度不够；显色反应时间太短；温育的时间或温度不够；显色反应时间太短；测定的重复性差测定的重复性差（相同样本两次测定结果（相同样本两次测定结果不一致）不一致）（1 1）加样本及试剂量不准；孔间不一致；）加样本及试剂量不准；孔间不一致；（2 2）加样过快，孔间发生污染；）加样过快，孔间发生污染；（3 3）加错样本；）加错样本；（4 4）加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区；）加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区；（5 5）不同批号试剂盒中组分混用；）不同批号试剂盒中组分混用；（6 6）温育时间、洗板、显

13、色时间不一致；）温育时间、洗板、显色时间不一致；（7 7）孔内污染杂物；）孔内污染杂物；（8 8）酶标仪滤光片不正确；）酶标仪滤光片不正确；（9 9）血清标本未完全凝固即加入，反应孔内出现纤维蛋白凝）血清标本未完全凝固即加入，反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞，易出现假阳性反应等。固或残留血细胞，易出现假阳性反应等。问题问题可能的原因（非试剂盒本身的原因）可能的原因（非试剂盒本身的原因）白板白板（阳性对照不显色）（阳性对照不显色）（1 1）漏加酶结合物；）漏加酶结合物；（2 2）洗板液配制中出现问题，如量）洗板液配制中出现问题，如量筒不干净，含酶抑制物（如叠氮钠）筒不干净，含酶抑制物（如叠氮

14、钠）等。等。（3 3）漏加显色剂）漏加显色剂A A或或B B；（4 4）终止剂当显色剂使用。）终止剂当显色剂使用。全部板孔均有显色全部板孔均有显色 （1 1）洗板不干净；）洗板不干净；（2 2）显色液变质；）显色液变质；（3 3）加底物的吸尖受酶或金属离子）加底物的吸尖受酶或金属离子污染；污染；（4 4）洗板液受酶等污染。）洗板液受酶等污染。（5 5）由于仪器或加样头造成的交叉）由于仪器或加样头造成的交叉污染。污染。化学发光或免疫荧光试验化学发光或免疫荧光试验n n这类试剂采用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体。n n原理：HIV抗原或抗体包被于固相载体，加入待检样品和酶或荧光

15、标记的HIV抗原或抗体，加发光或荧光底物，用发光或荧光仪测定结果。有效试验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。快速检测（快速检测（RT）及其它检测）及其它检测试验试验n n这类试验简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测。一般可在1030分钟内得出结果。n n 明胶颗粒凝集试验（PA）：n n原理：将HIV抗原致敏明胶颗粒作为载体，与待检样品作用。当待检样品含有HIV抗体时，明胶颗粒与抗体发生凝集反应，根据凝集情况判读结果。PA试剂有两种:同时检测HIV-1和HIV-2抗体以及分别检测HIV-1和HIV-2抗体。有效试验必须有阴性和阳性质控。凝集实验常用的载体：红细胞、聚苯乙常用的载体：红细胞、

16、聚苯乙烯乳胶颗粒、明胶颗粒、活性烯乳胶颗粒、明胶颗粒、活性碳或硅胶铝颗粒碳或硅胶铝颗粒前滞现象：前滞现象：反应中抗体含量过多，影响抗原抗体的反应中抗体含量过多，影响抗原抗体的理想结合，大量抗体结合于抗原阻碍了理想结合，大量抗体结合于抗原阻碍了交叉联结符合体的形成，使肉眼观察不交叉联结符合体的形成，使肉眼观察不到凝集现象，造成假阴性。到凝集现象，造成假阴性。解决办法解决办法：稀释样品：稀释样品凝集试验注意事项试验应设对照，特别是未包被抗原的载试验应设对照，特别是未包被抗原的载体对照，以防止非特异载体凝集反应的体对照，以防止非特异载体凝集反应的干扰干扰乳胶试剂对于冻融过的血清假阳性率高，乳胶试剂对

17、于冻融过的血清假阳性率高，对于新鲜血清没有这种现象。对于新鲜血清没有这种现象。乳胶试剂切忌冻结，冻结后易发生自凝乳胶试剂切忌冻结，冻结后易发生自凝结果判读要及时，避免假阳性结果判读要及时，避免假阳性HIV抗体检测抗体检测（明胶颗粒凝集试（明胶颗粒凝集试验）验）n n材料材料 血清标本血清标本,U,U型板型板 ,PA ,PA试剂盒试剂盒(“A”(“A”溶解用液溶解用液,”B”,”B”血清血清稀释液稀释液,”C”,”C”致敏颗粒致敏颗粒,”D”,”D”非致敏颗粒非致敏颗粒,阳性对照血清阳性对照血清,专专用滴管用滴管.n n方法方法 (1)(1)从从4 4冰箱取出试剂盒冰箱取出试剂盒,恢复至室温后使

18、用恢复至室温后使用.(2)(2)从从1:41:4开始做倍比稀释开始做倍比稀释.(3)(3)用专用滴管用专用滴管,第二孔加第二孔加1 1滴滴(25ul)(25ul)非致敏颗粒非致敏颗粒”D”,”D”,第三孔第三孔加加1 1滴滴(25ul)(25ul)致敏颗粒致敏颗粒”C”.”C”.(4)(4)轻轻拍打微量板或在振荡器上振荡轻轻拍打微量板或在振荡器上振荡1 1分钟混合后分钟混合后,室温室温(20(20)静置静置2 2小时后观察结果小时后观察结果.HIV抗体检测抗体检测（明胶颗粒凝集试（明胶颗粒凝集试验）验）n n结果判断 明胶颗粒沉积在孔底明胶颗粒沉积在孔底,周边平滑周边平滑,或形成或形成致密圆圈

19、者为阴性结果致密圆圈者为阴性结果.(-).(-)明胶颗粒沉积在孔底明胶颗粒沉积在孔底,中央形成致密小中央形成致密小环环,周边平滑为可疑反应周边平滑为可疑反应.(+_).(+_)孔内有清晰的宽环且外缘粗糙者孔内有清晰的宽环且外缘粗糙者,为阳为阳性结果性结果.(+/+).(+/+)孔内凝聚颗粒形成均一的膜覆盖在整个孔内凝聚颗粒形成均一的膜覆盖在整个孔底者为强阳性反应孔底者为强阳性反应.(+/+).(+/+)孔内样品与致敏和非致敏颗粒均产生凝孔内样品与致敏和非致敏颗粒均产生凝集者集者,则需作重吸收试验后进一步检测则需作重吸收试验后进一步检测.n n 免疫渗滤试验：斑点ELISA和斑点免疫胶体金（或胶

20、体硒）快速试验n n原理：均以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原点状固定在膜上，加待检样品。阳性结果在膜上抗原部位显示出有色斑点。反应时间在10分钟以内。有效试验的质控点必须显色。n n 免疫层析试验n n原理：以硝酸纤维膜为载体，HIV抗原线状固定在膜上，待检样品（血液或唾液）沿着固相载体迁移，阳性结果在膜上抗原部位显示出有色条带。有效试验的质控带必须显色。n nELISA试剂（试剂（13种）种）丽珠、生物梅里埃、万泰、丽珠、生物梅里埃、万泰、MUREX、绿科、永华、金豪、科华、新创、普生、绿科、永华、金豪、科华、新创、普生、中山、华美、吉比爱中山、华美、吉比爱n n快速试剂（快速试剂（7种）种）

21、科华、新创、科华、新创、PA、雅培、雅培、EY、艾康、艾康、万泰万泰抗体初筛试验的局限性阳性结果不能确认，需用其他试剂复查阳性结果不能确认，需用其他试剂复查阴性结果不能排除阴性结果不能排除HIV感染：在感染早感染：在感染早期，血清阳转前存在期，血清阳转前存在“窗口期窗口期”，在感，在感染晚期，某些抗体可能检测不到（染晚期，某些抗体可能检测不到（如如p24抗体）。反应中抗体过量，抗原抗抗体）。反应中抗体过量，抗原抗体比例不合适而不能形成特定结购，出体比例不合适而不能形成特定结购，出现凝集抑制。现凝集抑制。不能诊断不能诊断18月龄婴儿的母婴垂直感染月龄婴儿的母婴垂直感染新出现的亚群难以检测新出现的

22、亚群难以检测HIV抗体初筛检测结果解释抗体初筛检测结果解释如何判断婴儿是否感染了如何判断婴儿是否感染了HIV？感染了感染了HIVHIV的母亲所生的婴儿可能通过胎盘带有来的母亲所生的婴儿可能通过胎盘带有来自母体的自母体的HIVHIV的的IgGIgG抗体，此时抗体，此时HIVHIV抗体检测阳性并抗体检测阳性并不意味着已被感染。不意味着已被感染。建议在婴儿建议在婴儿9 9个月时进行个月时进行HIVHIV初筛检测初筛检测 如阴性，则判定为未感染如阴性，则判定为未感染HIVHIV。如阳性，则应在婴儿如阳性，则应在婴儿1818个月时进行复检个月时进行复检 阴性：判定为未感染。阴性：判定为未感染。阳性：则将

23、血样送至确证实验室进行阳性：则将血样送至确证实验室进行HIVHIV抗体的确认试验。抗体的确认试验。确认试验的试剂确认试验的试剂 必须是经国家食品药品监督管理局注必须是经国家食品药品监督管理局注必须是经国家食品药品监督管理局注必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、在有效期内的试剂。册批准、在有效期内的试剂。册批准、在有效期内的试剂。册批准、在有效期内的试剂。确认试验方法确认试验方法 包括免疫印迹试验（包括免疫印迹试验（包括免疫印迹试验（包括免疫印迹试验（WBWBWBWB）、条带免疫）、条带免疫）、条带免疫）、条带免疫试验（试验（试验（试验（LIATEK HIVLIATEK HIVLIATEK

24、HIVLIATEK HIV）、放射免疫沉淀试）、放射免疫沉淀试）、放射免疫沉淀试）、放射免疫沉淀试验（验（验（验（RIPARIPARIPARIPA）及免疫荧光试验（）及免疫荧光试验（）及免疫荧光试验（）及免疫荧光试验（IFAIFAIFAIFA）。）。）。）。国内常用的确认试验方法是国内常用的确认试验方法是国内常用的确认试验方法是国内常用的确认试验方法是WBWBWBWB。HIVHIV抗体确认试验抗体确认试验 确认检测流程确认检测流程 先用先用先用先用HIV-1/2HIV-1/2HIV-1/2HIV-1/2混合型试剂进行检测，如果呈混合型试剂进行检测，如果呈混合型试剂进行检测，如果呈混合型试剂进行

25、检测，如果呈阴性反应，则报告阴性反应，则报告阴性反应，则报告阴性反应，则报告HIVHIVHIVHIV抗体阴性；如果呈阳性反应，抗体阴性；如果呈阳性反应，抗体阴性；如果呈阳性反应，抗体阴性；如果呈阳性反应，则报告则报告则报告则报告HIV-1HIV-1HIV-1HIV-1抗体阳性；如果不满足阳性标准，则抗体阳性；如果不满足阳性标准，则抗体阳性；如果不满足阳性标准，则抗体阳性；如果不满足阳性标准，则判为判为判为判为HIVHIVHIVHIV抗体检测结果不确定。抗体检测结果不确定。抗体检测结果不确定。抗体检测结果不确定。如果出现如果出现如果出现如果出现HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2型的特异性指

26、示条带，需用型的特异性指示条带，需用型的特异性指示条带，需用型的特异性指示条带，需用HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2型免疫印迹试剂再做型免疫印迹试剂再做型免疫印迹试剂再做型免疫印迹试剂再做HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2的抗体确认试验，的抗体确认试验，的抗体确认试验，的抗体确认试验，呈阴性反应，报告呈阴性反应，报告呈阴性反应，报告呈阴性反应，报告HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2抗体阴性；呈阳性反应则抗体阴性；呈阳性反应则抗体阴性；呈阳性反应则抗体阴性；呈阳性反应则报告报告报告报告HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2抗体血清学阳性抗体血清学阳性抗体血清学阳性抗体血清学

27、阳性,并将样品送国家参比并将样品送国家参比并将样品送国家参比并将样品送国家参比实验室进行核酸序列分析。实验室进行核酸序列分析。实验室进行核酸序列分析。实验室进行核酸序列分析。艾滋病实验室诊断确认试验艾滋病实验室诊断确认试验艾滋病实验室诊断确认试验艾滋病实验室诊断确认试验(蛋白印迹蛋白印迹蛋白印迹蛋白印迹Western-Western-Blot)Blot)n n原理原理 病毒裂解物抗原经病毒裂解物抗原经SDSSDS聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)(PAGE)分离分离,然后将然后将分离后的抗原转移分离后的抗原转移(印迹印迹)到硝酸纤维薄膜上到硝酸纤维薄膜上,采用类似采用类似ELIS

28、AELISA的技术的技术,当样品中含有当样品中含有HIVHIV抗体时抗体时,它和印迹在硝酸纤维薄膜上的病毒抗原相结它和印迹在硝酸纤维薄膜上的病毒抗原相结合呈现肉眼可见的特异性带型合呈现肉眼可见的特异性带型.HIV-1HIV-1抗体特异带包括：抗体特异带包括：envenv带带 gp160/gp120 gp160/gp120、gp41gp41；gaggag带带 p55 p55、p24p24、p17p17（或（或p18p18）；）；pol pol带带 p66 p66（或（或p65p65）、）、p51p51、p31p31。HIV-2 HIV-2抗体特异条带包括：抗体特异条带包括：envenv带带 gp

29、140/gp105 gp140/gp105、gp36gp36；gaggag带带 p56 p56、p26p26、p16p16；polpol带带 p68 p68、p53p53、p34p34。（由于使用的毒株不同，（由于使用的毒株不同，HIV-2 envHIV-2 env带也可为带也可为gp125/gp80gp125/gp80、gp36gp36）。）。WB原理原理 确认试验结果的判定确认试验结果的判定下面是我国使用下面是我国使用下面是我国使用下面是我国使用WBWBWBWB确认确认确认确认HIVHIVHIVHIV感染的判定标准和判定结果的基本原则。在实际工感染的判定标准和判定结果的基本原则。在实际工感

30、染的判定标准和判定结果的基本原则。在实际工感染的判定标准和判定结果的基本原则。在实际工作中还应参照所用试剂盒说明书综合判定，遇疑难情况应报上级实验室解决作中还应参照所用试剂盒说明书综合判定，遇疑难情况应报上级实验室解决作中还应参照所用试剂盒说明书综合判定，遇疑难情况应报上级实验室解决作中还应参照所用试剂盒说明书综合判定，遇疑难情况应报上级实验室解决。&HIV-1HIV-1抗体阳性（抗体阳性（+）至少有至少有至少有至少有2 2 2 2条条条条envenvenvenv带（带（带（带（gp41gp41gp41gp41和和和和gp160/gp120gp160/gp120gp160/gp120gp160

31、/gp120）出现，或至少）出现，或至少）出现，或至少）出现，或至少1 1 1 1条条条条envenvenvenv带带带带和和和和p24p24p24p24带同时出现。带同时出现。带同时出现。带同时出现。&HIV-2HIV-2抗体阳性（抗体阳性（+）同时符合以下同时符合以下同时符合以下同时符合以下2 2 2 2条标准可判为条标准可判为条标准可判为条标准可判为HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2抗体血清学阳性：抗体血清学阳性：抗体血清学阳性：抗体血清学阳性：（1 1 1 1）符合）符合）符合）符合WHOWHOWHOWHO阳性判定标准，即出现至少阳性判定标准，即出现至少阳性判定标准，即出现至少阳

32、性判定标准，即出现至少2 2 2 2条条条条envenvenvenv带（带（带（带（gp36gp36gp36gp36和和和和gp140/gp105gp140/gp105gp140/gp105gp140/gp105）。）。）。）。（2 2 2 2）符合试剂盒提供的阳性判定标准。）符合试剂盒提供的阳性判定标准。）符合试剂盒提供的阳性判定标准。）符合试剂盒提供的阳性判定标准。&HIVHIV抗体阴性（抗体阴性（-）无无无无HIVHIVHIVHIV抗体特异带出现。抗体特异带出现。抗体特异带出现。抗体特异带出现。&HIVHIV抗体不确定（抗体不确定（）出现出现出现出现HIVHIVHIVHIV抗体特异带，但

33、不足以判定阳性。抗体特异带，但不足以判定阳性。抗体特异带，但不足以判定阳性。抗体特异带，但不足以判定阳性。HIV抗体WB实验的阳性判断标准 1 3 2 4GP160GP120 P66 P55 P51 GP41 P31 P24 P17 血清对照血清对照 P39 HIV-2特异带特异带WB结果解释HIV不确定结果的分析HIVHIV抗体不确定结果的原因抗体不确定结果的原因抗体不确定结果的原因抗体不确定结果的原因 1.HIV1.HIV早期感染，此时可能仅出现早期感染，此时可能仅出现早期感染，此时可能仅出现早期感染，此时可能仅出现一条一条一条一条envenv带带带带 或或或或 p24p24、p31p31

34、、p55p55带带带带 2.2.非特异反应，如高丙球蛋白血症、某些病非特异反应，如高丙球蛋白血症、某些病非特异反应，如高丙球蛋白血症、某些病非特异反应，如高丙球蛋白血症、某些病毒性疾病和寄生虫感染、自身免疫性疾病等毒性疾病和寄生虫感染、自身免疫性疾病等毒性疾病和寄生虫感染、自身免疫性疾病等毒性疾病和寄生虫感染、自身免疫性疾病等可引起该现象可引起该现象可引起该现象可引起该现象 3.3.少数晚期艾滋病患者少数晚期艾滋病患者少数晚期艾滋病患者少数晚期艾滋病患者 4.4.与与与与HIVHIV裂解物中的宿主细胞成分发生交叉裂解物中的宿主细胞成分发生交叉裂解物中的宿主细胞成分发生交叉裂解物中的宿主细胞成分发生交叉 反应反应反应反应 5.O5.O亚型毒株亚型毒株亚型毒株亚型毒株 解决办法：随访解决办法：随访解决办法：随访解决办法：随访窗口期窗口期n n定义 从从HIVHIV感染到感染到HIVHIV抗体被检出的时间抗体被检出的时间,一般一般为六周到十二周为六周到十二周窗口期的决定因素窗口期的决定因素初筛试剂质量和测试技术初筛试剂质量和测试技术机体免疫反应机体免疫反应病毒特性病毒特性 -窗口期无法避免谢谢大家