生物化学第二章核酸的结构和功能.ppt

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1、目目 录录第 二 章核酸的结构和功能核酸的结构和功能Structure and Function of Nucleic Acid目目 录录核核 酸酸(nucleic acid)是以单核苷酸为基本组成单位的生物是以单核苷酸为基本组成单位的生物大分子，功能是携带和传递遗传信息。大分子，功能是携带和传递遗传信息。目目 录录一、核酸的发现和研究工作进展一、核酸的发现和研究工作进展 1868年年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取从脓细胞中提取“核素核素”1944年年 Avery等人等人证实证实DNA是遗传物质是遗传物质1953年年 Watson和和Crick发现发现DNA的双螺旋结构的双

2、螺旋结构1968年年 Nirenberg发现发现遗传密码遗传密码1975年年 Temin和和Baltimore发发现现逆转录酶逆转录酶1981年年 Gilbert和和Sanger建建立立DNA 测序方法测序方法1985年年 Mullis发明发明PCR 技术技术1990年年 美国启动美国启动人类基因组计划人类基因组计划(HGP)1994年年 中国人类基因组计划启动中国人类基因组计划启动2001年年 美、英等国美、英等国完成人类基因组计划基本框架完成人类基因组计划基本框架目目 录录二、核酸的分类及分布二、核酸的分类及分布 90%90%以以上上分分布布于于细细胞胞核核，其其余余分分布布于于核外核外如

3、线粒体，叶绿体，质粒等。如线粒体，叶绿体，质粒等。分布于胞核、胞液。分布于胞核、胞液。(deoxyribonucleic acid,DNA)(ribonucleic acid,RNA)脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸 核糖核酸核糖核酸携带遗传信息，决定细胞和个携带遗传信息，决定细胞和个体的基因型体的基因型(genotype)。参与细胞内参与细胞内DNA遗传信息的表遗传信息的表达。某些病毒达。某些病毒RNA也可作为遗也可作为遗传信息的载体。传信息的载体。目目 录录第一节第一节核酸核酸的化学组成及其一级结构的化学组成及其一级结构The Chemical Component and Primary Stru

4、cture of Nucleic Acid目目 录录核酸的化学组成核酸的化学组成 1.元素组成元素组成C、H、O、N、P特点特点:P/核酸核酸=9%2.分子组成分子组成 碱基碱基(base)：嘌呤碱，嘧啶碱：嘌呤碱，嘧啶碱戊糖戊糖(ribose)：核糖，脱氧核糖：核糖，脱氧核糖 磷酸磷酸(phosphate)目目 录录嘌呤嘌呤(purine)腺嘌呤腺嘌呤(adenine,A)鸟嘌呤鸟嘌呤(guanine,G)碱碱 基基目目 录录嘧啶嘧啶(pyrimidine)胞嘧啶胞嘧啶(cytosine,C)尿嘧啶尿嘧啶(uracil,U)胸腺嘧啶胸腺嘧啶(thymine,T)目目 录录戊戊 糖糖（构成（构

5、成RNA）12345核糖核糖(ribose)（构成（构成DNA）脱氧核糖脱氧核糖(deoxyribose)目目 录录核苷：核苷：AR,GR,UR,CR脱氧核苷：脱氧核苷：dAR,dGR,dTR,dCR一、核苷酸的结构一、核苷酸的结构1.核苷核苷(ribonucleoside)的形成的形成碱基和核糖（脱氧核糖）通过碱基和核糖（脱氧核糖）通过糖糖苷键苷键连接形成核苷（脱氧核苷）。连接形成核苷（脱氧核苷）。11目目 录录核苷酸核苷酸：AMP,GMP,UMP,CMP脱氧脱氧核苷酸：核苷酸：dAMP,dGMP,dTMP,dCMP 2.核苷酸核苷酸(ribonucleotide)的结构与命名的结构与命名核

6、苷核苷（脱氧核苷）和磷酸以脱氧核苷）和磷酸以磷酸酯键磷酸酯键连接形成核苷酸（脱氧核苷酸）。连接形成核苷酸（脱氧核苷酸）。体内重要的游离核苷酸及其衍生物体内重要的游离核苷酸及其衍生物l含核苷酸的生物活性物质：含核苷酸的生物活性物质：NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含等都含有有 AMPl 多磷酸核苷酸：多磷酸核苷酸：NMP，NDP，NTPl 环化核苷酸环化核苷酸:cAMP，cGMPAMPAMPADPADPATPATPcAMPcAMPNADP+NAD+目目 录录5端端3端端3.3.核苷酸的连接核苷酸的连接 核苷酸之间以核苷酸之间以磷酸二酯键磷酸二酯键连接形连接形成多核苷酸链，即成多核

7、苷酸链，即核酸。核酸。CGA目目 录录二、核酸的一级结构二、核酸的一级结构定义定义核核酸酸中中核核苷苷酸酸的的排排列顺序。列顺序。由由于于核核苷苷酸酸间间的的差差异异主主要要是是碱碱基基不不同同，所所以也称为以也称为碱基序列碱基序列。55端端3端端CGAA G P5 P T PG PC PT P OH 3 书写方法书写方法5 pApCpTpGpCpT-OH 3 5 A C T G C T 3 目目 录录目目 录录第二节第二节DNA的空间结构与功能的空间结构与功能Dimensional Structure and Function of DNA目目 录录DNA的二级结构的二级结构-双螺旋结构双螺

8、旋结构DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义双螺旋结构的研究背景和历史意义DNA双螺旋结构模型要点双螺旋结构模型要点DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装的超螺旋结构及其在染色质中的组装DNA的超螺旋结构的超螺旋结构原核生物原核生物DNA的高级结构的高级结构DNA在真核生物细胞核内的组装在真核生物细胞核内的组装DNA的功能的功能目目 录录一、一、DNA的二级结构的二级结构双螺旋结构双螺旋结构（一）（一）DNA双螺旋结构的研究背景双螺旋结构的研究背景 碱基组成分析碱基组成分析Chargaff 规则：规则：A=T,G=C.A+G=T+C.种不同种不同DNA组成不同组成不同.同一个体的不同细胞同一个体

9、的不同细胞DNA相同相同.碱基的理化数据分析碱基的理化数据分析A-T、G-C以以氢键氢键配对较合理配对较合理DNA纤维的纤维的X-线衍射图谱分析线衍射图谱分析 目目 录录（二）（二）DNA双螺旋结构模型要点双螺旋结构模型要点（Watson,Crick,1953）uDNADNA分分子子由由两两条条相相互互平平行行但但走走向向相相反反的的脱脱氧氧多多核核苷苷酸酸链链组组成成，两两链链以以-脱脱氧氧核核糖糖-磷磷酸酸-为为骨骨架架，以以右右手手螺螺旋旋方方式式绕绕同同一一公公共共轴轴盘盘。螺螺旋旋直直径径为为2 2nm，形形成成大大沟沟(major groove)及及小小沟沟(minor groov

10、e)相间。相间。目目 录录u碱碱基基垂垂直直螺螺旋旋轴轴居居双双螺螺旋旋内内側側，与与对对側側碱碱基基形形成成氢氢键键配配对对（互互补补配配对对形形式式：A=T;G C）。u相邻碱基平面距离相邻碱基平面距离0.34nm，螺旋一圈螺距螺旋一圈螺距3.4nm，一圈，一圈10对对碱基。碱基。目目 录录目目 录录碱基互补配对碱基互补配对 TAGCu氢氢键键维维持持双双链链横横向向稳稳定定性性，碱碱基基堆堆积积力力维维持持双双链链纵向稳定性纵向稳定性。目目 录录（三）（三）DNA双螺旋结构的多样性双螺旋结构的多样性目目 录录目目 录录二、二、DNA的超螺旋结构及其在染色质的超螺旋结构及其在染色质中的组装

11、中的组装（一）（一）DNA的超螺旋结构的超螺旋结构超螺旋结构超螺旋结构(superhelix 或或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。正超螺旋正超螺旋(positive supercoil)盘绕方向与盘绕方向与DNA双螺旋方同相同双螺旋方同相同 负超螺旋负超螺旋(negative supercoil)盘绕方向与盘绕方向与DNA双螺旋方向相反双螺旋方向相反 目目 录录意义意义DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于变化及其调控对于DNA复制和复制和RNA转录过转录过程具有关键作用。程具有关键作用。目目 录

12、录（二）原核生物（二）原核生物DNA的高级结构的高级结构环状目目 录录（三）（三）DNA在真核生物细胞核内的组装在真核生物细胞核内的组装真真核核生生物物染染色色体体由由DNA和和蛋蛋白白质质构构成成，其基本单位是其基本单位是 核小体核小体(nucleosome)。核小体的组成核小体的组成DNA：约约200bp 组蛋白：组蛋白：H1H2A，H2BH3H4目目 录录目目 录录目目 录录三、三、DNA的功能的功能DNA的基本功能：的基本功能：复制和转录的模板复制和转录的模板是是以以基基因因的的形形式式荷荷载载遗遗传传信信息息，它它是是生生命命遗遗传传的的物物质质基基础础，也也是是个个体体生生命命活活

13、动动的的信信息基础。息基础。基因：基因：DNA的功能区段。的功能区段。基因组：基因组：全部基因序列全部基因序列目目 录录第三节第三节 RNA的结构与功能的结构与功能Structure and Function of RNA目目 录录RNA的种类、分布、功能的种类、分布、功能一一、信使、信使RNA的结构与功能的结构与功能hnRNA 内含子内含子(intron)mRNA *mRNA成熟过程成熟过程 外显外显子子(exon)目目 录录目目 录录*mRNA结构特点结构特点1.帽帽：大大多多数数真真核核mRNA的的5末末端端均均在在转转录录后后加加上上一一个个7-甲甲基基鸟鸟苷苷，同同时时第第一一个个核

14、核苷苷酸酸的的C2也是甲基化，形成帽子结构：也是甲基化，形成帽子结构：m7GpppNm-。2.尾：大多数真核尾：大多数真核mRNA的的3末端有一个多聚腺末端有一个多聚腺苷酸苷酸(polyA)结构，称为多聚结构，称为多聚A尾。尾。3.编码区：核苷酸残基编码区：核苷酸残基目目 录录帽子结构帽子结构目目 录录mRNA核内向胞质的转位核内向胞质的转位mRNA的稳定性维系的稳定性维系翻译起始的调控翻译起始的调控 帽子结构和帽子结构和多聚多聚A尾的功能尾的功能目目 录录*mRNA的功能的功能 把把DNA所所携携带带的的遗遗传传信信息息，按按碱碱基基互互补补配配对对原原则则，抄抄录录并并传传送送至至核核糖糖

15、体体，用用以以决决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。DNAmRNA蛋白蛋白转录转录翻译翻译原核细胞原核细胞 细胞质细胞质细胞核细胞核DNA内含子内含子外显子外显子转录转录转录后剪接转录后剪接转运转运mRNAhnRNA翻译翻译蛋白蛋白真核细胞真核细胞 目目 录录tRNA的一级结构特点的一级结构特点分子量小，分子量小，稀有碱基稀有碱基多多 含含 1020%稀有碱基，如稀有碱基，如 DHU 3末端为末端为 CCA-OH 5末端大多数为末端大多数为G 具有具有 T C 二、转运二、转运RNA的结构与功能的结构与功能目目 录录N,N二甲基鸟嘌呤二甲基鸟嘌呤N6-异戊烯腺嘌呤

16、异戊烯腺嘌呤双氢尿嘧啶双氢尿嘧啶4-巯尿嘧啶巯尿嘧啶 稀有碱基稀有碱基 目目 录录tRNA的二级结构的二级结构三叶草形三叶草形四四臂臂三三环环:氨基酸臂氨基酸臂 DHU(臂臂)环环 反密码反密码(臂臂)环环 额外环额外环(可变臂可变臂)TC(臂臂)环环氨基酸氨基酸臂臂额外环额外环目目 录录*tRNA的三级结构的三级结构 倒倒L形形*tRNA的功能的功能活活化化、搬搬运运氨氨基基酸酸到到核核糖糖体体，参参与与蛋蛋白质的翻译。白质的翻译。目目 录录*rRNA的含量多的含量多rRNA的结构的结构三、核蛋白体三、核蛋白体RNA的结构与功能的结构与功能*rRNA的功能的功能参参与与组组成成核核蛋蛋白白体

17、体，作作为为蛋蛋白白质质生生物物合成的场所。合成的场所。目目 录录*rRNA的种类（根据沉降系数）的种类（根据沉降系数）真核生物真核生物5S rRNA28S rRNA5.8S rRNA18S rRNA原核生物原核生物5S rRNA23S rRNA16S rRNA目目 录录核蛋白体的组成核蛋白体的组成原核生物（以大肠杆菌为例）原核生物（以大肠杆菌为例）真核生物（以小鼠肝为例）真核生物（以小鼠肝为例）小亚基小亚基30S40SrRNA16S1542个核苷酸个核苷酸18S1874个核苷酸个核苷酸蛋白质蛋白质21种种占总重量的占总重量的40%33种种占总重量的占总重量的50%大亚基大亚基50S60SrR

18、NA23S5S2940个核苷酸个核苷酸120个核苷酸个核苷酸28S5.85S5S4718个核苷酸个核苷酸160个核苷酸个核苷酸120个核苷酸个核苷酸蛋白质蛋白质31种种占总重量的占总重量的30%49种种占总重量的占总重量的35%目目 录录四四、其他小分子、其他小分子RNA及及RNA组学组学除除了了上上述述三三种种RNA外外，细细胞胞的的不不同同部部位位存存在在的的许许多多其其他他种种类类的的小小分分子子RNA，统统称称为为非非mRNA小小RNA(small non-messenger RNAs,snmRNAs)。snmRNAs目目 录录snmRNAs的的种类种类核内小核内小RNARNA核仁小核

19、仁小RNARNA胞质小胞质小RNARNA催化性小催化性小RNARNA小片段干涉小片段干涉 RNARNA snmRNAs的的功能功能参与参与hnRNA和和rRNA的加工和转运。的加工和转运。目目 录录RNARNA组组学学研研究究细细胞胞中中snmRNAs的的种种类类、结结构构和和功功能能。同同一一生生物物体体内内不不同同种种类类的的细细胞胞、同同一一细细胞胞在在不不同同时时间间、不不同同状状态态下下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。的表达具有时间和空间特异性。RNARNA组学组学核核 酸酸 的的 理理 化化 性性 质质The Physical and Chemical Character

20、s of Nucleic Acid第第 四四 节节目目 录录目目 录录l两性电离两性电离l紫外吸收紫外吸收l变性变性l复性复性l分子杂交分子杂交目目 录录+带正电荷的核酸带正电荷的核酸带负电荷的核酸带负电荷的核酸兼性离子兼性离子酸酸碱碱一两性电离一两性电离目目 录录二紫外吸收二紫外吸收1.DNA或或RNA的定量的定量OD260=1.0相当于相当于50 g/ml双链双链DNA40g/ml单链单链DNA（或（或RNA）20g/ml寡核苷酸寡核苷酸2.判断核酸样品的纯度判断核酸样品的纯度DNA纯品纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品纯品:OD260/OD280=2.0OD260的应用的应用

21、目目 录录三、三、DNA的变性的变性(denaturation)定义定义：在某些理化因素作用下，在某些理化因素作用下，DNA双链解开双链解开成两条单链的过程。成两条单链的过程。方法：方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。变性后其它理化性质变化：变性后其它理化性质变化：OD260增高增高粘度下降粘度下降比旋度下降比旋度下降浮力密度升高浮力密度升高酸碱滴定曲线改变酸碱滴定曲线改变生物活性丧失生物活性丧失目目 录录目目 录录DNADNA变性的本质是双链间氢键的断裂变性的本质是双链间氢键的断裂例

22、：变性引起紫外吸收值的改变例：变性引起紫外吸收值的改变DNA的紫外吸收光谱的紫外吸收光谱增色效应：增色效应：DNA变性时其溶液变性时其溶液OD260增高的现象。增高的现象。目目 录录热变性热变性解解链链曲曲线线：如如果果在在连连续续加加热热DNADNA的的过过程程中中以以温温度度对对A260A260（absorbanceabsorbance，A A，A260A260代代表表溶溶液液在在260nm260nm处处的的吸吸光光率率）值值作作图图，所所得得的的曲曲线线称称为为解解链曲线链曲线。目目 录录 Tm：变变性性是是在在一一个个相相当当窄窄的的温温度度范范围围内内完完成成，在在这这一一范范围围内

23、内，紫紫外外光光吸吸收收值值达达到到最最大大值值的的50%时时的的温温度度称称为为DNA的的解解链链温温度度，又又称称融融解解温温度度(melting temperature,Tm)。其其大大小小与与G+C含量成正比。含量成正比。目目 录录四、四、DNA的复性的复性 DNA复性复性(renaturation)的定义的定义在适当条件下，变性在适当条件下，变性DNADNA的两条互补链可的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性复性。减色效应减色效应DNA复性时，其溶液复性时，其溶液OD260降低。降低。热变性的热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，经缓慢冷

24、却后即可复性，这一过程称为这一过程称为退火退火(annealing)。目目 录录目目 录录在在DNA变变性性后后的的复复性性过过程程中中，如如果果将将不不同同种种类类的的DNA单单链链分分子子或或RNA分分子子放放在在同同一一溶溶液液中中，只只要要两两种种单单链链分分子子之之间间存存在在着着一一定定程程度度的的碱碱基基配配对对关关系系，在在适适宜宜的的条条件件（温温度度及及离离子子强强度度）下下，就就可可以以在在不不同同的的分分子子间间形形成成杂化双链杂化双链(heteroduplex)。这这种种杂杂化化双双链链可可以以在在不不同同的的DNA与与DNA之之间间形形成成，也也可可以以在在DNA和

25、和RNA分分子子间间或或者者RNA与与RNA分分子子间间形形成成。这这种种现现象象称称为为核核酸酸分子杂交。分子杂交。五核酸分子杂交五核酸分子杂交(hybridization)目目 录录目目 录录DNA-DNA杂交双链分子杂交双链分子变性变性 复性复性 不同来源的不同来源的DNA分子分子目目 录录目目 录录核酸分子杂交的应用核酸分子杂交的应用研究研究DNA分子中某一种基因的位置分子中某一种基因的位置定两种核酸分子间的序列相似性定两种核酸分子间的序列相似性检测某些专一序列在待检样品中存在与检测某些专一序列在待检样品中存在与否否是基因芯片技术的基础是基因芯片技术的基础 目目 录录第第 五五 节节

26、核核 酸酸 酶酶 Nuclease目目 录录核酸酶核酸酶是指所有可以水解核酸的酶是指所有可以水解核酸的酶依据底物不同分类依据底物不同分类DNA酶酶(deoxyribonuclease,DNase)：专一降解专一降解DNA。RNA酶酶(ribonuclease,RNase)：专一降解专一降解RNA。依据切割部位不同依据切割部位不同核酸内切酶：核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。特异性限制性核酸内切酶。核酸外切酶：核酸外切酶：53或或35核酸外切酶。核酸外切酶。目目 录录u参参与与DNA的的合合成成与与修修复复及及RNA合合成成后后的的剪剪接接等重要

27、基因复制和基因表达过程等重要基因复制和基因表达过程 u负负责责清清除除多多余余的的、结结构构和和功功能能异异常常的的核核酸酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 u在消化液中降解食物中的核酸以利吸收在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 u体外重组体外重组DNA技术中的重要工具酶技术中的重要工具酶 生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解 核酸酶的功能核酸酶的功能 目目 录录 核核 酶酶u催化性催化性DNA(DNAzyme)人工合成的寡聚脱氧人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解核苷酸片段，也能序列特异性降解R

28、NA。u催化性催化性RNA(ribozyme)作为序列特异性的核作为序列特异性的核酸内切酶降解酸内切酶降解mRNA。目目 录录总结:思路思路:核酸核酸-功能、组成、结构、性质、代谢、功能、组成、结构、性质、代谢、调节、应用。调节、应用。功能：功能：遗传信息的携带和传递。遗传信息的携带和传递。DNA：复制与转录的模板。：复制与转录的模板。RNA：mRNA:翻译的模板，翻译的模板，tRNA：转运：转运AA，rRNA：蛋白合成场所，：蛋白合成场所，组成：组成：元素组成：元素组成：C、H、O、N、P，元素组成特点：元素组成特点：P/核酸核酸=9%目目 录录基本单位组成：单核苷酸基本单位组成：单核苷酸种

29、类种类:核苷酸、脱氧核苷酸核苷酸、脱氧核苷酸通式通式:碱基碱基-戊糖戊糖-磷酸磷酸性质性质:两性电解两性电解.紫外吸收紫外吸收.显色反应显色反应连接方式连接方式:35-磷酸二酯磷酸二酯键键 连接结果连接结果:核酸链核酸链DNA与与RNA区别：区别：碱基戊糖碱基戊糖脱氧核糖脱氧核糖核糖核糖目目 录录结构结构:一级结构一级结构:定义：单核苷酸排列顺序。定义：单核苷酸排列顺序。书写方向：书写方向：，真核真核mRNA一级结构特点：一级结构特点：含量少含量少,帽（帽（m7GpppNm）,尾尾(polyA)tRNA的一级结构特点的一级结构特点:分子量小，稀有碱基多分子量小，稀有碱基多 3 CCA-OH r

30、RNA的的一级结构特点一级结构特点:含量多含量多空间结构：空间结构：二级结构二级结构 三（超）级结构三（超）级结构 DNA 双螺旋双螺旋 超螺旋超螺旋 tRNA 三叶草三叶草 倒倒L形形 目目 录录DNA双螺旋结构特点双螺旋结构特点：两条反向平行脱氧多核苷酸链，右手螺旋盘绕。两条反向平行脱氧多核苷酸链，右手螺旋盘绕。螺距螺距3.4nm，一圈，一圈10对碱基对碱基。外側为脱氧核糖外側为脱氧核糖-磷酸骨架，内側为碱基、碱基磷酸骨架，内側为碱基、碱基间形成氢键（间形成氢键（A=T;G C）。大沟、小沟相间。大沟、小沟相间。稳定性：稳定性：氢键（横向）氢键（横向）碱基堆积力（纵向）。碱基堆积力（纵向）

31、。目目 录录真核真核超螺旋：超螺旋：染色体（核小体为基本单位）染色体（核小体为基本单位）核小体核小体DNA：约：约200bp 组蛋白：组蛋白：H1 H2A，H2B H3 H4目目 录录tRNA三叶草结构特点：三叶草结构特点：氨基酸臂氨基酸臂 携带携带AA DHU（臂）环（臂）环 反密码（臂）环反密码（臂）环 识别密码识别密码 额外（可变）环额外（可变）环 TC（臂）环（臂）环目目 录录性质：性质：两性电离：电泳两性电离：电泳 紫外吸收：定性、定量紫外吸收：定性、定量 显色反应显色反应:变性（空间结构破坏，一结构完整）变性（空间结构破坏，一结构完整）复性（去除变性因素，空间结构和复性（去除变性因

32、素，空间结构和 功能恢复）功能恢复）分子杂交：诊、治疾病分子杂交：诊、治疾病目目 录录变性变性：在某些理化因素作用下，在某些理化因素作用下，DNA双链解开双链解开成两条单链的过程。成两条单链的过程。增色效应：增色效应：DNA变性时其溶液变性时其溶液OD260增高的增高的现象。现象。Tm（解链温度）：（解链温度）：DNA变性时，紫外光吸收变性时，紫外光吸收值达到最大值的值达到最大值的50%时的温度。时的温度。复性：复性：去除变性因素，去除变性因素，在适当条件下，变性在适当条件下，变性DNA恢复天然构象。恢复天然构象。核酸分子杂交：核酸分子杂交：DNA复性过程中，不同来源的复性过程中，不同来源的核酸单链分子，碱基配对形成杂化双链。核酸单链分子，碱基配对形成杂化双链。