探究培养液中酵母菌种群的动态变化.ppt
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1、探究培养液中酵母菌数量的动态变化探究培养液中酵母菌数量的动态变化1实验原理:实验原理:(1)在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。随时间而发生的数量变化。(2)养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群)养分、空间、温度和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素。数量持续增长的限制因素。2实验目的:实验目的:(1)通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化,尝)通过探
2、究培养液中酵母菌种群数量的变化,尝试建构种群增长的数学模型。试建构种群增长的数学模型。(2)用数学模型解释种群数量的变化。)用数学模型解释种群数量的变化。(3)学会使用血球计数板进行计数。)学会使用血球计数板进行计数。三、探究培养液中酵母菌种群数量的变化三、探究培养液中酵母菌种群数量的变化1 1、提出问题:、提出问题:(用问句用问句)2 2、作出假设、作出假设:(用用陈述句陈述句)培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?也可以提出其他的探究问题,例如,也可以提出其他的探究问题,例如,在不同温度(以及通氧、通在不同温度(以及通氧、通CO2等)条件下
3、酵母菌种群等)条件下酵母菌种群数量增长的情况如何?数量增长的情况如何?不同培养液(如加糖和不加糖)中酵母菌种群数量增长不同培养液(如加糖和不加糖)中酵母菌种群数量增长的情况如何?等等。的情况如何?等等。开始在资源和空间无限多的环境中,酵母菌呈J型增长,随着时间的推移环境中资源和空间逐渐变得有限,代谢废物的积累,酵母菌呈S型增长.实验过程实验过程一、材料用具一、材料用具探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板(方格)、滴管、显微镜等。管、血球计数板(方格)、滴管、显微镜等。二、方法步骤和记录二、方法步骤和记录1、取相同试管
4、若干支,分别加入、取相同试管若干支,分别加入5ml肉汤培养液,塞上肉汤培养液,塞上棉塞。棉塞。2、用高压锅进行、用高压锅进行_灭菌后冷却至室温,标记甲、灭菌后冷却至室温,标记甲、乙、丙等。乙、丙等。3、将酵母菌母液分别加入试管各、将酵母菌母液分别加入试管各5ml,摇匀后用,摇匀后用_计数起始酵母液个数,做好记录。计数起始酵母液个数,做好记录。4、将各试管送进恒温箱,、将各试管送进恒温箱,_下培养下培养7天。天。高压蒸汽高压蒸汽血球计数板血球计数板25液体培养基马铃薯培养液在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?培养条件,培养条件,28,连续培养,连续培养
5、,连续培养,连续培养7 7天天天天计数计数培养液配制培养液配制灭菌灭菌接种接种培养培养需进行灭菌需进行灭菌,防止杂菌干扰,防止杂菌干扰,造成试验数据错误造成试验数据错误如何计数?如何计数?随机取样,多次计数,取平均值随机取样,多次计数,取平均值(1)血球计数板构造:实物图正面图纵切面图计数室,2个滴液处血球计数板血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。的一种仪器。一个特制的可在显微镜下观察的一个特制的可在显微镜下观察的玻片玻片大方大方格格中方格中方格小方格小方格计数室计数室平台上有九个平台上有九个大方格大方格的方格的方格网,中间大方网,中间大方
6、格为计数室格为计数室计数室计数室放大计数室有两种规格:计数室有两种规格:一是分为一是分为16个中方格,个中方格,每中方格中有每中方格中有25个小方格;个小方格;另一种是分为另一种是分为25个中方格,个中方格,每中方格有每中方格有16个小方格。个小方格。两种都共有两种都共有400个小方格。个小方格。计数室计数室计数时用计数时用25中格的计数板中格的计数板,要按对角线方位,取左上、左下、右上、右下、中央,要按对角线方位,取左上、左下、右上、右下、中央5个中格个中格(即即80小格小格)的酵母菌数。的酵母菌数。如果是如果是16中格计数板中格计数板,则只数四角上的四格酵母菌数(即则只数四角上的四格酵母菌
7、数(即100小格)。然后求出一小格)。然后求出一个小方格的细胞平均数个小方格的细胞平均数(N)放大放大放大放大 对于压在小方格界线上的酵母菌应取对于压在小方格界线上的酵母菌应取相邻相邻两边及顶角两边及顶角计数。计数。c.从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次几次,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽,用滴管吸取少许,从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多,将计数室内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴(不宜过多,将计数室充满即可),勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流充满即可),勿使气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽
8、中流出的多余菌悬液。出的多余菌悬液。方方法法a.视待测菌悬液浓度,以每小格的菌数视待测菌悬液浓度,以每小格的菌数可数为度。可数为度。培养后期的样液稀释后再计培养后期的样液稀释后再计培养后期的样液稀释后再计培养后期的样液稀释后再计数,数,数,数,加无菌水适当稀释加无菌水适当稀释,如菌液不浓,如菌液不浓,可不必稀释。可不必稀释。b.取洁净的血球计数板取洁净的血球计数板一块,一块,在计数在计数区上盖上一块盖玻片。区上盖上一块盖玻片。d.静置片刻静置片刻(待细胞全部沉降到计数室底部),将血球计(待细胞全部沉降到计数室底部),将血球计数板置载物台上夹稳,数板置载物台上夹稳,先在低先在低倍镜下找到计数区后
9、,倍镜下找到计数区后,再转再转换高换高倍镜观察并计数倍镜观察并计数.由于生活细胞的折光率和水的折光由于生活细胞的折光率和水的折光率相近,率相近,观察时应减弱光照的强度。观察时应减弱光照的强度。滴液处滴液处 e一般选取计数室内四个角及中央一般选取计数室内四个角及中央五个中方格计数,若细胞位于小方五个中方格计数,若细胞位于小方格的线上,应遵循格的线上,应遵循“数上线不数下数上线不数下线,数左线不数右线线,数左线不数右线”的原则,以的原则,以减少误差。减少误差。f.对于出芽的酵母菌,对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算大小一半时,即可作为两个菌体计算。每个样
10、品计数应重复每个样品计数应重复3次次(每次数值不(每次数值不应相差过大,否则应重新操作),取其应相差过大,否则应重新操作),取其平均值平均值,求出每一个小格中细胞平均数求出每一个小格中细胞平均数(N),按公式计算出每),按公式计算出每ml菌悬液所含菌悬液所含酵母菌细胞数量。酵母菌细胞数量。g.测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗干净,切勿用硬切勿用硬物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。物洗刷或抹擦,以免损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保存。干,放入盒内保存。第第 4 4 天天第第 6 6 天天第第
11、1 1 天天死亡死亡第第 7 7 天天此法计得的是活菌体和死菌体的总和此法计得的是活菌体和死菌体的总和每隔每隔24小时小时取样计数。取样计数。(注意计数时间每天要固定注意计数时间每天要固定)三、现象观察三、现象观察每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7 7天。天。菌数 时间 (天)次数起始1234567123平均多次测量取平均值。多次测量取平均值。减少误差,力求准确。减少误差,力求准确。四、实验结论四、实验结论1、根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群数、根据表格平均值作出
12、培养液中酵母菌种群数量量7天中的变化曲线。天中的变化曲线。2、培养液酵母菌种群数量随时间呈、培养液酵母菌种群数量随时间呈_型增长型增长变化。变化。S探究实验设计时要遵循的原则:探究实验设计时要遵循的原则:科学性原则、可行性原则、科学性原则、可行性原则、对照原则对照原则、单一变量原则和平行重复原则。单一变量原则和平行重复原则。本探究需要设置对照吗?如果需要,请讨论说明怎样设计;本探究需要设置对照吗?如果需要,请讨论说明怎样设计;如不需要,请说明理由。如不需要,请说明理由。第第1天天第第4天天第第6天天第第7天天不需要。不需要。因为该实验在时间上形成前后的自身对照因为该实验在时间上形成前后的自身对
13、照1、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施?样的措施?无菌水稀释后,再用血球计数板计数无菌水稀释后,再用血球计数板计数.活菌数活菌数出生率出生率 死亡率死亡率出生率出生率死亡率死亡率出生率出生率 死亡率死亡率调整期调整期对数期对数期稳定期稳定期衰亡期衰亡期调整期调整期对数期对数期稳定期稳定期 衰亡期衰亡期2.讨论:血球计数板上的误差应如何减少,力求准确?多次测量取平均值。一个小组取同样的菌液进行计数,取平均值。如果镜检是发现小格内酵母菌过多,则应当稀释如果镜检是发现小格内酵母菌过多,则应当稀释后再计数。后再计数。(2)计算A
14、/525B以一个大方格有以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计个中方格的计数板为例进行计算:假设五个中方格中总菌数为算:假设五个中方格中总菌数为A,菌液,菌液稀释稀释倍数倍数为为B,那么,一个大方格中的总菌数(即,那么,一个大方格中的总菌数(即3中的总中的总菌数)为:菌数)为:提示:1ml1cm3=1000mm31ml菌液总的总菌数为:菌液总的总菌数为:A/525B10100050000AB(个)(个)酵母菌计数方法:酵母菌计数方法:将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。为以
15、此为根据,估算试管中的酵母菌总数。为抽样检测法抽样检测法抽样检测法。抽样检测法。在探究在探究“培养液中酵母菌种群的数量变化培养液中酵母菌种群的数量变化”的实验中,的实验中,某学生的部分实验操作过程是这样的:某学生的部分实验操作过程是这样的:从静置试管中吸取酵母菌培养液进行计数,记录数据;从静置试管中吸取酵母菌培养液进行计数,记录数据;把酵母菌培养液放置在冰箱中;把酵母菌培养液放置在冰箱中;第七天再取样计数,记录数据,统计分析绘成曲线。第七天再取样计数,记录数据,统计分析绘成曲线。请纠正该同学实验操作中的错误请纠正该同学实验操作中的错误。应将试管轻轻震荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数应将试管轻轻
16、震荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数应连续七天,每天观察、取样计数并记录数据应连续七天,每天观察、取样计数并记录数据应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养巩固练习在计算酵母菌个数的时候经常用到血球计数板,下列说法正确的是()A.血球计数板只能对活细菌计数B.血球计数板每个计数室内的容积为1mm3C.血球计数板在滴加样品的时候应该先滴加,后盖盖玻片D.遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作为两个菌体计数D3?在探究酵母菌种群数量变化时,酵母菌计数通在探究酵母菌种群数量变化时,酵母菌计数通常采用显微镜下观察并用血球计数板计数的方常采用显微镜下观察并用血球计数板
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